王建舫　崔德鳳　穆祥

摘要：本試驗(yàn)旨在建立一種高效液相色譜-紫外檢測法（HPLC-UV）測定貫葉連翹提取物中金絲桃素含量的方法。采用YMC-Pack ODS-A色譜柱（5 μm，150 mm×4.6 mm），以乙腈-0.02M磷酸二氫鈉（85∶15）為流動相，流速1.0 mL/min，檢測波長588 nm，柱溫25 ℃。結(jié)果表明，金絲桃素在6～36 μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（r=0.999 6），平均加樣回收率為98.86%（n=6），峰面積的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為3.15%。此方法專屬性強(qiáng)、重復(fù)性好，可用于貫葉連翹提取物中金絲桃素的含量測定。

關(guān)鍵詞：貫葉連翹；金絲桃素；高效液相色譜；含量測定

中圖分類號：S853.7文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號：1007-273X（2014）05-0013-02

貫葉連翹（Hypericum performatum L.）為藤黃科金絲桃屬多年生草本植物，其味苦、辛，性平，可清心明目、調(diào)經(jīng)活血、止血生肌、解毒消炎[1]。其主要活性成分金絲桃素具有光敏活性和光動力作用，有較好的抗病毒、抗腫瘤功效，同時也是貫葉連翹抗抑郁的主要活性成分之一[2]。本試驗(yàn)采用高效液相色譜法對貫葉連翹提取物中金絲桃素進(jìn)行了含量測定，建立了一種專一性強(qiáng)、重復(fù)性好的測定方法，為貫葉連翹提取物的質(zhì)量控制提供依據(jù)。

1儀器與試藥

1.1儀器

Waters Alliance e2695高效液相色譜儀；美國Millipore水純化系統(tǒng)；針筒式微孔濾膜過濾器（上海興亞凈化材料廠產(chǎn)品，孔徑0.22 μm）。

1.2藥品與試劑

金絲桃素（批號MUST-13121505，購自成都曼思特生物科技有限公司）；貫葉連翹提取物，購自北京經(jīng)日今典科技有限公司；乙腈（色譜純，天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所）。

2方法與結(jié)果

2.1色譜條件

YMC-Pack ODS-A色譜柱（5 μm，150 mm×4.6 mm）；流動相：乙腈-0.02 mol/L磷酸二氫鈉（85∶15）；流速1.0 mL/min；檢測波長588 nm；柱溫25 ℃。

2.2溶液的制備

2.2.1對照品溶液的制備精密稱取金絲桃素對照品1.2 mg置10 mL棕色容量瓶中，用甲醇溶解并定容至100 mL，制成濃度為0.12 mg/mL的對照品貯存液。精密吸取金絲桃素標(biāo)準(zhǔn)品貯備液0.25、0.5、0.75、1.00、1.25、1.5 mL，分別放置于5 mL棕色容量瓶中，用甲醇定容至刻度，分別得到6、12、18、24、30、36 μg/mL的對照品溶液。

2.2.2供試品溶液的制備精密稱取貫葉連翹提取物62.2 mg，置5 mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容。用0.20 μm濾膜過濾，取續(xù)濾液，即得提取物供試品溶液。

2.3專屬性試驗(yàn)

精密吸取濃度為24 μg/mL的金絲桃素對照品溶液和供試品溶液各20 μL，注入液相色譜儀中，由色譜圖知，在金絲桃素對照品色譜相應(yīng)的位置上，供試品溶液具有相同保留時間的色譜峰（圖1）。

2.4線性關(guān)系考察

分別精密吸取濃度為6、12、18、24、30、36 μg/mL的對照品溶液20 μL，自動進(jìn)樣注入高效液相色譜儀，記錄峰面積，以金絲桃素含量（μg/mL）為橫坐標(biāo)，峰面積值為縱坐標(biāo)，計算回歸方程為y=74 196x-11 176，r=0.999 6，結(jié)果表明，在6～36 μg/mL范圍內(nèi)，峰面積與金絲桃素濃度呈良好的線性關(guān)系（圖2）。

2.5精密度試驗(yàn)

取濃度為24 μg/mL的對照品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，每次進(jìn)樣20 μL，測定峰面積，結(jié)果峰面積的相對標(biāo)

摘要：本試驗(yàn)旨在建立一種高效液相色譜-紫外檢測法（HPLC-UV）測定貫葉連翹提取物中金絲桃素含量的方法。采用YMC-Pack ODS-A色譜柱（5 μm，150 mm×4.6 mm），以乙腈-0.02M磷酸二氫鈉（85∶15）為流動相，流速1.0 mL/min，檢測波長588 nm，柱溫25 ℃。結(jié)果表明，金絲桃素在6～36 μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（r=0.999 6），平均加樣回收率為98.86%（n=6），峰面積的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為3.15%。此方法專屬性強(qiáng)、重復(fù)性好，可用于貫葉連翹提取物中金絲桃素的含量測定。

關(guān)鍵詞：貫葉連翹；金絲桃素；高效液相色譜；含量測定

中圖分類號：S853.7文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號：1007-273X（2014）05-0013-02

貫葉連翹（Hypericum performatum L.）為藤黃科金絲桃屬多年生草本植物，其味苦、辛，性平，可清心明目、調(diào)經(jīng)活血、止血生肌、解毒消炎[1]。其主要活性成分金絲桃素具有光敏活性和光動力作用，有較好的抗病毒、抗腫瘤功效，同時也是貫葉連翹抗抑郁的主要活性成分之一[2]。本試驗(yàn)采用高效液相色譜法對貫葉連翹提取物中金絲桃素進(jìn)行了含量測定，建立了一種專一性強(qiáng)、重復(fù)性好的測定方法，為貫葉連翹提取物的質(zhì)量控制提供依據(jù)。

1儀器與試藥

1.1儀器

Waters Alliance e2695高效液相色譜儀；美國Millipore水純化系統(tǒng)；針筒式微孔濾膜過濾器（上海興亞凈化材料廠產(chǎn)品，孔徑0.22 μm）。

1.2藥品與試劑

金絲桃素（批號MUST-13121505，購自成都曼思特生物科技有限公司）；貫葉連翹提取物，購自北京經(jīng)日今典科技有限公司；乙腈（色譜純，天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所）。

2方法與結(jié)果

2.1色譜條件

YMC-Pack ODS-A色譜柱（5 μm，150 mm×4.6 mm）；流動相：乙腈-0.02 mol/L磷酸二氫鈉（85∶15）；流速1.0 mL/min；檢測波長588 nm；柱溫25 ℃。

2.2溶液的制備

2.2.1對照品溶液的制備精密稱取金絲桃素對照品1.2 mg置10 mL棕色容量瓶中，用甲醇溶解并定容至100 mL，制成濃度為0.12 mg/mL的對照品貯存液。精密吸取金絲桃素標(biāo)準(zhǔn)品貯備液0.25、0.5、0.75、1.00、1.25、1.5 mL，分別放置于5 mL棕色容量瓶中，用甲醇定容至刻度，分別得到6、12、18、24、30、36 μg/mL的對照品溶液。

2.2.2供試品溶液的制備精密稱取貫葉連翹提取物62.2 mg，置5 mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容。用0.20 μm濾膜過濾，取續(xù)濾液，即得提取物供試品溶液。

2.3專屬性試驗(yàn)

精密吸取濃度為24 μg/mL的金絲桃素對照品溶液和供試品溶液各20 μL，注入液相色譜儀中，由色譜圖知，在金絲桃素對照品色譜相應(yīng)的位置上，供試品溶液具有相同保留時間的色譜峰（圖1）。

2.4線性關(guān)系考察

分別精密吸取濃度為6、12、18、24、30、36 μg/mL的對照品溶液20 μL，自動進(jìn)樣注入高效液相色譜儀，記錄峰面積，以金絲桃素含量（μg/mL）為橫坐標(biāo)，峰面積值為縱坐標(biāo)，計算回歸方程為y=74 196x-11 176，r=0.999 6，結(jié)果表明，在6～36 μg/mL范圍內(nèi)，峰面積與金絲桃素濃度呈良好的線性關(guān)系（圖2）。

2.5精密度試驗(yàn)

取濃度為24 μg/mL的對照品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，每次進(jìn)樣20 μL，測定峰面積，結(jié)果峰面積的相對標(biāo)

摘要：本試驗(yàn)旨在建立一種高效液相色譜-紫外檢測法（HPLC-UV）測定貫葉連翹提取物中金絲桃素含量的方法。采用YMC-Pack ODS-A色譜柱（5 μm，150 mm×4.6 mm），以乙腈-0.02M磷酸二氫鈉（85∶15）為流動相，流速1.0 mL/min，檢測波長588 nm，柱溫25 ℃。結(jié)果表明，金絲桃素在6～36 μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（r=0.999 6），平均加樣回收率為98.86%（n=6），峰面積的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為3.15%。此方法專屬性強(qiáng)、重復(fù)性好，可用于貫葉連翹提取物中金絲桃素的含量測定。

關(guān)鍵詞：貫葉連翹；金絲桃素；高效液相色譜；含量測定

中圖分類號：S853.7文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號：1007-273X（2014）05-0013-02

貫葉連翹（Hypericum performatum L.）為藤黃科金絲桃屬多年生草本植物，其味苦、辛，性平，可清心明目、調(diào)經(jīng)活血、止血生肌、解毒消炎[1]。其主要活性成分金絲桃素具有光敏活性和光動力作用，有較好的抗病毒、抗腫瘤功效，同時也是貫葉連翹抗抑郁的主要活性成分之一[2]。本試驗(yàn)采用高效液相色譜法對貫葉連翹提取物中金絲桃素進(jìn)行了含量測定，建立了一種專一性強(qiáng)、重復(fù)性好的測定方法，為貫葉連翹提取物的質(zhì)量控制提供依據(jù)。

1儀器與試藥

1.1儀器

Waters Alliance e2695高效液相色譜儀；美國Millipore水純化系統(tǒng)；針筒式微孔濾膜過濾器（上海興亞凈化材料廠產(chǎn)品，孔徑0.22 μm）。

1.2藥品與試劑

金絲桃素（批號MUST-13121505，購自成都曼思特生物科技有限公司）；貫葉連翹提取物，購自北京經(jīng)日今典科技有限公司；乙腈（色譜純，天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所）。

2方法與結(jié)果

2.1色譜條件

YMC-Pack ODS-A色譜柱（5 μm，150 mm×4.6 mm）；流動相：乙腈-0.02 mol/L磷酸二氫鈉（85∶15）；流速1.0 mL/min；檢測波長588 nm；柱溫25 ℃。

2.2溶液的制備

2.2.1對照品溶液的制備精密稱取金絲桃素對照品1.2 mg置10 mL棕色容量瓶中，用甲醇溶解并定容至100 mL，制成濃度為0.12 mg/mL的對照品貯存液。精密吸取金絲桃素標(biāo)準(zhǔn)品貯備液0.25、0.5、0.75、1.00、1.25、1.5 mL，分別放置于5 mL棕色容量瓶中，用甲醇定容至刻度，分別得到6、12、18、24、30、36 μg/mL的對照品溶液。

2.2.2供試品溶液的制備精密稱取貫葉連翹提取物62.2 mg，置5 mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容。用0.20 μm濾膜過濾，取續(xù)濾液，即得提取物供試品溶液。

2.3專屬性試驗(yàn)

精密吸取濃度為24 μg/mL的金絲桃素對照品溶液和供試品溶液各20 μL，注入液相色譜儀中，由色譜圖知，在金絲桃素對照品色譜相應(yīng)的位置上，供試品溶液具有相同保留時間的色譜峰（圖1）。

2.4線性關(guān)系考察

分別精密吸取濃度為6、12、18、24、30、36 μg/mL的對照品溶液20 μL，自動進(jìn)樣注入高效液相色譜儀，記錄峰面積，以金絲桃素含量（μg/mL）為橫坐標(biāo)，峰面積值為縱坐標(biāo)，計算回歸方程為y=74 196x-11 176，r=0.999 6，結(jié)果表明，在6～36 μg/mL范圍內(nèi)，峰面積與金絲桃素濃度呈良好的線性關(guān)系（圖2）。

2.5精密度試驗(yàn)

取濃度為24 μg/mL的對照品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，每次進(jìn)樣20 μL，測定峰面積，結(jié)果峰面積的相對標(biāo)