徐雅琴，曹淑梅，于 倩*，姜日花

(1.吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院，吉林 長(zhǎng)春130033;2.解放軍總裝備部干休所，河北 保定071000)

帶狀皰疹(herpes zoster,HZ)是由水痘-帶狀皰疹病毒(varicella zostervirus,VZV)引起的病毒性皮膚病，既往研究證實(shí)淋巴瘤、肺癌、前列腺癌等惡性腫瘤患者更易罹患帶狀皰疹[1]。為此我們利用流式細(xì)胞儀檢測(cè)了51例帶狀皰疹患者外周血淋巴細(xì)胞亞群，結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2012年7月至2013年5月就診于我院的帶狀皰疹患者，診斷依據(jù)為臨床癥狀、體征及輔助檢查，所有患者近6個(gè)月內(nèi)未用過(guò)皮質(zhì)類固醇激素、免疫抑制劑等?；颊?1例，男23例，女28例，年齡22～75歲，平均年齡52.3。對(duì)照組為健康志愿者，兩組人群在性別、年齡上均具有可比性。

1.2 主要儀器及試劑

1.2.1 試劑與儀器 淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)試劑盒購(gòu)自美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特(Beckman Coulter)公司，儀器為美國(guó)BD公司生產(chǎn)的Cytomics FC500。離心機(jī)：類型：LD4-2A(Ⅰ)，北京京立公司產(chǎn)品。

1.2.2 研究方法 患者組及對(duì)照組均采集2ml EDTA-K2抗凝外周血進(jìn)行淋巴細(xì)胞亞群測(cè)定。每個(gè)患者抽取抗凝血300 μl平均置于3個(gè)試管中。試管1中加入20 μl四色標(biāo)記的CD45/CD4/CD8/CD3抗體，試管2加入CD45/CD56/CD19/CD3抗體，試管3加入等量同型對(duì)照抗體(美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特Beckman Coulter公司)。于每個(gè)試管內(nèi)加入500 μl溶血素，充分混勻后置于室溫下避光保存15 min；將3 ml PBS加入各個(gè)試管內(nèi)，充分混勻后放入離心機(jī)離心(轉(zhuǎn)速：1 500 rpm)5 min后去除上清；最后將500 μl PBS加入去除上清后的各試管中，充分混勻。所制備液體上機(jī)進(jìn)行流式細(xì)胞儀檢測(cè)。

2 結(jié)果

2.1 外周血T淋巴細(xì)胞亞群的比較

患者組與對(duì)照組比較,外周血CD3+細(xì)胞、CD3+CD4+細(xì)胞百分比降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。CD3+CD8+細(xì)胞百分比及CD3+CD4+/CD3+CD8+雖較正常組降低，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異 (P>0.05)。詳見表1。

2.2 外周血B淋巴細(xì)胞及NK細(xì)胞比較

患者組與對(duì)照組比較，外周血CD3-CD19+B淋巴細(xì)胞的百分比升高，CD16+56+NK細(xì)胞的百分比降低，但差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。詳見表2。

表1 外周血T淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)結(jié)果

表2 外周血B淋巴細(xì)胞及NK細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果

3 討論

在機(jī)體的調(diào)節(jié)性免疫反應(yīng)中發(fā)揮主要作用的T淋巴細(xì)胞及B淋巴細(xì)胞分別主要介導(dǎo)細(xì)胞免疫和體液免疫。目前的研究從多方面證實(shí)了機(jī)體在對(duì)抗VZV感染過(guò)程中是以細(xì)胞免疫反應(yīng)為主。既往報(bào)道感染過(guò)帶狀皰疹病毒的成人與正患有水痘的兒童密切接觸后，其外周血VZV特異性CD3+CD4+T細(xì)胞及其分泌的細(xì)胞因子干擾素-γ(IFN-γ)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)和 白細(xì)胞介素-2(IL-2)與未暴露組和暴露前相比明顯升高[2]。健康人中針對(duì)水痘-帶狀病毒細(xì)胞漿和細(xì)胞膜的糖蛋白GB、GE、和位于細(xì)胞核的IE62上述VZV蛋白質(zhì)反應(yīng)是CD3+CD4+T細(xì)胞介導(dǎo)，而CD3+CD8+T細(xì)胞對(duì)這三個(gè)VZV蛋白質(zhì)的反應(yīng)則維持在較低水平[3],皮損的組織病理顯示浸潤(rùn)細(xì)胞中CD3+CD4+T細(xì)胞/CD3+CD8+T細(xì)胞比值范圍從1.0到2.0不等[4]。

固有免疫系統(tǒng)是細(xì)胞免疫反應(yīng)對(duì)抗致病性感染的第一道防線，NK細(xì)胞是固有免疫細(xì)胞中防御傳染病尤其是病毒感染的關(guān)鍵，它能直接裂解受病毒感染的靶細(xì)胞[5]，其還能依賴其分泌的細(xì)胞因子干擾素IFN-γ介導(dǎo)CD3+CD8+T細(xì)胞的增殖[6]。雖然目前尚不清楚NK細(xì)胞消除病毒感染細(xì)胞的確切機(jī)制，但已有病例報(bào)告顯示在選擇性NK細(xì)胞缺失的患者中出現(xiàn)了致死性的皰疹病毒感染[7]。

本實(shí)驗(yàn)患者組外周血CD3+T細(xì)胞、CD3+CD4+T細(xì)胞百分比均較正常組降低，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)，這與以上研究結(jié)論基本一致，提示CD3+CD4+T細(xì)胞在對(duì)抗水痘-帶狀皰疹病毒的過(guò)程中發(fā)揮著主要作用，機(jī)體CD3+CD4+T細(xì)胞的減少是體內(nèi)病毒被激活的關(guān)鍵。此外，本研究CD3+CD8+T細(xì)胞百分比、CD16+56+(NK)細(xì)胞百分比、CD3+CD4+/CD3+CD8+細(xì)胞比值較正常組降低，CD3-CD19+細(xì)胞即B細(xì)胞百分比與正常組比稍高，但均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)，可能由于樣本量較少，存在偏倚，有待今后繼續(xù)研究。

本研究結(jié)果表明：帶狀皰疹患者存在細(xì)胞免疫功能低下，調(diào)節(jié)患者的細(xì)胞免疫狀態(tài)，可能有助于本病的治療，對(duì)惡性腫瘤的預(yù)防也會(huì)起到積極作用。

參考文獻(xiàn)：

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[5]Ihara T,Kato T,Torigoe S,et al.A-ntibody response determined with antibod-y-dependent cell-mediated cytotoxicity (ADCC),neutralizing antibody,and vari-cella skin test in children with natural varicella and after varicella immunizati-on[J].Acta paediatrica Japonica,1991,33(1):43.

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