王 月 郭利平

（1.內(nèi)蒙古自治區(qū)人民醫(yī)院，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010017；2.天津中醫(yī)藥大學(xué)，天津 300193）

芪參益氣滴丸對(duì)高脂血癥家兔Fbg、HDL、LDL的影響*

王 月1郭利平2△

（1.內(nèi)蒙古自治區(qū)人民醫(yī)院，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010017；2.天津中醫(yī)藥大學(xué)，天津 300193）

目的 觀察芪參益氣滴丸對(duì)高脂血癥家兔血漿纖維蛋白質(zhì)（Fbg）、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）的影響。方法 采用高脂飼料喂養(yǎng)法建立高脂血癥家兔模型50只，10只做空白對(duì)照，將高脂血家兔隨機(jī)平均分為模型組、芪參益氣滴丸高、中、低劑量組（2、1、0.5 g/kg）和阿司匹林對(duì)照組，給藥14 d。分別于實(shí)驗(yàn)第1周末、第7周末及第9周末采用酶比色法等檢測(cè)各組家兔血漿Fbg、LDL、HDL的含量變化。結(jié)果 模型組Fbg、LDL、HDL值比空白組顯著升高（P＜0.05），芪參益氣滴丸各組、阿司匹林組與空白組比較無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05），但與模型組比較差異亦無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論 芪參益氣滴丸對(duì)高脂血家兔Fbg、LDL、HDL并無明顯影響。

芪參益氣滴丸 高脂血癥 血脂 血小板活化 實(shí)驗(yàn)研究

研究顯示，在降脂的同時(shí)降低血小板活性在血栓性疾病的臨床治療和預(yù)防心臟事件的發(fā)生方面有著十分重要的意義［1］。血脂異常與血小板功能之間是相互聯(lián)系的，低密度脂蛋白（LDL）與血小板聚集功能呈正相關(guān)，高密度脂蛋白（HDL）與血小板聚集功能呈負(fù)相關(guān)，單純膽固醇和三酰甘油增高與血小板聚集功能無確切相關(guān)聯(lián)系［2］。在高脂血的環(huán)境下，血小板對(duì)一些生理刺激劑（如ADP、花生四烯酸、膠原和凝血酶等）的反應(yīng)性會(huì)增高［3］，更易被活化。本實(shí)驗(yàn)以高脂血癥家兔為實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，建立血小板高敏感狀態(tài)，采用酶比色法檢測(cè)各組家兔藥物干預(yù)后血漿纖維蛋白原（Fbg）、LDL及HDL的濃度變化，來觀察芪參益氣滴丸是否具有調(diào)脂及抗血小板活化的作用，以期為其防治心腦血管疾病提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 藥物 芪參益氣滴丸浸膏 （天士力藥業(yè)集團(tuán)提供），實(shí)驗(yàn)前用0.5%羧甲基纖維素鈉（CMC-Na）配置成質(zhì)量濃度為 0.1、0.2、0.4 g/mL，供家兔灌胃給藥用［4］。阿司匹林腸溶片，每片含阿司匹林100 mg，拜耳醫(yī)藥保健有限公司，實(shí)驗(yàn)前以0.5%CMC-Na配成質(zhì)量濃度為3.5 mg/mL混懸液，供家兔灌胃用。

1.2 實(shí)驗(yàn)試劑 膽固醇由天津市英博生化試劑有限公司提供?；ㄉ?，市售。膽固醇（TC）試劑盒，中生北控生物科技股份有限公司提供。Fbg試劑盒，上海北海

生物技術(shù)工程有限公司提供。1995版200型半自動(dòng)生化分析儀，荷蘭威圖公司。LDZ5-2低速自動(dòng)平衡離心機(jī)，北京京立離心機(jī)公司。XSN-RII型體外血栓形成儀，無錫電力儀器廠。HPG-9145電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱，北京東聯(lián)哈爾儀器有限公司。JA1003型電子天平，上海恒平科學(xué)儀器有限公司。

1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 健康大耳白家兔70只，雄性，體質(zhì)量2.0～2.5 kg，飼養(yǎng)溫度19～25℃，相對(duì)濕度為40%～60%。家兔單籠飼養(yǎng)，每籠 1只，每日 8∶00～10∶00給藥，給藥后定量投放飼料，自由飲水。

1.4 模型制備 70只大耳白家兔普通飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，按血漿TC值將家兔采用均衡隨機(jī)分組法分為2組：空白組10只、高脂飼料造模組60只?？瞻捉M家兔繼續(xù)飼以普通飼料，高脂飼料造模組則給予高脂飼料（1%膽固醇、10%花生油、89%基礎(chǔ)飼料）喂養(yǎng)，每日50 g。6周后，家兔耳緣靜脈取血，采用半自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)空腹血漿TC、Fbg含量，選取血漿TC顯著升高，且與空白組有顯著差異的家兔為造模成功，納入實(shí)驗(yàn)。

1.5 分組與給藥 保留空白組家兔10只，選擇造模成功的模型組家兔50只，根據(jù)血漿TC值采取均衡隨機(jī)分組法將50只家兔分為5組：模型組、芪參益氣滴丸高、中、低劑量組和阿司匹林組，每組各10只。空白組及模型組灌服0.5%CMC-Na；芪參益氣滴丸高、中、低劑量組分別灌服芪參益氣滴丸2.0、1.0、0.5 g/kg；阿司匹林組灌胃0.5%CMC-Na阿司匹林混懸液，每日用藥量為3.5mg/kg。芪參益氣滴丸各組灌胃體積為5 mL/kg體質(zhì)量，其余各組灌胃體積為1mL/kg體質(zhì)量，各組每日灌胃1次，連續(xù)14 d［4］。用藥期間除空白組外，其余各組均繼續(xù)給予高脂飼料6次/周，每只每次予50 g，以維持模型。

1.6 標(biāo)本采集與檢測(cè) 分別于第1周末、第7周末及第9周末，末次給藥1 h后，耳緣靜脈取血1 mL，肝素抗凝后用于Fbg檢測(cè)。于第9周末，即藥物干預(yù)2周后，末次給藥1 h后，耳緣靜脈取血1 mL，肝素抗凝以檢測(cè)血漿LDL、HDL濃度。1 mL全血肝素抗凝，3000 r/min離心5 min，分離血漿，應(yīng)用半自動(dòng)生化分析儀（試劑盒）采用酶比色法檢測(cè)血漿Fbg含量。采用清除法檢測(cè)血漿LDL及HDL的含量。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以（±s）表示。組間比較采用單因素方差分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 各組家兔Fbg水平比較 見表1。第1周末各組間Fbg值無明顯差異；第7周末芪參益氣滴丸中、低劑量組及阿司匹林組較空白組Fbg值升高（P＜0.05），其余各組較空白組Fbg值雖有所升高，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，第9周（給藥2周后）末模型組Fbg值比空白組顯著升高（P＜0.05），其余各組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表1 各組家兔Fbg水平比較（g/L，±s）

表1 各組家兔Fbg水平比較（g/L，±s）

與空白組比較，*P＜0.05。下同。

組 別 n 第9周空白組 9 2.14±0.05模型組 9 2.63±0.58*芪參益氣滴丸高劑量組 8 2.99±0.96第1周 第7周1.16±0.31 2.11±0.03 1.49±0.06 2.28±0.33 1.44±0.18 2.40±0.44芪參益氣滴丸中劑量組 8 3.19±0.62 1.52±0.14 2.49±0.48*芪參益氣滴丸低劑量組 9 1.49±0.08 2.37±0.26*3.13±0.73阿司匹林組 8 1.47±0.07 2.43±0.35*3.31±0.47

2.2 各組家兔血漿LDL、HDL含量比較 見表2。模型組LDL及HDL值較空白組明顯升高（P＜0.05），而芪參益氣滴丸各組、阿司匹林組與模型組比較LDL、HDL值無明顯差異。

表2 各組家兔血漿 LDL、HDL含量比較（mmol/L，±s）

表2 各組家兔血漿 LDL、HDL含量比較（mmol/L，±s）

組 別 n空白組 9模型組 9芪參益氣滴丸高劑量組 8 LDL HDL 0.34±0.22 0.47±0.11 6.02±4.69* 1.55±0.48*7.66±5.18 1.58±0.68芪參益氣滴丸中劑量組 8 11.44±6.36 2.09±0.47芪參益氣滴丸低劑量組 9 6.94±4.83 1.84±0.47阿司匹林組 8 8.96±3.04 1.97±0.28

3 討 論

據(jù)報(bào)道，高脂血癥能夠促使血小板活化［5］。Sener等研究表明［6］，高脂血癥患者血小板表面的CD62p表達(dá)的水平與 CHO、LDL、HDL-C 水平相關(guān)。有研究發(fā)現(xiàn)［7］，高膽固醇血癥家兔血小板內(nèi)的唾液酸含量明顯減少，表明血小板表面負(fù)荷減少，易于血小板黏附和聚集。在高血脂等多種因素作用下，血小板可發(fā)生黏附、聚集、活化和釋放多種活性物質(zhì)，促使內(nèi)皮細(xì)胞損傷和內(nèi)膜增厚，平滑肌細(xì)胞和巨噬細(xì)胞轉(zhuǎn)化成泡沫細(xì)胞，同時(shí)，高脂血癥患者血液循環(huán)中血小板的活化可增加脂質(zhì)過氧化反應(yīng)［6］，從而加速動(dòng)脈硬化的形成和發(fā)展。芪參益氣滴丸由黃芪、丹參、三七、降香等藥物組成，研究表明其具有降脂、增大斑塊密度、保護(hù)血管內(nèi)皮、抗血小板的作用［8-12］。已有研究證實(shí)，阿司匹林能夠降低家兔的血脂和血小板聚集功能［13］。因此，本實(shí)驗(yàn)選擇高脂血家兔為試驗(yàn)對(duì)象，芪參益氣滴丸為試驗(yàn)藥物，阿司匹林為陽性對(duì)照。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，服藥2周后芪參益氣滴丸各劑量組對(duì)高脂血家兔血漿Fbg、LDL及HDL的含量無明顯改善作用，有實(shí)驗(yàn)證明芪參益氣滴丸對(duì)正常和高脂血家兔的血小板功能均具有抑制作用［11-12］，本實(shí)驗(yàn)說明芪參益氣滴丸并不是通過降血脂來發(fā)揮抗血小板活化作用的，可能直接作用于血小板本身。

阿司匹林是抗血小板藥，本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示阿司匹林組亦無明顯改善高脂血家兔血漿Fbg、LDL、HDL值的作用，可能與阿司匹林給藥劑量較小、時(shí)間較短有關(guān)。有研究發(fā)現(xiàn)，阿司匹林的調(diào)脂作用存在著明顯的劑量依賴性，而其抑制血小板聚集作用則在小劑量和中劑量時(shí)較好［14］。據(jù)報(bào)道，阿司匹林小劑量對(duì)ADP或花生四烯酸誘導(dǎo)的血小板聚集均有較好的抑制作用，當(dāng)劑量增加至20 mg/L時(shí)，作用反而減弱［14］。因本實(shí)驗(yàn)意在探討芪參益氣滴丸對(duì)血小板活化的影響，故阿司匹林的劑量不宜過大，這也許是本實(shí)驗(yàn)未能證實(shí)阿司匹林有降脂作用的原因。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果亦顯示，給藥2周后，模型組家兔血漿Fbg、LDL較空白升高，但芪參益氣滴丸和阿司匹林組與空白組相近，說明兩藥有一定抑制Fbg、LDL值升高的作用；給藥前芪參益氣滴丸中、低劑量組及阿司匹林組的Fbg值較空白組高，給藥2周后這種差異消失了，也說明芪參益氣滴丸和阿司匹林都具有一定降低高脂血家兔Fbg的作用。有研究顯示芪參益氣滴丸具有有調(diào)脂作用［9］。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果或許與給藥時(shí)間短、劑量不足及動(dòng)物模型有關(guān)。

［1］Ross R.Medical progress： the pathogenesis of atherosderosisan pdate［J］.N Engl J Med，1986，314（3）：488.

［2］Pei W，Baron H，Muller M，et al.Suport for linkage of familial combined hyperlipidemia to chromosome1q21-q23 in Chinese and German families［J］.Clin Genet，2000，57（1）：29-34.

［3］徐新娟，洪秀芳，鄒建萍.血脂與血小板聚集功能相關(guān)因素的分析［J］.中國血液流變學(xué)雜志，1997，1（1）：49-51.

［4］汪鐘，龍敏慧.血漿脂蛋白對(duì)血小板功能的影響［J］.基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床，1991，11（2）：28-31.

［5］周桂桐.中醫(yī)藥對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊穩(wěn)定性作用的理論及實(shí)驗(yàn)研究［D］.天津：天津中醫(yī)藥大學(xué)，2006.

［6］王志軍，柯元南.高脂血癥大鼠血小板活化功能分析［J］.中國比較醫(yī)學(xué)雜志，2008，18（3）：10-13.

［7］Sener A ，Ozsavci D，Oba R，et al.Do platelet apoptosis，activation，aggregation，lipid peroxidation and platelet-leukocyte aggregate formation occursimultaneously in hyperlipidemia［J］.Clin Biochem，2005，38（12）：1081-1087.

［8］Lupu C，Calb M.Changes in the plateted surface charge in rabbits with experimental by percholesterollemia［J］.Atherosclerosis，1988，72（3）：77.

［9］李欲來，張軍平，趙廣榮.芪參益氣滴丸對(duì)氣虛血瘀型冠心病患者血脂影響觀察研究［J］.中華實(shí)用中西醫(yī)雜志，2005，18（10）：1421-1423.

［10］燕芳芳，劉艷，劉運(yùn)芳，等.芪參益氣滴丸對(duì)實(shí)驗(yàn)性動(dòng)脈粥樣硬化斑塊組織學(xué)的影響［J］.南京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2007，23（5）：295-296.

［11］王彥娜.芪參益氣滴丸對(duì)高脂血癥大鼠血管內(nèi)皮功能的影響［D］.天津：天津醫(yī)科大學(xué)，2013.

［12］W Y，W J，G LP，et al.Antiplatelet effects of qishen yiqi dropping pill in platelets aggregation in hyperlipidemic rabbits［J］.Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine，2012，14（1）：138.

［13］王婕，郭利平，王怡.芪參益氣滴丸對(duì)家兔血小板黏附和聚集功能的影響［J］.吉林中醫(yī)藥，2009，29（7）：624-625.

［14］華軼男，薛潔，朱路佳，等.阿司匹林對(duì)高脂性動(dòng)脈粥樣硬化兔血脂及血小板聚集的影響［J］.蘇州大學(xué)學(xué)報(bào)：醫(yī)學(xué)版，2007，27（6）：855-858.

［15］齊若梅，楊京，歐陽濤，等.L-精氨酸與小劑量阿司匹林共同使用增強(qiáng)抑制血小板聚集功效以及對(duì)胃粘膜保護(hù)作用的研究［J］.中國藥理學(xué)通報(bào)，2005，21（8）：981-985.

Effect of Qishenyiqi Dropping Pills on Fbg，HDL and LDL in the Rabbit with Hyperlipemia

WANG Yue1，GUO Liping2.1Inner Mongolia People′s Hospital，Inner Mongolia，Hohhot010017，China；2Tianjin University of Traditional Chinese Medicine，Tianjin300193，China

Objective:To observe the effect ofQishenyiqi Dropping Pillson Fbg，HDL and LDL in plasma of experimental hyperlipidemia rabbits.Methods:50 rabbits were feeded with the high fat diet to establish the hyperlipidemia model.10 rabbits were set as the normal control，the hyperlipidemia animals were randomly divided into 5 groups，which was treatment groups （2.0 g/kg，1.0 g/kg and 0.5 g/kg ofQishenyiqi Dropping Pills），Aspirin control group and model group，After 14 days administration，there were some indicators being detected including Fbg，HDL and LDL in plasma by enzyme colorimetry.Results:The levels of Fbg，HDL and LDL in model group were significantly increased （P＜0.05）compared with the normal group.Qishenyiqi Dropping Pillsgroup and Aspirin group has no statistical significances with the normal groupand the model group.Conclusion：Qishenyiqi Dropping Pillshas no obvious influence on Fbg，HDL and LDL in the rabbit with hyperlipemia.

Qishenyiqi Dropping Pill；Hyperlipidemia；Blood fat；Platelet activation；Experimental research

R285.5

A

1004-745X（2014）07-1239-03

10.3969/j.issn.1004-745X.2014.07.012

高等學(xué)校全國優(yōu)秀博士學(xué)位論文作者專項(xiàng)資金項(xiàng)目（200779）

△通信作者

2014-03-20）