張慧鋒,郭淑英,申 蕾,付 非 (吉林醫(yī)藥學(xué)院藥學(xué)院,吉林 吉林 132013)
阿里紅(FomesofficinalisAmes),又名苦白蹄,屬于擔(dān)子菌綱(Basidiomycetes)、多孔菌目(Polyporales)、多孔菌科(Polyporaceace)、層孔菌屬(Fomes)[1]。新疆《維吾爾醫(yī)常用藥材》一書中稱阿里紅為“落葉松茸”,用維吾爾語(yǔ)音譯為“哈里坤”。阿里紅是我國(guó)新疆地區(qū)維吾爾民族醫(yī)生常用的治療藥物之一, 民間驗(yàn)方也用以治病。從阿里紅中分離得到的化合物主要有三萜酸類、倍半萜類、多糖及直鏈烷烴等,其中三萜酸類的化合物含量最高。
目前,傳統(tǒng)的三萜酸類化合物的提取方法主要有水提法、醇回流提取、堿性水或稀醇提取與其他有機(jī)溶劑萃取的方法等等,以上方法[2]被廣泛應(yīng)用于三萜酸類化合物的提取,費(fèi)時(shí)、費(fèi)材料,不利于節(jié)約資源、經(jīng)濟(jì)生產(chǎn)。因此本研究不采用回流提取法,而是采用目前較常用、并可以用于工業(yè)生產(chǎn)的超聲提取法,研究阿里紅三萜酸類化合物的提取工藝。
響應(yīng)面設(shè)計(jì)法(Response Surface Methodology,RSM)是一種統(tǒng)計(jì)設(shè)計(jì)試驗(yàn)技術(shù)的合成方法,將回歸方法用作函數(shù)估算的工具,利用試驗(yàn)結(jié)果與多因子試驗(yàn)中各個(gè)因子之間的相互關(guān)系,以及多項(xiàng)式中的近似因子之間的關(guān)系得到相應(yīng)的函數(shù),再通過(guò)合理的試驗(yàn)設(shè)計(jì),盡量能以相對(duì)比較少的試驗(yàn)項(xiàng)目、較短的試驗(yàn)時(shí)間和最經(jīng)濟(jì)實(shí)用的試驗(yàn)方式對(duì)整個(gè)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行全面的研究,科學(xué)地分析整體和局部之間的關(guān)系,進(jìn)而得到明顯的、有目的的結(jié)論[3]。
研究發(fā)現(xiàn),三萜酸類化合物提取效果與提取溫度、時(shí)間、超聲波功率等有密切關(guān)系。本實(shí)驗(yàn)在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上,利用響應(yīng)曲面法中心組合設(shè)計(jì),最終確定阿里紅中三萜酸類化合物提取的最佳工藝。
阿里紅藥材購(gòu)于新疆維吾爾醫(yī)醫(yī)院;
高氯酸、香草醛(天津市大茂化學(xué)試劑廠),乙醇(95%,天津市永大化學(xué)試劑開發(fā)中心),齊墩果酸的對(duì)照品(上海市融禾醫(yī)藥科技有限公司,批號(hào)080921),冰醋酸(北京化工廠)。
Rotavapor R-3旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(瑞士BUCHI),KQ-250DE型數(shù)控超聲波清洗儀(昆山超聲儀器有限公司),BSA623S-CW型電子天平[北京賽多利斯科學(xué)儀器(德國(guó))有限公司],GZX-DH-50X55-S型電熱恒溫干燥箱(上海市躍進(jìn)醫(yī)療機(jī)械廠),DK-98-1型數(shù)顯電子恒溫水浴鍋(天津泰斯特儀器有限公司),SHZ-D(Ⅲ)循環(huán)式多用真空泵(鄭州亞榮儀器有限公司),1700紫外分光光度儀(日本島津)。
1.2.1 確定顯色方法
根據(jù)相關(guān)文獻(xiàn),高氯酸-香草醛比色法適用于各種三萜酸的顯色,因此,本實(shí)驗(yàn)選用此法顯色,然后對(duì)樣品進(jìn)行紫外檢測(cè)。
1.2.2 選擇檢測(cè)的波長(zhǎng)
精密稱取齊墩果酸對(duì)照品5 mg置于25 mL容量瓶中,乙醇溶解并定容至刻度,就可以得到齊墩果酸的對(duì)照品溶液,溶液的濃度是0.2 mg/mL。
精密移取供試品與對(duì)照品溶液0.6 mL置20 mL帶塞的試管中,揮去溶劑,然后加入新配制5%香草醛-冰醋酸0.4 mL和高氯酸1.6 mL,置70 ℃恒溫水浴中加熱15 min,然后冷卻至室溫,再精密加入冰醋酸8.0 mL,搖勻,于400~800 nm范圍下掃描波長(zhǎng),從圖中得到最大吸收波長(zhǎng)。
1.2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備
將精密吸取的齊墩果酸對(duì)照品溶液0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL置于試管中,用水浴將乙醇揮干,加入1.6 mL高氯酸,0.4 mL 5%香草醛-冰醋酸溶液,放置于70 ℃恒溫水浴中,加熱反應(yīng)15 min,然后冷卻至室溫,然后再分別加入8.0 mL冰醋酸溶液,用超聲將其混勻。以空白樣品為參照,使用紫外分光光度計(jì),于波長(zhǎng)547 nm處測(cè)得吸光度值。然后將齊墩果酸的質(zhì)量作為橫坐標(biāo),測(cè)得的吸光度值作為縱坐標(biāo),建立相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。應(yīng)用最小二乘法做線性回歸,可以得到相應(yīng)的回歸方程。
1.2.4 樣品中總?cè)扑岷康臏y(cè)定
取在不同的條件下提取的阿里紅浸膏150 mg,然后用乙醇溶解,置于100 mL容量瓶中定容至刻度線。精密量取上述溶液0.5 mL,放置水浴中直至溶劑完全揮去,然后再分別加入0.4 mL 5%的香草醛-冰醋酸溶液,1.6 mL高氯酸并混勻,放置70 ℃的恒溫水浴中反應(yīng)15 min,冷卻至室溫,再加8 mL冰醋酸并混勻,用紫外分光光度法(Ultraviolet spectrophotometry,UV)于波長(zhǎng)547 nm處測(cè)得吸光度值,然后代入1.2.3中得到的標(biāo)準(zhǔn)曲線中,并計(jì)算得到的三萜酸含量。
其中:C(mg/mL)—測(cè)定樣品液的濃度
V1(mL)—測(cè)定時(shí)稀釋的體積
V2(mL)—樣品溶液定容后的體積
V0(mL)—測(cè)定吸光度時(shí)所用的樣品液體積
W(mg)—原藥材質(zhì)量
1.3.1 精密度試驗(yàn)與重復(fù)性試驗(yàn)
按照1.2.4中應(yīng)用的方法,平行操作測(cè)試5組樣品,具有重復(fù)性的試驗(yàn)可以用于評(píng)價(jià)測(cè)定方法,確定其可靠性,選取其中的一組平行地連續(xù)測(cè)定5次,然后進(jìn)行精密度的考察,測(cè)定所得結(jié)果間接近的程度[2]。
1.3.2 穩(wěn)定性試驗(yàn)
準(zhǔn)確吸取供試品溶液一份,再分別按照1.2.4項(xiàng)的方法操作,在60 min內(nèi)每隔10 min測(cè)定相應(yīng)的吸光度值,考察顯色的穩(wěn)定性[2]。
1.3.3 加樣的回收率試驗(yàn)
量取9份已知含量的供試品溶液,置于具塞的試管中,再分別加入對(duì)照品溶液,按1.2.4中的方法顯色并測(cè)定吸光度,最后計(jì)算其中三萜酸的含量,計(jì)算得平均回收率?;厥章试囼?yàn)一般用于評(píng)價(jià)測(cè)定方法的準(zhǔn)確性[2]。
考慮不同的因素對(duì)三萜酸提取率的影響,三萜酸類化合物提取效果主要與提取溫度、時(shí)間、超聲功率有密切關(guān)系,因此本研究對(duì)超聲時(shí)間、超聲溫度、超聲功率進(jìn)行了單因素試驗(yàn),然后利用響應(yīng)曲面法確定最佳提取條件。
1.4.1 單因素實(shí)驗(yàn)
超聲波提取的影響因素比較多,在進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)時(shí),考察了超聲功率、提取時(shí)間、提取溫度對(duì)提取率的影響,發(fā)現(xiàn)對(duì)結(jié)果影響較大。所以在實(shí)驗(yàn)中,超聲功率、提取時(shí)間和提取溫度將作為考察因素。超聲提取的溫度分別設(shè)為30 ℃、40 ℃、50 ℃、60 ℃和70 ℃,超聲時(shí)間分別設(shè)為10 min、20 min、30 min、40 min和50 min,超聲功率分別設(shè)為100 W、150 W、200 W和250 W。
1.4.2 響應(yīng)面優(yōu)化實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
采用Design Expert軟件(8.05b)進(jìn)行設(shè)計(jì),并采用Box-benhnken設(shè)計(jì)試驗(yàn)法進(jìn)行優(yōu)化得到最佳的提取方法,共選取超聲功率、提取時(shí)間和提取溫度作為3個(gè)主要的因素,并且將其作為自變量,響應(yīng)函數(shù)為總?cè)频牡寐?,通過(guò)響應(yīng)曲面分析法,得到回歸方程,最終得出自變量和響應(yīng)函數(shù)之間的統(tǒng)計(jì)學(xué)模型,以確立阿里紅總?cè)铺崛〉淖罴训墓に噮?shù)。
在本試驗(yàn)中,以超聲功率、提取時(shí)間、提取溫度作為三個(gè)關(guān)鍵的考察因素也就是自變量,三個(gè)自變量分別設(shè)為X1、X2、X3,并且分別用-1、0、+1來(lái)表示自變量的低、中、高水平,然后再按照相應(yīng)方程式x=(Xi-X0)/ΔX對(duì)自變量進(jìn)行編碼,方程式中x代表自變量的編碼值,Xi代表自變量的真實(shí)值,ΔX代表自變量的變化,因素編碼及水平見(jiàn)表1。
表 1 因素編碼水平表
預(yù)測(cè)模型是以阿里紅總?cè)扑岬淖罱K得率Y作為響應(yīng)值(評(píng)價(jià)指標(biāo)),此模型得到的二次多項(xiàng)式方程是由最小二乘法擬合而得的
上述方程式中,Y代表預(yù)測(cè)響應(yīng)值,β0代表常數(shù)值,βi代表線性系數(shù),βii代表二次項(xiàng)系數(shù),βij代表交互項(xiàng)系數(shù)。
2.1.1 確定最佳測(cè)定波長(zhǎng)
利用高氯酸-香草醛顯色法,即1.2具體步驟操作,然后選擇400~800 nm進(jìn)行波長(zhǎng)掃描,結(jié)果見(jiàn)圖1,從圖中可以看到齊墩果酸對(duì)照品溶液在547 nm 處和611 nm處有最大吸收峰,文獻(xiàn)多采用547 nm為阿里紅三萜酸的紫外檢測(cè)波長(zhǎng),因此本研究選用547 nm為阿里紅三萜酸的紫外檢測(cè)波長(zhǎng)。
2.1.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
以齊墩果酸含量為橫坐標(biāo),對(duì)應(yīng)的吸光度值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果見(jiàn)圖2,得到的回歸方程為:Y=28.436X-0.009 2,R2=0.996 8。
從圖2可以看出,不同濃度的齊墩果酸對(duì)照品溶液與測(cè)得的吸光度值成良好的線性關(guān)系,相關(guān)系數(shù)R2=0.996 8,因此此方法可以用作阿里紅三萜酸含量測(cè)定方法。
圖 1 齊墩果酸的UV波長(zhǎng)掃描圖
圖 2 齊墩果酸標(biāo)準(zhǔn)曲線
2.2.1 精密度與重復(fù)性結(jié)果
用高氯酸-甘草醛法顯色UV測(cè)定阿里紅總?cè)扑岷?,精密度相?duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為0.23%,說(shuō)明使用的測(cè)定方法精密性與準(zhǔn)確性良好,而且測(cè)定條件易操作,可控性強(qiáng),測(cè)定結(jié)果可信。
2.2.2 穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果
樣品加入顯色劑后在60 min內(nèi)檢測(cè),其吸光度值變化相對(duì)穩(wěn)定,RSD為0.45%。表明顯色穩(wěn)定,一定時(shí)間內(nèi)測(cè)定不會(huì)對(duì)三萜酸含量產(chǎn)生影響。
2.2.3 回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果
平均回收率為99.91%,RSD為0.48%,表明測(cè)定所得的結(jié)果與真實(shí)數(shù)值較為接近,準(zhǔn)確度較高。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)說(shuō)明該顯色方法測(cè)定阿里紅總?cè)扑岷糠衔⒘砍煞址治龅囊?,具有一定的?shí)用價(jià)值,具體結(jié)果見(jiàn)表2。
表 2 回收率結(jié)果(n=9)
2.3.1 單因素實(shí)驗(yàn)的結(jié)果與分析
為了更好地確定阿里紅三萜酸的提取條件,將幾個(gè)影響最終提取率的主要因素進(jìn)行了單因素考察,結(jié)果如下。
(1)超聲功率對(duì)總?cè)扑岬牡寐实挠绊?/p>
超聲提取時(shí)間為30 min,提取溫度為30 ℃,選擇不同的超聲功率,對(duì)阿里紅總?cè)扑岬牡寐视绊懸?jiàn)圖3。如圖3所示,當(dāng)超聲功率設(shè)為200 W時(shí),總?cè)扑岬淖詈蟮寐首罡?。?dāng)超聲功率小于200 W時(shí),隨著超聲頻率的升高,總?cè)扑岬牡寐室仓饾u升高;而當(dāng)超聲功率一旦超過(guò)了200 W時(shí),隨著超聲功率的進(jìn)一步增加,總?cè)扑岬寐蕝s逐漸地下降。因此,超聲功率選擇為200 W是最佳條件。
(2)超聲時(shí)間對(duì)提取得率的影響
超聲提取溫度為30 ℃,提取功率為200 W,選擇不同的超聲時(shí)間,對(duì)阿里紅總?cè)扑岬牡寐视绊懸?jiàn)圖4。如圖4所示,當(dāng)超聲的時(shí)間設(shè)為30 min時(shí),阿里紅總?cè)扑岬奶崛〉寐首罡摺.?dāng)超聲處理的時(shí)間超過(guò)30 min時(shí),總?cè)扑峋蜁?huì)出現(xiàn)損失的現(xiàn)象,其提取得率會(huì)明顯下降,這說(shuō)明阿里紅總?cè)扑岬奶崛∵^(guò)程與超聲的時(shí)間密切相關(guān),所以選擇最佳提取時(shí)間為30 min。
(3)超聲溫度對(duì)提取得率的影響
超聲提取時(shí)間為30 min,超聲功率為200 W,選擇不同的提取溫度,對(duì)阿里紅總?cè)扑岬牡寐视绊懸?jiàn)圖 5。如圖5所示,當(dāng)超聲提取的溫度低于40 ℃時(shí),升高溫度可以使總?cè)扑岬寐食霈F(xiàn)上升的趨勢(shì),當(dāng)溫度達(dá)到40 ℃時(shí),阿里紅總?cè)扑岬牡寐蔬_(dá)到了最大值。此時(shí),繼續(xù)升高提取溫度,總?cè)扑岬牡寐蕝s出現(xiàn)了下降的趨勢(shì)。據(jù)此,提取溫度設(shè)為40 ℃,是最適宜的溫度。
圖 3 超聲功率對(duì)超聲波提取阿里紅總?cè)扑岬寐实挠绊?/p>
圖 4 超聲時(shí)間對(duì)超聲波提取阿里紅總?cè)扑岬寐实挠绊?/p>
圖 5 超聲溫度對(duì)超聲波提取阿里紅總?cè)扑岬寐实挠绊?/p>
2.3.2 響應(yīng)面分析法優(yōu)化阿里紅總?cè)扑岢曁崛」に?/p>
根據(jù)RSM的設(shè)計(jì),共選取17個(gè)試驗(yàn)點(diǎn),將超聲的功率、時(shí)間和溫度3個(gè)主要因素設(shè)為自變量,最后以總?cè)扑岬牡寐首鳛镽SM的響應(yīng)值。表3是得率試驗(yàn)值和模型預(yù)測(cè)值。將結(jié)果進(jìn)行了二次多項(xiàng)回歸擬合,最終獲得了預(yù)測(cè)響應(yīng)值Y(得率/%)和功率(A/W)、提取時(shí)間(B/min)及提取溫度(C/℃)的一個(gè)二次回歸方程:
Y=14.87+1.250E-003X1+0.75X2+0.49X3-
在此二次模型中,回歸系數(shù)的顯著性檢驗(yàn)(表4)表明:主要因素X1、X2和X3對(duì)總?cè)扑岬奶崛⌒Ч木€性效應(yīng)都比較顯著;另外,因素X12和X22對(duì)總?cè)扑岬奶崛⌒Ч那嫘?yīng)比較顯著,而X1X2、X1X3和X2X3對(duì)總?cè)扑岬奶崛⌒Ч慕换ビ绊懖⒉伙@著。
表 3 阿里紅中總?cè)扑岬寐蕦?shí)測(cè)值與模型預(yù)測(cè)值
表 4 回歸方程系數(shù)顯著性檢驗(yàn)
(1)超聲提取阿里紅總?cè)扑岬牡雀呔€和響應(yīng)面分析及優(yōu)化
圖6可以得出,當(dāng)超聲提取溫度保持不變?yōu)?0 ℃時(shí),提取功率與時(shí)間有明顯的相互影響作用。當(dāng)超聲提取溫度不變時(shí),延長(zhǎng)超聲的提取時(shí)間,總?cè)扑岬牡寐蕰?huì)先升高后下降,得出一個(gè)峰值;當(dāng)超聲提取功率在中間水平條件時(shí),總?cè)频牡寐首兓容^大;當(dāng)提取時(shí)間在中間水平時(shí),總?cè)扑岬牡寐氏鄬?duì)較大;而在提取的時(shí)間不變時(shí),超聲功率也同樣有上述規(guī)律。分析圖7可以得到,當(dāng)超聲功率處于中間水平,提取時(shí)間也處于中間水平時(shí),就可以獲得比較高的得率。
從圖7得出,超聲提取時(shí)間為30 min不變時(shí),增加超聲功率與提升超聲提取溫度,總?cè)扑岬牡寐蕰?huì)先增加后減少,中間出現(xiàn)一個(gè)峰值。當(dāng)超聲提取的功率固定時(shí),超聲提取的溫度逐漸上升時(shí),總?cè)扑岬牡寐室搽S之增加。出現(xiàn)這些現(xiàn)象的原因是,超聲提取溫度的提高能夠加快分子解離與擴(kuò)散的運(yùn)動(dòng)速度,進(jìn)一步加快總?cè)扑岬奈龀鏊俾?并最終提高總?cè)扑岬寐省?/p>
圖8表明,當(dāng)超聲功率為200 W時(shí),總?cè)扑岬牡寐蕰?huì)隨著超聲的溫度與時(shí)間的變化而變化,出現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)。這是因?yàn)槌暱梢云扑榘⒗锛t的細(xì)胞,從而將細(xì)胞內(nèi)的阿里紅總?cè)扑崽崛〕鰜?lái),但是超聲時(shí)間過(guò)長(zhǎng)就可能影響到其化學(xué)結(jié)構(gòu),進(jìn)而降低阿里紅總?cè)扑岬牡寐省?/p>
(2)確定阿里紅總?cè)扑嶙罴烟崛l件與驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)
根據(jù)回歸模型,在選取的各個(gè)因素的范圍內(nèi),應(yīng)用Design-Expert軟件分析可得出,超聲波輔助提取阿里紅總?cè)扑岬淖顑?yōu)工藝是:超聲功率245.2 W、提取時(shí)間34.3 min、提取溫50.0 ℃,阿里紅總?cè)扑岬寐实念A(yù)測(cè)響應(yīng)值是14.89%。最后考慮到條件的可控性,得到最優(yōu)的阿里紅總?cè)扑岬某曁崛」に囀牵撼暪β?50 W、提取時(shí)間35 min、提取溫度50 ℃。最后我們用最優(yōu)的超聲提取工藝做了三次平行試驗(yàn),計(jì)算得出平均的阿里紅總?cè)扑崽崛÷适?4.88%,與預(yù)測(cè)的提取得率14.89%近似相等,驗(yàn)證了我們的預(yù)測(cè)結(jié)果,說(shuō)明以上的回歸方程和實(shí)際情況擬合較好,充分地驗(yàn)證了所建模型的正確性,說(shuō)明響應(yīng)曲面法適用于阿里紅總?cè)扑岬某曁崛」に嚨幕貧w分析及參數(shù)優(yōu)化。
圖 6 超聲功率和提取時(shí)間交互影響得率的響應(yīng)面圖及等高線圖
圖 7 超聲功率與提取溫度交互影響得率的響應(yīng)面圖及等高線圖
圖 8 提取溫度與提取時(shí)間交互影響得率的響應(yīng)面圖及等高線圖
由于具有多種結(jié)構(gòu)類型和生理活性作用,真菌的代謝產(chǎn)物成為開發(fā)利用新的天然來(lái)源藥物的一個(gè)很重要的來(lái)源。我們國(guó)家的真菌資源十分的豐富,為了更好地開發(fā)利用和更好地尋找新的藥物活性成分,我們提取分離了藥用真菌阿里紅的化學(xué)成分并優(yōu)化了其提取工藝。進(jìn)行藥物活性成分的提取工藝的研究,得到一個(gè)較先進(jìn)的提取工藝是研究新劑型的必需的前提,成分的最終提取率直接影響到藥物的質(zhì)量和療效。提取工藝的優(yōu)劣能直接影響生藥的利用率以及后期加工的難易,因此,提取工藝的研究是中藥生產(chǎn)實(shí)現(xiàn)現(xiàn)代化的關(guān)鍵環(huán)節(jié),所以,中藥提取工藝的研究及優(yōu)化是必需的,不可或缺的。
用超聲波法提取中藥有效成分是近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的一種新方法。當(dāng)聲波的頻率超過(guò)20 kHz時(shí),就叫做超聲波。采用超聲波的方法提取目標(biāo)產(chǎn)物時(shí),可以使整個(gè)提取過(guò)程更快速,而且常溫下就能提取,整個(gè)提取過(guò)程能耗低且可以達(dá)到較高的提取率。超聲波提取一般作為輔助提取方式提取目標(biāo)產(chǎn)物,當(dāng)其應(yīng)用于中藥有效成分的提取時(shí),具有機(jī)械攪拌、空化效應(yīng)、強(qiáng)化擴(kuò)散、熱效應(yīng)、凝聚作用、乳化作用等[4]。與常規(guī)的提取方法比較,超聲波法提取效果好、對(duì)有效成分破壞少,因?yàn)槌暡茉龃笪镔|(zhì)分子運(yùn)動(dòng)頻率和速度,增加溶劑穿透力,提高藥物成分溶出速度和溶出數(shù)量[5]。提取溫度的高低、提取溶劑不同、提取時(shí)間的長(zhǎng)短等等因素,都可以影響到藥物有效成分的最終提取率,要想得到最佳的提取工藝必然需要進(jìn)行大量的試驗(yàn)研究,響應(yīng)曲面法是優(yōu)化提取工藝時(shí)常采用的方法。
本研究在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,采用響應(yīng)曲面法優(yōu)化阿里紅中總?cè)扑岢煞值某曁崛」に嚄l件。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示,超聲波輔助提取阿里紅中總?cè)扑岬淖罴压に嚄l件為:超聲功率245.2 W、提取時(shí)間34.3 min、提取溫度50.0 ℃,阿里紅總?cè)扑岬寐实念A(yù)測(cè)響應(yīng)值為14.89%。最后驗(yàn)證阿里紅總?cè)扑岬牡寐实睦碚擃A(yù)測(cè)值,采取超聲提取的最優(yōu)條件,得到阿里紅總?cè)扑岬膶?shí)際得率是14.88%,和理論預(yù)測(cè)值大致相等。試驗(yàn)數(shù)據(jù)說(shuō)明,應(yīng)用Box-benhnken設(shè)計(jì)試驗(yàn)優(yōu)化超聲波輔助提取阿里紅總?cè)扑岬墓に?,省時(shí)省力,科學(xué)性強(qiáng),而且有很強(qiáng)實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。
參考文獻(xiàn):
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