申美靜 (貴州省遵義市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，貴州 遵義 563002)

呼吸道感染是我國兒童最常見的感染性疾病，而流感嗜血桿菌(Haemophilusinfluenzae)是引起兒童呼吸道感染的主要致病菌，常可引起肺炎、支氣管炎、咽喉炎，它還可侵入血液引起兒童敗血癥、腦膜炎等嚴(yán)重疾?。?-2］。由于流感嗜血桿菌分離培養(yǎng)的條件比較高，臨床醫(yī)生常常采用經(jīng)驗(yàn)用藥進(jìn)行治療，忽視了培養(yǎng)和藥物敏感試驗(yàn)的重要性，造成了一些抗菌素使用不合理［3-4］。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象:2013年2月～2013年7月在遵義市第一人民醫(yī)院兒科因呼吸道感染的住院患者。

1.2 標(biāo)本采集:入院當(dāng)天采用刺激咳痰或誘導(dǎo)咳痰方法收集的痰液或咽拭子標(biāo)本于培養(yǎng)杯中，立即送檢。

1.3 主要試劑和儀器:CM0331哥倫比亞瓊脂粉(OXOID公司);新鮮無菌脫纖維綿羊血(杭州新銳公司);流感嗜血鑒定卡片(生物梅里埃公司);流感嗜血桿菌添加劑(OXOID公司);CM0337M-H瓊脂粉(OXOID公司);氨芐西林、頭孢呋辛、頭孢曲松、左氧氟沙星、復(fù)方新諾明、氨芐西林/克拉維酸、阿奇霉素藥物敏感紙片(OXOID公司);全自動(dòng)細(xì)菌鑒定及藥敏分析儀(VITEK2Compact60);艾本德二氧化碳培養(yǎng)箱。

1.4 菌株培養(yǎng)及鑒定:將痰液標(biāo)本接種于血平皿和含萬古霉素巧克力平皿上，置于5% ～10%CO2的35℃孵育箱中18～24 h后觀察結(jié)果。挑取可疑菌株(在含萬古霉素巧克力平皿上呈無色透明、濕潤并有明顯的霉氣味，在血平皿上不生長［5］)進(jìn)行革蘭染色和衛(wèi)星試驗(yàn)，鏡下呈革蘭陰性多形性，衛(wèi)星試驗(yàn)為陽性為流感嗜血菌株。最后采用梅里埃的全自動(dòng)細(xì)菌鑒定及藥敏分析儀進(jìn)行確證為流感嗜桿菌。

1.5 藥物敏感試驗(yàn):采用 K-B紙片擴(kuò)散法，用VITEK2Compact配套比濁儀調(diào)節(jié)菌懸液濃度約0.5MCF，涂布于HTM培養(yǎng)基上，用鑷子將OXOID公司7種藥敏紙片(氨芐西林、頭孢呋辛、頭孢曲松、左氧氟沙星、復(fù)方新諾明、氨芐西林/克拉維酸、阿奇霉素)貼在涂布菌液的HTM培養(yǎng)基上，置于5% ～10%CO2的35℃孵育箱中18～24 h后觀察結(jié)果。藥物敏感的判斷標(biāo)準(zhǔn)采用CLSIM100-S22［6］。

1.6 室內(nèi)質(zhì)量控制:每周用標(biāo)準(zhǔn)菌株ATCC49247進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)量控制，判斷標(biāo)準(zhǔn)采用CLSIM100-S22。

2 結(jié)果

2.1 對(duì)892例兒童呼吸道感染患者進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)出流感嗜血桿菌93株，培養(yǎng)的陽性率為10.4%。

2.2 對(duì)93株流感嗜血桿菌菌株進(jìn)行藥物敏感試驗(yàn)，表明對(duì)對(duì)氨芐西林的耐藥率為44.1%;對(duì)復(fù)方新諾明的耐藥率為64.5%;頭孢呋辛的耐藥率為10.7%;對(duì)左氧氟沙星的耐藥率為1%;頭孢曲松的耐藥率為16.1%;阿奇霉素的耐藥率為6.5%;氨芐西林/克拉維酸的耐藥率為12.9%。

3 討論

流感嗜血桿菌是一種只侵犯人類的革蘭陰性桿菌，3歲以內(nèi)的兒童因抵抗力較弱，流感嗜血桿菌是兒童呼吸道感染的主要致病菌［7］。有研究表明感染流感嗜血桿菌的兒童占全部感染該菌人群的20%［8］。隨著抗菌素的不斷研發(fā)和使用及病原微生物不斷發(fā)生變異，使得流感嗜血桿菌耐藥菌株不斷增加，耐藥機(jī)制也多樣化及多種耐藥菌株出現(xiàn)［9］。本實(shí)驗(yàn)得出貴州省遵義地區(qū)3歲以內(nèi)兒童呼吸道感染流感嗜血桿菌的耐藥情況，對(duì)氨芐西林、復(fù)方新諾明的耐藥率較高;對(duì)左氧氟沙星、頭孢曲松、頭孢呋辛、阿奇霉素、氨芐西林/克拉維酸的耐藥率較低。兒童因?yàn)榭咕厥褂孟拗圃诮?jīng)驗(yàn)治療時(shí)應(yīng)選擇耐藥率較低的β類抗菌素，臨床治療時(shí)可根據(jù)各地不同情況和藥物敏感結(jié)果使用抗菌素，避免抗菌素的濫用。

［1］ 王運(yùn)中，季 偉，陶云珍，等.兒童呼吸道感染流感嗜血桿菌的生物學(xué)分型及耐藥性［J］.江蘇醫(yī)藥，2012，38(7):777.

［2］ Murphy TF，F(xiàn)aden H，Bakaletz LO，et al.NontypeableHae-mophilusinfluenzae as a pathogen in children［J］.The Pediatric infectious disease journal，2009，28(1):43.

［3］ 袁瑾懿，楊 帆，徐曉剛等.臨床分離流感嗜血桿菌和副流感嗜血桿菌的耐藥性研究［J］.中華傳染病雜志，2009，27(5):262.

［4］ 李亦東.左氧氟沙星序貫治療社區(qū)獲得性肺炎［J］.吉林醫(yī)學(xué)，2008，29(11):894.

［5］ 葉應(yīng)嫵，王 三，申子瑜.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程［M］.第3版.南京:東南大學(xué)出版社，2006:235.

［6］ Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing.

［7］ Shen，XZ，Lu，Q，Deng，L et al.Resistance of Haemophilusinfluenzae isolates in children under 5 years old with acute respiratory infections in China between 2000 and 2002［J］.The Journal of International Medical Research，2007，35(4):554.

［8］ Zhanel G G，Palatnick L，Nichol K A，et al.Antimicrobial resistance in Haemophilusinfluenzae and Moraxella catarrhalis respiratory tract isolates:results of the Canadian Respiratory Organism Susceptibility Study，1997 to 2002［J］.Antimicrobial agents and chemotherapy，2003，47(6):1875.

［9］ 張 泓，吳文娟，李萬華.流感嗜血桿菌氨芐西林耐藥基因研究［J］.中國感染與化療雜志，2006，6(12):377.