楊欽欽，陳民利

(浙江中醫(yī)藥大學動物實驗研究中心/比較醫(yī)學研究中心，杭州 310053)

磷脂酶A2(phospholipase A2,PLA2)是一種能催化膜磷脂甘油分子水解的酶，生成游離脂肪酸和溶血磷脂，如花生四烯酸(arachidonic acid, AA)和溶血磷脂[1-2]。水解物通過不同代謝途徑在體內發(fā)揮生理作用，如膜磷脂降解、能量代謝、信號傳導、血液凝固、質膜重建等[3-7]，具有廣泛的生物活性。至今已發(fā)現(xiàn)磷脂酶A2超家族有27個成員，主要分為四大類：1、分泌型磷脂酶A2(secreted phospholipaseA2, sPLA2)；2、胞漿型磷脂酶A2(cytosolic phospholipase A2,cPLA2)；3、鈣離子非依賴型磷脂酶A2(calcium-independent phospholipaseA2,iPLA2)；4、脂蛋白相關磷脂酶A2(lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PLA2)。目前研究發(fā)現(xiàn)sPLA2與炎癥、動脈粥樣硬化(atherosclerosis,AS)、腫瘤等疾病緊密相關；cPLA2涉及炎癥、中樞神經系統(tǒng)疾病等病理過程；iPLA2在脂類代謝、腫瘤等生理病理過程中必不可少；Lp-PLA2在AS形成中發(fā)揮重要作用。對這些疾病研究中，PLA2在心血管疾病中的作用逐漸成為了研究熱點。

心血管疾病是全球發(fā)病率和死亡率較高的疾病之一，而動脈粥樣硬化是其重要的病理基礎，動脈炎癥在AS和惡性心血管事件中起著核心作用。近年來，研究發(fā)現(xiàn)PLA2與心血管病變(如動脈粥樣硬化、心肌缺血等)有著密切的聯(lián)系，sPLA2涉及AS從早期病變(脂紋)到復合病變各階段的生理病理過程；cPLA2和iPLA2很可能通過形成脂質媒介促進AS形成；而Lp-PLA2已成為動脈粥樣硬化的一種新型炎癥標志物。因此，探究PLA2在AS相關炎癥性疾病中的作用至關重要，利用動物實驗研究能進一步揭示PLA2與AS的關系。

隨著生物技術的發(fā)展和應用，利用各種轉基因、基因敲除小鼠或其他動物模型為研究PLA2在AS中的作用提供了新的途徑。各PLA2基因操作小鼠展現(xiàn)的AS表型可能不單歸因于脂質代謝信號的改變，更多的可能是類花生酸信號變化，但也可能是各種靶向細胞膜的降解。本文結合近年來國內外對PLA2在心血管疾病中的動物實驗研究報道逐個進行闡述。

1 sPLA2與AS在動物實驗中的研究

sPLA2是一種Ca2+依賴的分泌型胞外酶，分子量為14～18 kDa[8]。100多年前，從眼鏡蛇毒液中分離出sPLA2s的首個成員，命名為group IA(GIA)，開啟了PLA2家族的篇章。至今，在哺乳動物中已發(fā)現(xiàn)11種sPLA2亞型，分別為GIB、IIA、IIC、IID、IIE、IIF、III、V、X、XIIA和XIIB。而人類基因組只能編碼9種蛋白，其中IIC型sPLA2是以假基因形式存在于人體內，鼠類中含有上述的全部PLA2。sPLA2s與疾病的關系在動物實驗中進行了頗多研究，sPLA2亞型的分布及在小鼠中的表現(xiàn)歸納見表1。

表1 sPLA2主要分布及在KO/Tg小鼠中的表現(xiàn)

sPLA2在AS病變動物中的實驗研究已成為此研究領域的熱門話題。越來越多的研究表明sPLA2-IIA, sPLA2-III, sPLA2-V和sPLA2-X很可能在血管壁上有多種致AS特性[9]。脂蛋白顆粒(如LDL和HDL)表面覆蓋的PC是sPLA2的底物。sPLA-X, V, III, II都能水解PC，其中X型的水解能力最強。sPLA2水解脂蛋白表面PC生成的游離脂肪酸和LPC有轉換血管活性和促炎性作用，從而加速AS的形成。sPLA2水解LDL形成更多小致密并帶負電荷的修飾LDL。這些LDL比較容易滲進血管壁，形成氧化性LDL(ox-LDL)，誘導巨噬細胞泡沫化，最終導致AS的發(fā)生[10]。同時水解HDL能降低這些抗AS顆粒促進膽固醇從脂質豐富的泡沫細胞中外流的能力。動脈斑塊中修飾的LDL比循環(huán)LDL含有較少的PC和更多的LPC，這表明斑塊部位的LDL經過了sPLA2的脂解修飾。事實上，LDL被sPLA2水解后，會導致磷脂降解顆粒上apoB-100的結構改變，從而促進了聚合作用[11-12]。

1.1 sPLA2-IIA與AS的動物實驗研究

大量研究表明在AS病變的各個階段都能發(fā)現(xiàn)sPLA2-IIA，主要存在于巨噬細胞富集的區(qū)域、動脈粥樣硬化的非細胞脂類核心及病變血管內膜的細胞外基質中。Li WH等[13]研究發(fā)現(xiàn)sPLA2-IIA在AS大鼠血管平滑肌細胞、心肌組織及脂肪組織中的表達均升高。Niessen等[14]認為sPLA2-IIA是AS和心肌細胞缺血性損害的介質，可作為心血管疾病中的一個重要炎癥因子。sPLA2-IIA能誘導許多脂質介質生成，如非酯化脂肪酸、氧化性非酯化脂肪酸、溶血磷脂等，促發(fā)下游多種炎癥信號傳導，從而導致AS斑塊形成。

許多AS動物研究也表明sPLA2與AS斑塊形成緊密相關。PLA2G2A-Tg小鼠持續(xù)飼喂高膽固醇飲食后，血管中出現(xiàn)AS斑塊的幾率大大增加[15]。在這類小鼠的動脈粥樣斑塊中發(fā)現(xiàn)有sPLA2-IIA，而且相比與正常組其血漿HDL降低，LDL和活性氧化磷脂含量升高。Ivandic等[16]研究揭示PLA2G2A-Tg小鼠即使在低脂飲食下也能呈現(xiàn)出AS病變，免疫組化印染顯示sPLA2出現(xiàn)在轉基因小鼠的AS病變斑塊中。轉基因小鼠巨噬細胞分泌的sPLA2-IIA能增強12/15-脂氧合酶(12/15-LOX)的表達，引起氧化壓力產生，被認為是AS形成的一個重要因子[17]。尤其是，當將PLA2G2A-Tg小鼠的骨髓細胞移植到到Ldlr-/-的小鼠后，盡管血清脂蛋白濃度變化不大，但是后者主動脈弓部和竇部的AS病變程度顯著增加[18]。由此推論，sPLA2-IIA可以獨立于脂蛋白代謝而促進AS的形成。

1.2 sPLA2-V與AS的實驗研究

近來研究發(fā)現(xiàn)sPLA2-V比sPLA2-IIA具有更強的水解LDL和HDL表面PC的活性，經sPLA2-V修飾后的LDL能更有效誘導巨噬細胞轉化成泡沫細胞，提示sPLA2-V可能是促進AS形成中的一個更重要的酶[19]。事實上，sPLA2-V在動物AS斑塊中含量的確更高。含脂量高的飲食能上調大動脈中sPLA-V的表達，而且自發(fā)性AS的apoE-/-×Ldlr-/-小鼠的動脈斑塊中sPLA2-V也顯著表達[8]。因為sPLA2-V通過結合蛋白聚糖后能使其對LDL的作用活性大大增強，所以巨噬細胞能依賴于蛋白聚糖(粘結蛋白聚糖-4)途徑而不是清道夫受體SR-A和CD36攝取由sPLA2-V修飾的LDL，sPLA2-V形成的游離脂肪酸刺激巨噬細胞通過NF-κB途徑誘發(fā)促炎因子生成，最終導致AS發(fā)生[20]。

更重要的是，Ldlr-/-小鼠接受逆轉錄酶病毒介導的pla2g5基因移植之后，其升主動脈根部的斑塊面積明顯增加，局部區(qū)域伴隨有膠原沉積，然而移植pla2g5-/-骨髓細胞小鼠的主動脈弓部和胸主動脈中的斑塊顯著減少[21]。這些實驗結果充分說明了巨噬細胞相關的sPLA2-V參與動脈粥樣硬化的發(fā)展。另外，缺乏sPLA-V的ApoeE-/-小鼠斑塊中血小板膠原含量也顯著降低[22]。值得注意的是，這些骨髓移植方法只能評價巨噬細胞或其他造血細胞中sPLA2-V的作用，AS非造血細胞中sPLA2-V的作用有待進一步探究。

1.3 sPLA2-X與AS的實驗研究

sPLA2-X和sPLA2-V在體外均能有效水解脂蛋白上的卵磷脂，而且sPLA-X水解活性比sPLA2-V更強[12]。sPLA2-X作用于LDL顆粒產生小而致密的LDL顆粒，促進巨噬細胞形成，以及增加內皮細胞粘附因子的表達，最終導致AS形成。sPLA2-X脂解修飾之后的HDL，其促進膽固醇從載脂巨噬細胞中外流的能力被削弱。最近，Zack M等[23]在動物實驗中的研究表明缺失sPLA2-X的ApoE-/-小鼠能顯著減少血管緊張素-II(Ang-II)誘發(fā)的腹主動脈瘤和AS的發(fā)生，同時一些脂類促炎因子的形成也降低。

當動脈粥樣硬化發(fā)生在冠狀動脈時則容易引起心肌梗塞，嚴重威脅人類的生命。在心肌缺血再灌注實驗中，Pla2g10-/-小鼠的心肌梗死面積和嗜中性粒細胞數(shù)量顯著下降，且當受輻照的野生型小鼠再用Pla2g10-/-骨髓細胞重造后，心肌梗死面積顯著變少，說明sPLA2-X也是一個很強促AS因子[24]。Pla2g10-/-小鼠的缺血區(qū)域顯示出較低的中性粒細胞含量，分離這些Pla2g10-/-中性粒細胞能減少AA釋放以及產物LTB4的分泌，也能改善呼吸道疾病。而且，另有研究發(fā)現(xiàn)sPLA2抑制劑能減少野生型小鼠的心肌缺血面積。這些動物實驗研究結果使人們進一步認識了sPLA2-X在中性粒細胞介導心肌損傷中的作用，未來應用合適的小鼠模型將會認識sPLA2-X在斑塊中更多的作用。

1.4 sPLA2-III與AS的實驗研究

sPLA2-III也能有效水解LDL和HDL中的磷脂質。體內研究表明sPLA2-III修飾的LDL也類似于sPLA2-V或sPLA2-X作用的LDL，能促進巨噬細胞轉化成泡沫細胞。ApoE-/-小鼠中能檢測到sPLA2-III在斑塊中聚集[25]。在PLA2G3-Tg小鼠研究中顯示，當其攝食導致AS飲食后大動脈中會形成比ApoE敲除小鼠更嚴重的動脈斑塊，而且炎癥因子(如LPC和TXA2)的含量也隨著升高。由此說明，sPLA2-III與動脈粥樣硬化有潛在的聯(lián)系，但是進一步的病理生理關系將有待于在pla2g3-/-小鼠中進行更多的后續(xù)研究。

另外，在動物AS斑塊中也能檢測出其他的sPLA2，包括sPLA2-IID, IIE和IIF。sPLA2-IIF亦能水解脂蛋白表面的PC，其功效作用值得進一步探究。綜上所述，X, V, III和II-PLA2是血漿中主要的促動脈粥樣硬化因子，通過水解LDL和HDL表面的PC，產生LPC和小而致密的LDL，促進巨噬細胞、平滑肌細胞泡沫化以及膠原的聚積，最終導致動脈粥樣硬化斑塊的發(fā)生和發(fā)展。

1.5 sPLA2與其他相關疾病的實驗研究

sPLA2還與糖尿病、高脂血癥、肥胖等疾病相關。脂肪飼喂的Pla2g1b-/-小鼠與普通食物飼喂的Pla2g1b+/+小鼠相比，雖然前者脂肪吸收多但兩者體重相當[26]。同時喂以低脂飲食時，Pla2g1b-/-小鼠則展示出了更佳的葡萄糖耐量和胰島素敏感度，表明PLA2G1B能調節(jié)肥胖癥、葡萄糖代謝和胰島素敏感性。在研究PLA2G2A基因自然突變的C57BL/6小鼠時發(fā)現(xiàn)炎癥也提高了脂肪組織中PLA2G2A的表達，這表明PLA2G2A不僅能促進AS發(fā)生，而且也是其他炎癥代謝性疾病(如糖尿病)的促炎因子[27]。

2 cPLA2和iPLA2與心血管疾病在動物實驗中的研究

2.1 cPLA2與心血管疾病在動物實驗中的研究

在PLA2家族中列為IV型，屬于此家族中的胞外酶，在哺乳類動物中已經鑒別出6大種，即cPLA2α、β、γ、δ、ε、ξ(即GIVA、IVB、IVC、IVD和IVF)，而人類中僅有A-D四種亞型。GIVA cPLAα是最為廣泛研究的一個酶，在人類和鼠科動物的大腦、肝、腎、胰等組織中普遍表達，具有PLA2和溶血磷脂酶活性，也是唯一一個對含AA的磷脂底物有特異性的酶。cPLAα受刺激時釋放類花生酸的前體物質AA，因此在炎癥性疾病中有重要作用。近年來的研究表明，心血管疾病是一種炎癥性疾病，而cPLAα能產生各種脂質介質誘發(fā)血管炎癥和動脈粥樣硬化，與心血管疾病的發(fā)生發(fā)展關系密切。

動脈粥樣硬化病變始于內皮損傷，還有血脂沉積和血小板粘附釋放的多種炎癥因子(如TXA2)共同作用下，可激活內皮細胞和血管平滑肌細胞，合成膠原等細胞外基質，在這些復雜因子的協(xié)同作用下形成AS，而cPLA2在此過程中起到了關鍵性作用[28]。目前，cPLA2的研究主要集中在cPLA2α，在動脈炎癥反應中的機制研究包括：①、cPLA2α誘導炎癥因子及趨化因子(IL-1β, IL-6, TNF-α)生成；②、cPLA2α通過“cPLA2α-AA-NADPH氧化酶-超氧陰離子”途徑產生大量氧自由基；③、cPLA2α通過5-LOX促進病理狀態(tài)下誘導型一氧化氮合酶(NOS)生成，造成血管損傷。因此，cPLA2α參與了廣泛的生理病理反應。

血小板活化依賴于COX-1途徑參與促血栓因子TXA2的形成。Wong DA[29]實驗室研究發(fā)現(xiàn)pla2g4a-/-小鼠中cPLA2α在膠原刺激血小板產生TXA2過程中是必不可少的，而ADP誘導TXA2形成不依賴cPLA2α。此外，pla2g4a-/-小鼠體外血小板聚集只有極少量地下降，這可能是由于冗余PLA2產生的小部分TXA2能有效保護聚集。但是，依賴于TXA2的血管收縮缺失解釋了pla2g4a-/-小鼠流血時間延長以及免于血管栓塞疾病的原因。

cPLA2α也存在于各種細胞類型的脂肪液滴中。這些脂肪液滴由合成酶(神經酰胺激酶)通過C1P途徑合成，并依賴于JNK途徑在cPLA2α的Ser505位點通過磷酸化作用進行誘導。而且，pla2g4a-/-小鼠的體內研究發(fā)現(xiàn)它們不會隨著年齡增長或飲食(正?；蚋咧嬍?而在脂肪細胞或肝臟中積累脂肪液滴，脂肪形成或促炎介質也相應減少[30]。同理，pla2g4a-/-小鼠在高脂飲食下也能抵抗形成AS。

2.2 iPLA2與心血管疾病在動物實驗中的研究

iPLA2在PLA2家族中列為VI型，亦屬胞內酶，催化活性不依賴于Ca2+。iPLA2家族具有相同的蛋白域，這個蛋白域最初是從馬鈴薯糖蛋白(patatin)中發(fā)現(xiàn)的。因此，iPLA2也叫PNPLA2，包括GVIA(iPLA2β;PNPLA9), GVIB (iPLA2γ; PNPLA8), GVIC (iPLA2δ;PNPLA6),GVID (iPLA2ε; PNPLA3), GVIE (iPLA2ζ; PNPLA2)和GVIF (iPLA2η; PNPLA4)等6種亞型，大部分可以水解脂肪?；蜃儺愋∈竽Ｐ褪谷藗儗PLA2家族在脂質代謝和能量穩(wěn)態(tài)方面有了進一步的認識，各iPLA2在動物疾病中也發(fā)揮著不可或缺的作用。

當前iPLA2的研究主要集中于iPLA2β。iPLA2β是一種Ca2+非依賴型酶催化劑，它一直被認為在磷脂重建、細胞增殖、遷移等過程中起著重要作用?，F(xiàn)在越來越多的實驗研究發(fā)現(xiàn)iPLA2β在各種心血管疾病起著重要作用，如血管重構、高血壓、心肌缺血、冠心病等[31]。

在轉基因模型小鼠中，Shu Liu等[32]觀察到Pla2g6-/-小鼠表現(xiàn)出動脈平滑肌細胞Ca2+平衡失調癥狀，血管損傷的Pla2g6-/-小鼠由于COX-2途徑依賴的PGE2生成減少，平滑肌細胞遷移和增殖也相應降低，所以抑制iPLA2β能減輕血管壁炎癥進而預防心血管疾病。Lindsay E等[33]進一步在iPLA2β-Tg小鼠研究中表明iPLA2β在血管平滑肌中超表達，通過12/15-LOX和c-Jun途徑惡化Ang-II誘導的平滑肌細胞肥大、血管重構和高血壓等生理病理過程。PKC能介導iPLA2β上調，進而活化RhoA/Rho-kinase/CPI-17，導致糖尿病動物的血管平滑肌細胞過度收縮，所以iPLA2β是血管細胞中血管收縮和放松、Ca2+平衡以及脂質媒介合成的重要介質。

另有研究[34]表明iPLA2β-Tg小鼠在心臟灌注致冠狀動脈閉塞時會引起大量脂肪酸和LPC釋放到靜脈及缺血部位，從而在短時間內局部缺血造成惡性心律失常。但是，當對iPLA2β-Tg小鼠用BEL進行心肌缺血預處理后，脂肪酸和LPC的積累消失，還能保護小鼠免于遭受快速心律失常。這些結果說明心肌iPLA2β在心臟缺血時活化，通過介導膜磷脂水解在急性心肌缺血期間誘導致命的惡性心律不齊。

3 Lp-PLA2與AS在動物實驗中的研究

血小板活化因子乙酰水解酶(platelet activating factor acetylhydrolase,PAF-AH)家族已經有四種酶被鑒別出來，最被熟知的是分泌型脂蛋白相關磷脂酶A2(Lp-PLA2)。其余三種均為胞內蛋白質，分別為II型PAF-AH(GVII PLA2)和I型PAF-AH(GVIII PLA2)，I型PAF-AH包括α1和α2兩個亞種[31]。Lp-PLA2是一種與AS發(fā)生機制密切相關的酶[35]，目前已被確立為預測AS發(fā)生的獨立風險因子。

Lp-PLA2和sPLA2都能水解脂蛋白產生脂質介質和修飾脂質顆粒而在心血管疾病中發(fā)揮獨特的作用，但是它們各自的作用和潛在機制是明顯不同的。Lp-PLA2能水解PAF和氧化磷脂sn-2位置的酰基。在人類中，這個酶的主要部分結合于血漿LDL和HDL apoB100的C端，但是小鼠由于缺乏與之結合的關鍵性殘基，所以此酶與小鼠LDL無關。最初發(fā)現(xiàn)用PAF-AH預處理的小鼠能阻斷PAF誘導的哮喘，也能使動物避免患敗血癥，因此它能水解有害的PAF從而對機體有保護作用。但是越來越多的研究發(fā)現(xiàn)，Lp-PLA2更是一種促炎因子。Lp-PLA2在LDL氧化過程中由于清除氧化磷脂(oxLDL)產生溶血卵磷脂(LPC)和氧化游離脂肪酸(oxFFA)兩種關鍵的促炎介質[36]，引起單核細胞聚集，內皮功能改變，誘導內皮細胞粘附分子表達，增加血小板源性生長因子和表皮生長因子的表達，泡沫細胞形成，從而促進AS形成。這兩種促炎介質，尤其是LPC作為G蛋白偶聯(lián)受體G2A的調控者，能調節(jié)巨噬細胞和T細胞的遷移、活化嗜中性粒細胞和巨噬細胞、吞噬清除凋亡細胞等，促進動脈斑塊進一步發(fā)展，最后導致脂質壞死核心形成。Lp-PLA2在壞死核心快凋亡巨噬細胞和易損斑塊纖維帽中高度表達，但不包括穩(wěn)定斑塊，因此Lp-PLA2水解物對斑塊穩(wěn)定性起著關鍵性作用。

在AS動物模型的大量研究中發(fā)現(xiàn)豬是一種脂蛋白結構最接近于人類的理想實驗動物[37]。糖尿病和高膽固醇血癥(DM-HC)豬模型中發(fā)現(xiàn)血清和斑塊中Lp-PLA2活性顯著增加，斑塊形成明顯，Lp-PLA2的基因表達量也相應升高，伴隨MCP-1、MMP-9、組織蛋白酶S等炎癥基因的高度表達[38]。劉軍妮等[39]發(fā)現(xiàn)血管有易損斑塊的兔子血清中Lp-PLA2顯著升高，表明Lp-PLA2與斑塊的不穩(wěn)定性相關性好。大鼠給予LPS刺激時，Lp-PLA2在肝臟、肺、胸腺、脾、腎、腹膜巨嗜細胞、Kupffer細胞以及循環(huán)白細胞中亦顯著增加[31]。但是，因為小鼠中Lp-PLA2與LDL無關，所以只能應用轉基因小鼠進行研究。ApoE-/-小鼠經高脂誘導后，Lp-PLA2血漿含量顯著升高[40]。同樣，高脂誘導LDLR-/-小鼠形成AS，小鼠中血清Lp-PLA2活性及IL-6、hs-CRP和PAF等炎癥因子含量顯著升高[41]。現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，Darapladib是Lp-PLA2的一種選擇性有效抑制劑，已進行到III期臨床試驗，它能有效抑制Lp-PLA2的活性和含量，因此對動脈粥樣硬化的預防和治療有積極作用[42]。Hui Zhang等[40]研究發(fā)現(xiàn)慢病毒介導的RNAi不僅能抑制Lp-PLA2活性，還能使動物的斑塊面積更小以及斑塊穩(wěn)定性更高，因此RNAi可能是一種更有效的Lp-PLA2抑制劑。

4 總結

對PLA2的研究已有多年歷史，但其在體內的功能作用還不是很清楚。通過對各相應PLA2基因敲除或轉基因小鼠進行研究，為人們了解哺乳動物PLA2的生理功能提供了新的視角，目前關于PLA2在心血管疾病中的研究已成為熱點問題。在血循環(huán)和動脈壁中的PLA2與AS的形成均有關，是心血管事件的危險因子。sPLA2和Lp-PLA2可作為預測AS發(fā)生的風險因子，cPLA2和iPLA2在AS形成過程中也起著非常重要的作用，因此PLA2在研究心血管疾病中有著廣泛的應用前景。但PLA2調節(jié)血管炎癥及斑塊發(fā)展的確切體內機制均有待進一步探究。未來，將會在基因敲除或轉基因動物中進行更深入的研究以明確PLA2在心血管疾病中的作用，這也有助于開發(fā)以PLA2為靶標的藥物從而有效治療動脈粥樣硬化疾病。

參考文獻：

[1] Schaloske RH, Dennis EA. The phospholipase A2 superfamily and its group numbering system[J].Biochim Biophys Acta， 2006,1761(11):1246 -1259.

[2] Shimizu T. Lipid mediators in health and disease: enzymes and receptors as therapeutic targets for the regulation of immunity and inflammation[J].Annu Rev Pharmacol Toxicol,2009,49:123-150.

[3] Triggiani M, Granata F, Giannattasio G, et al. Secretory phospholipases A2 in inflammatory and allergic diseases: not just enzymes[J]. J Allergy Clin Immunol, 2005, 116(5):1000-1006.

[4] Diaz BL, Arm JP. Phospholipase A2 [J]. Prostaglandins Leukot Essential Fatty Acids, 2003, 69(2-3): 87-97.

[5] Balsinde J, Balboa MA. Cellular regulation and proposed biological functions of group VIA calcium-independent phospholipase A2 in activated cells[J]. Cell Signal, 2005, 17(9): 1052-1062.

[6] Brown WJ, Chambers K, Doody A. Phospholipase A2 (PLA2) enzymes in membrane trafficking: mediators of membrane shape and function[J]. Traffic, 2003, 4(4): 214-221.

[7] Hirabayashi T, Murayama T, Shimizu T. Diversity of phospholipase A2 enzymes[J]. Biol Pharm Bull, 2004, 27(8): 1168-1173.

[8] Boyanovsky BB, Webb NR. Biology of secretory phospholipase A2[J].Cardiovasc Drugs Ther, 2009, 23(1): 61-72.

[9] Lambeau G, Gelb MH. Biochemistry and physiology of mammalian secreted phospholipases A2[J].Annu Rev Biochem[J]. 2008, 77: 495-520.

[10] 張良, 韓丹, 趙詩萌, 等. OX-LDL 與單核巨噬細胞相互作用促進動脈粥樣硬化形成[J]. 中國比較醫(yī)學雜志, 2013, 23(4): 31-36.

[11] Rosenson RS, Hislop C, McConnell D, et al. Effects of 1-H-indole-3-glyoxamide (A-002) on concentration of secretory phospholipase A2 (PLASMA study): a phase II double-blind, randomised, placebo-controlled trial[J]. Lancet,2009,373(9664):649-658.

[12] Rosenson RS. Future role for selective phospholipase A2 inhibitors in the prevention of atherosclerotic cardiovascular disease[J].Cardiovasc Drugs Ther, 2009, 23(1):93-101.

[13] Wei HL, Chang QS, Qiang X, et al. Simvastatin inhibits sPLA2 IIa expression in aorta and myocardium[J]. Arch Med Res, 2009, 40(2): 67-72.

[14] Niessen HW, Krijnen PA, Visser CA, et al. Type II secretory phospholipase A2 in cardiovascular disease: a mediator in atherosclerosis and ischemic damage to cardiomyocytes?[J]. Cardiovasc Res, 2003, 60(1): 68-77.

[15] Romano M, Romano E, Bj?rkerud S, et al. Ultrastructural localization of secretory type II phospholipase A2 in atherosclerotic and nonatherosclerotic regions of human arteries[J]. Arterioscler Thromb Vasc Biol, 1998, 18(4): 519-525.

[16] Webb NR, Bostrom MA, Szilvassy SJ, et al. Macrophage-expressed group IIA secretory phospholipase A2 increases atherosclerotic lesion formation in LDL receptor-deficient mice[J]. Arterioscler Thromb Vasc Biol, 2003, 23(2): 263-268.

[17] Tietge UJ, Pratico D, Ding T, et al. Macrophage-specific expression of group IIA sPLA2 results in accelerated atherogenesis by increasing oxidative stress[J]. J Lipid Res, 2005, 46(8): 1604-1614.

[18] Ghesquiere SA, Gijbels MJ, Anthonsen M, et al. Macrophage-specific overexpression of group IIa sPLA2 increases atherosclerosis and enhances collagen deposition[J]. J Lipid Res, 2005, 46(2): 201-210.

[19] Boilard E, Lai Y, Larabee K, et al. A novel anti-inflammatory role for secretory phospholipase A2 in immune complex-mediated arthritis[J]. EMBO Mol Med, 2010,2(5):172-187.

[20] Boyanovsky BB, Li X, Shridas P, et al. Bioactive products generated by group V sPLA(2) hydrolysis of LDL activate macrophages to secrete pro-inflammatory cytokines[J]. Cytokine, 2010, 50(1): 50-57.

[21] Bostrom MA, Boyanovsky BB, Jordan CT, et al. Group V secretory phospholipase A2 promotes atherosclerosis:evidence from genetically altered mice[J]. Arterioscler Thromb Vasc Biol, 2007, 27(3): 600-606.

[22] Boyanovsky B, Zack M, Forrest K, et al. The capacity of group V sPLA2 to increase atherogenicity of ApoE-/-and LDLR-/-mouse LDL in vitro predicts its atherogenic role in vivo[J]. ArteriosclerThrombVascBiol, 2009, 29(4): 532-538.

[23] Zack M, Boyanovsky BB, Shridas P, et al. Group X secretory phospholipase A2 augments angiotensin II-induced inflammatory responses and abdominal aortic aneurysm formation in apoE-deficient mice[J]. Atherosclerosis, 2011, 214(1): 58-64.

[24] Fujioka D, Saito Y, Kobayashi T, et al.Reduction in myocardial ischemia/reperfusion injury in group X secretory phospholipase A2-deficient mice[J].Circulation, 2008,117(23):2977-2985.

[25] Sato H, Kato R, Isogai Y, et al. Analyses of group III secreted phospholipase A2 transgenic mice reveal potential participation of this enzyme in plasma lipoprotein modification, macrophage foam cell formation, and atherosclerosis[J]. J Biol Chem, 2008, 283(48): 33483-33497.

[26] Hui DY. Phospholipase A2 enzymes in metabolic and cardiovascular diseases[J]. Curr OpinLi pidol, 2012, 23(3):235-240.

[27] Dutour A, Achard V, Sell H, et al. Secretory type II phospholipase A2 is produced and secreted by epicardial adipose tissue and overexpressed in patients with coronary artery disease[J]. J Clin Endocrinol Metab, 2010, 95(2): 963-967.

[28] 韓俊愈, 李衛(wèi)華. 胞漿型磷脂酶A2與冠心病的相關性研究進展[J]. 心血管病學進展, 2008, 5: 037.

[29] Wong DA, Kita Y, Uozumi N, et al. Discrete role for cytosolic phospholipase A2α in platelets studies using single and double mutant mice of cytosolic and group IIA secretory phospholipase A2[J]. J Exp Med, 2002, 196(3): 349-357.

[30] Ii H, Yokoyama N, Yoshida S, et al. Alleviation of high-fat diet-induced fatty liver damage in group IVA phospholipase A2-knockout mice[J]. Plos ONE, 2009, 4(12): e8089.

[31] Murakami M, Taketomi Y, Miki Y, et al. Recent progress in phospholipase A2 research: from cells to animals to humans[J]. Prog Lipid Res, 2011, 50(2): 152-192.

[32] Liu S, Xie Z, Zhao Q,et al. Smooth muscle-specific expression of calcium-independent phospholipase A2β (iPLA2β) participates in the initiation and early progression of vascular inflammation and neointima formation[J]. J Biol Chem,2012, 287(29):24739-24753.

[33] Calderon LE, Liu S, Su W, et al. iPLA2β overexpression in smooth muscle exacerbates angiotensin II-induced hypertension and vascular remodeling[J]. PLos ONE, 2012,7(2):e31850.

[34] Ramanadham S, Yarasheski KE, Silva MJ, et al. Age-related changes in bone morphology are accelerated in group VIA phospholipase A2 (iPLA2β)-null mice[J]. Am J Pathol, 2008, 172(4):868-881.

[35] Cai A, Zheng D, Qiu R, et al. Lipoprotein-associated phospholipase A2(Lp-PLA2): A novel and promising biomarker for cardiovascular risks assessment[J].Dis Markers,2013, 34(5):323-331.

[36] Steen DL, O'Donoghue ML. Lp-PLA2 inhibitors for the reduction of cardiovascular events[J]. Cardiol Ther, 2013, 2(2): 125-134.

[37] 陳華. 小型豬動脈粥樣硬化模型[J]. 中國實驗動物學報, 2008, 16(5):376-380.

[38] Wilensky RL, Shi Y, Mohler ER, et al.Inhibition of lipoprotein-associated phospholipase A2 reduces complex coronary atherosclerotic plaque development[J]. Nat Med, 2008, 14(10):1059-1066.

[39] 劉軍妮, 徐冬玲, 杜貽萌, 等. 脂蛋白相關磷脂酶 A2 與兔易損斑塊的相關性研究[J]. 中國病理生理雜志, 2010, 26(4): 669-675.

[40] Zhang H, Zhang JY, Sun TW, et al.Amelioration of atherosclerosis in apolipoprotein E-decient mice by inhibition of lipoprotein-associated phospholipase A2[J]. Clin Invest Med, 2013, 36(1):E32-E41.

[41] Hu MM, Zhang J, Wang WY, et al. The inhibition of lipoprotein-associated phospholipase A2 exerts beneficial effects against atherosclerosis in LDLR-deficient mice[J]. ActaPharmacol Sin, 2011, 32(10):1253-1258.

[42] Abhijit R, Punit KS.Phospholipase A2 in airway diseases: target for drug discovery[J]. J Drug Disc Ther, 2013,1(8):28-40.