石亞玲++++++江笑文++++++鄺燕玲

[摘要] 目的 探討脫-γ-羧基凝血酶原（DCP）及甲胎蛋白（AFP）診斷原發(fā)性肝癌的臨床價(jià)值。 方法 選擇原發(fā)性肝癌患者105例、慢性肝炎患者75例以及肝硬化患者39例為研究對(duì)象，分析DCP和AFP檢測(cè)結(jié)果，并與病理金標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較，評(píng)價(jià)兩種方法對(duì)原發(fā)性肝癌診斷的靈敏度、特異度。 結(jié)果 DCP診斷原發(fā)性肝癌的靈敏度為80.95%，特異度為85.96%，與病理結(jié)果金標(biāo)準(zhǔn)的一致性好（Kappa=0.762）；AFP診斷原發(fā)性肝癌的靈敏度為88.57%，特異度為91.23%，與病理結(jié)果金標(biāo)準(zhǔn)的一致性好（Kappa=0.824）；DCP和AFP聯(lián)合檢測(cè)診斷原發(fā)性肝癌的靈敏度為91.43%，特異度為96.49%；與病理結(jié)果金標(biāo)準(zhǔn)的一致性好（Kappa=0.883）。 結(jié)論 DCP和AFP聯(lián)合檢測(cè)能夠顯著提高原發(fā)性肝癌診斷的靈敏度、特異度以及與病理檢測(cè)結(jié)果的一致性。

[關(guān)鍵詞] 脫-γ-羧基凝血酶原；a甲胎蛋白；原發(fā)性肝癌

[中圖分類(lèi)號(hào)] R735.7 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-4721（2014）07（a）-0073-03

原發(fā)性肝癌是臨床常見(jiàn)的惡性腫瘤，死亡率較高，手術(shù)治療是其根治的主要方法，但是因患者早期常常沒(méi)有明顯的臨床癥狀，而一旦發(fā)現(xiàn)，往往已失去了手術(shù)治療時(shí)機(jī)。因此能夠早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療對(duì)原發(fā)性肝癌的治療效果和預(yù)后具有重要的意義[1]。甲胎蛋白（alpha-fetoprotein，AFP）是臨床上最常用的臨床指標(biāo)，但是其特異性和敏感性相對(duì)較低，因此主要用于臨床篩查。脫-γ-羧基凝血酶原（des-γ-carboxy-prothrombin，DCP）是一種異常的凝血酶原[2-3]，研究發(fā)現(xiàn)其在原發(fā)性肝癌患者血清中具有較高的陽(yáng)性率。本研究通過(guò)回顧性分析105例原發(fā)性肝癌患者的臨床資料，分析DCP和AFP在原發(fā)性肝癌診斷中的臨床價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2012年1月～2013年12月本院收治的原發(fā)性肝癌患者105例為研究對(duì)象，均經(jīng)病理確診，其中男98例，女7例；年齡32～78歲；病因包括病毒性肝炎、肝硬化、酒精性肝炎及原因不明；所有患者TNM分期為Ⅱ期或者Ⅲ期。另選擇在本院診斷治療的其他肝病患者114例作為對(duì)照，包括慢性肝炎75例、肝硬化39例，所有患者均排除原發(fā)性肝癌診斷，其中男105例，女9例，年齡30～76歲。兩組患者的性別、年齡比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。同時(shí)選擇健康體檢者（排除肝、腎、心臟等疾?。?3例為正常對(duì)照組，其中男29例，女24例，年齡26～73歲。

1.2 檢測(cè)方法

所有患者于晨起采集空腹靜脈血，分離血清。DCP采用酶聯(lián)免疫分析法，試劑為美國(guó)ADL公司生產(chǎn)；AFP采用電化學(xué)發(fā)光法，儀器為羅氏公司Cobase601全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光儀，試劑為配套試劑。所有操作參照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。原發(fā)性肝癌患者以及肝硬化患者術(shù)中切除的肝臟組織進(jìn)行10%中性甲醛固定，石蠟包埋，切片，脫蠟，染色后進(jìn)行病理分析。慢性肝炎患者進(jìn)行經(jīng)皮肝臟穿刺，獲得的肝組織經(jīng)10%中性甲醛固定后，行石蠟包埋，采用組織病理學(xué)方法進(jìn)行檢查。

1.3 評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)

陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)：DCP>40 mAU/ml，AFP>400 μg/L。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)量資料以x±s表示，采用F檢驗(yàn)，一致性采用Kappa一致性檢驗(yàn)，相關(guān)性采用Pearson相關(guān)分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 4組DCP和AFP水平的比較

慢性肝病組、肝硬化組及正常對(duì)照組的DCP和AFP水平均低于原發(fā)性肝癌組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）（表1）。

表1 4組DCP和AFP水平的比較（x±s）

與原發(fā)性肝癌組比較，*P<0.01

2.2 原發(fā)性肝癌組DCP檢測(cè)結(jié)果與病理金標(biāo)準(zhǔn)的一致性

DCP診斷原發(fā)性肝癌的靈敏度為80.95%，特異度為85.96%，與金標(biāo)準(zhǔn)具有較好的一致性（Kappa=0.762）（表2）。

表2 原發(fā)性肝癌組DCP檢測(cè)結(jié)果與病理金標(biāo)準(zhǔn)的一致性（n）

2.3 原發(fā)性肝癌組AFP檢測(cè)結(jié)果與病理金標(biāo)準(zhǔn)的一致性

AFP診斷原發(fā)性肝癌的靈敏度為88.57%，特異度為91.23%，與金標(biāo)準(zhǔn)具有很好的一致性（Kappa=0.824）（表3）。

表3 原發(fā)性肝癌組AFP檢測(cè)結(jié)果與病理金標(biāo)準(zhǔn)的一致性（n）

2.4 原發(fā)性肝癌組DCP和AFP聯(lián)合檢測(cè)結(jié)果與病理金標(biāo)準(zhǔn)的一致性

DCP和AFP聯(lián)合診斷原發(fā)性肝癌的靈敏度為91.43%，特異度為96.49%，與金標(biāo)準(zhǔn)具有很好的一致性（Kappa=0.883）（表4）。

表4 原發(fā)性肝癌組DCP和AFP聯(lián)合檢測(cè)結(jié)果與病理金標(biāo)準(zhǔn)的

一致性（n）

2.5 DCP和AFP水平的相關(guān)性

血清DCP和AFP水平無(wú)相關(guān)性（r=0.041，P>0.05）。

3 討論

原發(fā)性肝癌是我國(guó)常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，其病因和發(fā)病機(jī)制尚未確定，目前認(rèn)為與肝硬化、病毒性肝炎以及黃曲霉素等化學(xué)致癌物質(zhì)和環(huán)境因素有關(guān)。AFP是一種糖蛋白，主要來(lái)自胚胎的肝細(xì)胞，胎兒出生后約兩周AFP從血液中消失，因此正常人血清中AFP含量<10 μg/L。當(dāng)肝細(xì)胞發(fā)生癌變時(shí)，又恢復(fù)了產(chǎn)生AFP的功能，且隨著病情惡化，AFP在血清中的含量會(huì)急劇增加，因此AFP就成了診斷原發(fā)性肝癌的一個(gè)特異性臨床指標(biāo)。血清AFP持續(xù)≥400 μg/L，并能排除妊娠、活動(dòng)性肝病等，即可考慮肝癌的診斷[4]。AFP作為診斷原發(fā)性肝癌的特異性腫瘤標(biāo)志物，具有確立診斷、早期診斷、鑒別診斷的作用。臨床發(fā)現(xiàn)，部分肝硬化患者會(huì)持續(xù)出現(xiàn)AFP≥400 μg/L，卻多年都沒(méi)有肝癌的跡象；約20%的晚期肝癌患者，直至病故前，AFP仍<10 μg/L。

DCP是一種異常凝血酶，與正常的凝血酶相比，其γ-羧基谷氨酸結(jié)構(gòu)中有一個(gè)或者多個(gè)谷氨酸殘基不完全羧化為γ-羧基谷氨酸，從而失去正常的凝血功能[3，5]。正常的凝血酶在肝細(xì)胞微粒體內(nèi)依賴(lài)維生素K的γ-谷氨酰羧化酶、維生素K環(huán)氧化酶和維生素K還原酶作用，結(jié)構(gòu)中γ-羧基谷氨酸的10個(gè)谷氨酸殘基羧化成γ-羧基谷氨酸，轉(zhuǎn)變成有活性的凝血酶原，任何一個(gè)位點(diǎn)羧化不全，就會(huì)失去凝血酶原功能，形成DCP[6-7]。肝癌細(xì)胞可能相關(guān)酶的羧化能力發(fā)生變化，羧化酶活性下降，對(duì)維生素K攝取及利用障礙，導(dǎo)致DCP形成。袁聯(lián)文等[8]研究顯示，癌組織產(chǎn)生過(guò)量DCP是肝癌血清DCP的主要來(lái)源，是一種預(yù)后標(biāo)志物，但肝癌血清DCP濃度是癌組織和非癌組織產(chǎn)生DCP濃度的整體表現(xiàn)。有研究顯示，DCP可能具有刺激肝癌細(xì)胞生長(zhǎng)、浸潤(rùn)和促進(jìn)轉(zhuǎn)移等作用[7]。鐘志敏等[9]研究顯示，DCP對(duì)原發(fā)性肝癌具有較高的診斷價(jià)值，且能鑒別診斷原發(fā)性肝癌、繼發(fā)性肝癌及其他良性肝臟疾病，DCP和AFP聯(lián)合診斷可以提高原發(fā)性肝癌的診斷效能。

本研究結(jié)果顯示，DCP診斷原發(fā)性肝癌的靈敏度為80.95%，特異度為85.96%，與金標(biāo)準(zhǔn)的一致性較好（Kappa=0.762）；AFP診斷原發(fā)性肝癌的靈敏度為88.57%，特異度為91.23%，與金標(biāo)準(zhǔn)的一致性較好（Kappa=0.824）；DCP和AFP聯(lián)合診斷原發(fā)性肝癌的靈敏度為91.43%，特異度為96.49%，與金標(biāo)準(zhǔn)的一致性較好（Kappa=0.883）。DCP和AFP聯(lián)合檢測(cè)能夠顯著提高原發(fā)性肝癌診斷的靈敏度、特異度及與病理金標(biāo)準(zhǔn)的一致性。

綜上所述，DCP作為肝癌細(xì)胞內(nèi)羧化異常而產(chǎn)生的一種異常凝血酶原，其在原發(fā)性肝癌患者的血清水平有所升高，可以作為診斷原發(fā)性肝癌的相關(guān)指標(biāo)之一；且DCP與AFP聯(lián)合檢測(cè)能夠顯著提高原發(fā)性肝癌診斷的靈敏度、特異度以及與病理檢測(cè)結(jié)果的一致性，對(duì)診斷AFP陰性的肝癌患者起較好的補(bǔ)充作用。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 周天智，胡建，龔建平.原發(fā)性肝癌的早期診斷流程及治療進(jìn)展[J].中國(guó)現(xiàn)代普通外科進(jìn)展，2013，16（12）：1001-1004.

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（收稿日期：2014-05-05 本文編輯：李亞聰）

DCP是一種異常凝血酶，與正常的凝血酶相比，其γ-羧基谷氨酸結(jié)構(gòu)中有一個(gè)或者多個(gè)谷氨酸殘基不完全羧化為γ-羧基谷氨酸，從而失去正常的凝血功能[3，5]。正常的凝血酶在肝細(xì)胞微粒體內(nèi)依賴(lài)維生素K的γ-谷氨酰羧化酶、維生素K環(huán)氧化酶和維生素K還原酶作用，結(jié)構(gòu)中γ-羧基谷氨酸的10個(gè)谷氨酸殘基羧化成γ-羧基谷氨酸，轉(zhuǎn)變成有活性的凝血酶原，任何一個(gè)位點(diǎn)羧化不全，就會(huì)失去凝血酶原功能，形成DCP[6-7]。肝癌細(xì)胞可能相關(guān)酶的羧化能力發(fā)生變化，羧化酶活性下降，對(duì)維生素K攝取及利用障礙，導(dǎo)致DCP形成。袁聯(lián)文等[8]研究顯示，癌組織產(chǎn)生過(guò)量DCP是肝癌血清DCP的主要來(lái)源，是一種預(yù)后標(biāo)志物，但肝癌血清DCP濃度是癌組織和非癌組織產(chǎn)生DCP濃度的整體表現(xiàn)。有研究顯示，DCP可能具有刺激肝癌細(xì)胞生長(zhǎng)、浸潤(rùn)和促進(jìn)轉(zhuǎn)移等作用[7]。鐘志敏等[9]研究顯示，DCP對(duì)原發(fā)性肝癌具有較高的診斷價(jià)值，且能鑒別診斷原發(fā)性肝癌、繼發(fā)性肝癌及其他良性肝臟疾病，DCP和AFP聯(lián)合診斷可以提高原發(fā)性肝癌的診斷效能。

本研究結(jié)果顯示，DCP診斷原發(fā)性肝癌的靈敏度為80.95%，特異度為85.96%，與金標(biāo)準(zhǔn)的一致性較好（Kappa=0.762）；AFP診斷原發(fā)性肝癌的靈敏度為88.57%，特異度為91.23%，與金標(biāo)準(zhǔn)的一致性較好（Kappa=0.824）；DCP和AFP聯(lián)合診斷原發(fā)性肝癌的靈敏度為91.43%，特異度為96.49%，與金標(biāo)準(zhǔn)的一致性較好（Kappa=0.883）。DCP和AFP聯(lián)合檢測(cè)能夠顯著提高原發(fā)性肝癌診斷的靈敏度、特異度及與病理金標(biāo)準(zhǔn)的一致性。

綜上所述，DCP作為肝癌細(xì)胞內(nèi)羧化異常而產(chǎn)生的一種異常凝血酶原，其在原發(fā)性肝癌患者的血清水平有所升高，可以作為診斷原發(fā)性肝癌的相關(guān)指標(biāo)之一；且DCP與AFP聯(lián)合檢測(cè)能夠顯著提高原發(fā)性肝癌診斷的靈敏度、特異度以及與病理檢測(cè)結(jié)果的一致性，對(duì)診斷AFP陰性的肝癌患者起較好的補(bǔ)充作用。

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（收稿日期：2014-05-05 本文編輯：李亞聰）

DCP是一種異常凝血酶，與正常的凝血酶相比，其γ-羧基谷氨酸結(jié)構(gòu)中有一個(gè)或者多個(gè)谷氨酸殘基不完全羧化為γ-羧基谷氨酸，從而失去正常的凝血功能[3，5]。正常的凝血酶在肝細(xì)胞微粒體內(nèi)依賴(lài)維生素K的γ-谷氨酰羧化酶、維生素K環(huán)氧化酶和維生素K還原酶作用，結(jié)構(gòu)中γ-羧基谷氨酸的10個(gè)谷氨酸殘基羧化成γ-羧基谷氨酸，轉(zhuǎn)變成有活性的凝血酶原，任何一個(gè)位點(diǎn)羧化不全，就會(huì)失去凝血酶原功能，形成DCP[6-7]。肝癌細(xì)胞可能相關(guān)酶的羧化能力發(fā)生變化，羧化酶活性下降，對(duì)維生素K攝取及利用障礙，導(dǎo)致DCP形成。袁聯(lián)文等[8]研究顯示，癌組織產(chǎn)生過(guò)量DCP是肝癌血清DCP的主要來(lái)源，是一種預(yù)后標(biāo)志物，但肝癌血清DCP濃度是癌組織和非癌組織產(chǎn)生DCP濃度的整體表現(xiàn)。有研究顯示，DCP可能具有刺激肝癌細(xì)胞生長(zhǎng)、浸潤(rùn)和促進(jìn)轉(zhuǎn)移等作用[7]。鐘志敏等[9]研究顯示，DCP對(duì)原發(fā)性肝癌具有較高的診斷價(jià)值，且能鑒別診斷原發(fā)性肝癌、繼發(fā)性肝癌及其他良性肝臟疾病，DCP和AFP聯(lián)合診斷可以提高原發(fā)性肝癌的診斷效能。

本研究結(jié)果顯示，DCP診斷原發(fā)性肝癌的靈敏度為80.95%，特異度為85.96%，與金標(biāo)準(zhǔn)的一致性較好（Kappa=0.762）；AFP診斷原發(fā)性肝癌的靈敏度為88.57%，特異度為91.23%，與金標(biāo)準(zhǔn)的一致性較好（Kappa=0.824）；DCP和AFP聯(lián)合診斷原發(fā)性肝癌的靈敏度為91.43%，特異度為96.49%，與金標(biāo)準(zhǔn)的一致性較好（Kappa=0.883）。DCP和AFP聯(lián)合檢測(cè)能夠顯著提高原發(fā)性肝癌診斷的靈敏度、特異度及與病理金標(biāo)準(zhǔn)的一致性。

綜上所述，DCP作為肝癌細(xì)胞內(nèi)羧化異常而產(chǎn)生的一種異常凝血酶原，其在原發(fā)性肝癌患者的血清水平有所升高，可以作為診斷原發(fā)性肝癌的相關(guān)指標(biāo)之一；且DCP與AFP聯(lián)合檢測(cè)能夠顯著提高原發(fā)性肝癌診斷的靈敏度、特異度以及與病理檢測(cè)結(jié)果的一致性，對(duì)診斷AFP陰性的肝癌患者起較好的補(bǔ)充作用。

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（收稿日期：2014-05-05 本文編輯：李亞聰）