吳霞

[摘要] 目的 探討黃芪多糖對(duì)糖尿病足部潰瘍成纖維細(xì)胞增殖功能的影響。方法 選擇糖尿病足部潰瘍患者15例，取患者創(chuàng)面邊緣全厚皮片，分離、培養(yǎng)、傳代成纖維細(xì)胞。比較不同濃度黃芪多糖對(duì)成纖維細(xì)胞增殖功能的影響。 結(jié)果 各組間吸光度A值比較差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=21.357，P＜0.01），其中100μg/mL組和500μg/mL組顯著高于對(duì)照組，而500μg/mL組又顯著高于100μg/mL組（t=3.926、7.254、4.359，P均＜0.01）。結(jié)論 黃芪多糖能夠促進(jìn)糖尿病足部潰瘍成纖維細(xì)胞的增殖，并且隨著濃度的增加，促進(jìn)作用越強(qiáng)。

[關(guān)鍵詞] 黃芪多糖；糖尿?。粷?；成纖維細(xì)胞

[中圖分類號(hào)] R587.2[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B[文章編號(hào)] 1673-9701（2014）15-0124-03

Effect of astragalus polysaccharide on proliferation of fibroblast at diabetic foot ulceration

WU Xia

Glycyresis Department，Donggang City TCM Hospital in Liaoning Province，Donggang 118300，China

[Abstract] Objective To discuss effect of astragalus polysaccharide on proliferation of fibroblast at diabetic foot ulceration. Methods Fifteen cases with diabetic foot ulceration were selected. Full thick skin graft at edge of ulcer were cut to separate， foster and passage fibroblast. Effects of different concentration of astragalus polysaccharide on proliferation of fibroblast were compared. Results Absorbance of four groups had significant difference（F=21.357，P＜0.01）. Absorbancea of group of 100μg/mL and group of 500μg/mL were higher than control group， and that of group of 500μg/mL was higher than group of 100μg/mL（t=3.926，7.254，4.359，P all ＜0.01）. Conclusion Astragalus polysaccharide can improve roliferation of fibroblast at diabetic foot ulceration， and the effect increase with concentration of astragalus polysaccharide increasing.

[Key words] Astragalus polysaccharide； Diabetic； Ulceration； Fibroblast糖尿病足主要指初期的糖尿病患者在沒(méi)有出現(xiàn)周圍神經(jīng)病變和周圍血管病變前已經(jīng)出現(xiàn)足部感染、化膿、潰爛等癥狀。黃芪注射液主要用于治療病毒性心肌炎、心功能不全、免疫功能下降的慢性肝炎等，也可用于治療白細(xì)胞減少癥和血小板減少性紫癜以及慢性腎炎、腎病綜合征、糖尿病腎病等[1]。研究顯示，其外敷用于治療糖尿病足潰瘍時(shí)能促進(jìn)潰瘍的愈合，減少截肢率。但是具體的機(jī)制還不十分明確。本研究主要研究黃芪多糖對(duì)糖尿病足部潰瘍成纖維細(xì)胞增殖功能的影響?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選擇2013年3~6月在我院治療的糖尿病足部潰瘍患者20例，糖尿病病程（6.1±2.0）年。入院時(shí)空腹血糖（12.6±2.5）mmol/L，餐后2h血糖（16.8±4.2）mmol/L，糖化血紅蛋白（9.9±0.8）%。

1.2標(biāo)本采集

取瘡口邊緣全厚皮片，大小為1.0 cm×1.0 cm，在含100 U/mL青霉素和100μg/mL鏈霉素的PBS液中漂洗，去除脂肪組織，剪成碎塊，大小為0.5 cm×0.5 cm，使用0.25%醋酸氯己啶消毒，PBS液沖洗，消化液消化，分離真皮表皮，去除表皮。真皮培養(yǎng)液中消化、過(guò)濾、離心、棄上清。加入培養(yǎng)液中，離心，棄去上清，重復(fù)3次。調(diào)整細(xì)胞濃度，檢查細(xì)胞活力。按照1×106/mL接種到含胎牛血清、青霉素、鏈霉素的培養(yǎng)液中，37℃，5%CO2飽和濕度下培養(yǎng)。細(xì)胞進(jìn)行傳代，取4~6代細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

1.3實(shí)驗(yàn)方法

將對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞進(jìn)行消化、離心，制成懸液，接種在96孔板中，沒(méi)開(kāi)孔0.5×104個(gè)，37℃，5%CO2，恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，加入含有不同濃度黃芪多糖的培養(yǎng)液，每個(gè)濃度4個(gè)復(fù)孔，濃度分別為20μg/mL、100μg/mL和500μg/mL，培養(yǎng)24h。另選1組僅加入含血清的培養(yǎng)液作為對(duì)照組。采用MTT方法觀察成纖維細(xì)胞的生長(zhǎng)情況，在570nm下測(cè)吸光度A值。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS15.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，不同濃度采用方差分析，組間采用t檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

對(duì)照組吸光度值為（0.412±0.021），20μg/mL組為（0.418±0.025），100μg/mL組為（0.462±0.014），500μg/mL組主要為（0.510±0.017）。各組比較差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=21.357，P＜0.01），其中100μg/mL組和500μg/mL組顯著高于對(duì)照組，而500μg/mL組又顯著高于100μg/mL組（t=3.926、7.254、4.359，P均＜0.01）。見(jiàn)圖1。

圖1 各組570nm吸光度A值

3討論

糖尿病足部潰瘍主要指初期糖尿患者，沒(méi)有出現(xiàn)周圍神經(jīng)病變和周圍血管病變，卻已出現(xiàn)足部感染、化膿、潰爛等癥狀。主要病因有神經(jīng)病病變、血管病變、循環(huán)障礙、免疫障礙、皮膚中促進(jìn)皮膚生長(zhǎng)的胰島素生長(zhǎng)因子-1（IGF-1）減少等，其中主要是神經(jīng)和血管病變?cè)诎l(fā)生發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮重要作用。足潰瘍程度與患者的糖尿病患者全身神經(jīng)病變、缺血性病變程度和經(jīng)濟(jì)收入密切相關(guān)。糖尿病足反映糖尿病造成足部神經(jīng)、大血管的病變，并導(dǎo)致局部組織的破潰、感染、骨髓炎、壞死等，局部治療通常非常困難，很多患者最后需要進(jìn)行截肢或截趾，足部感染擴(kuò)散導(dǎo)致全身膿毒癥甚至危及生命。糖尿病足治療困難，難以愈合。成纖維細(xì)胞（fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞（mesenchymal cell）分化而來(lái)。對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損以及骨創(chuàng)傷的修復(fù)有十分重要的作用。在傷口愈合中，成纖維細(xì)胞主要來(lái)源于真皮乳頭層的局部成纖維細(xì)胞和未分化的間充質(zhì)細(xì)胞以及血管周圍的成纖維細(xì)胞和周細(xì)胞。在創(chuàng)傷修復(fù)的后期，成纖維細(xì)胞通過(guò)分泌膠原酶參與修復(fù)后組織的改建。在某些病理?xiàng)l件下，以成纖維細(xì)胞為主要細(xì)胞成分的肉芽組織或增生組織塊還可以在非骨組織內(nèi)發(fā)生鈣化，引起異位骨化（ectopic ossification）。

endprint

黃芪的藥用迄今已有2000多年的歷史，其有增強(qiáng)機(jī)體免疫功能、保肝、利尿、抗衰老、抗應(yīng)激、降壓和較廣泛的抗菌作用。黃芪多糖是豆科植物蒙古黃芪或膜莢黃芪的干燥根經(jīng)提取、濃縮、純化而成的水溶性雜多糖。作為免疫促進(jìn)劑或調(diào)節(jié)劑，同時(shí)具有抗病毒、抗腫瘤、抗衰老、抗輻射、抗應(yīng)激、抗氧化等作用[2，3]。黃芪多糖（APS）可顯著增強(qiáng)非特異性免疫功能和體液免疫功能，黃芪皂苷能促進(jìn)淋巴結(jié)B細(xì)胞增殖分化和漿細(xì)胞抗體形成。黃芪多糖明顯增強(qiáng)巨噬細(xì)胞吞噬發(fā)光強(qiáng)度并抑制PGE2的釋放，但進(jìn)一步促進(jìn)TNF的釋放。黃芪在體液免疫、增強(qiáng)單核巨噬細(xì)胞的吞噬活性、對(duì)體細(xì)胞和自然殺傷細(xì)胞釋放免疫活性物質(zhì)、誘生干擾素和白細(xì)胞介素等多方面表現(xiàn)出多種生理活性。黃芪能促進(jìn)巨噬細(xì)胞的吞噬功能，能促進(jìn)B細(xì)胞的增殖并且抑制總補(bǔ)體活性，對(duì)白細(xì)胞介素有誘生作用。黃芪多糖是黃芪中免疫活性較強(qiáng)的一類物質(zhì)，它能增強(qiáng)吞噬細(xì)胞的吞噬功能，從脾及胸腺重量、溶血素、血凝素以及脾細(xì)胞總數(shù)及空斑形成細(xì)胞測(cè)定看出，黃芪多糖、紅芪多糖均能對(duì)環(huán)磷酰胺或強(qiáng)的松龍的免疫抑制作用有完全及部分對(duì)抗作用。黃芪多糖可通過(guò)調(diào)節(jié)含量以及促進(jìn)磷脂酰肌醇代謝，進(jìn)而提高創(chuàng)傷后活化T淋巴細(xì)胞內(nèi)IL-2mRNA及IL-2RmRNA的基因轉(zhuǎn)錄表達(dá)，這可能是黃芪多糖糾正創(chuàng)傷后細(xì)胞免疫功能低下的機(jī)制之一。黃芪對(duì)干擾素系統(tǒng)有明顯的刺激作用。黃芪還能促進(jìn)各類血細(xì)胞的生成、發(fā)育及成熟過(guò)程，促進(jìn)骨髓的造血功能[4]。對(duì)體外培養(yǎng)肝細(xì)胞，黃芪能促進(jìn)RNA及蛋白質(zhì)合成，提示其能延長(zhǎng)細(xì)胞壽命，增強(qiáng)細(xì)胞代謝推遲老化。黃芪可促進(jìn)小鼠血清和蛋白質(zhì)更新。

在本次實(shí)驗(yàn)中，當(dāng)黃芪多糖濃度達(dá)到100μg/mL時(shí)，其對(duì)成纖維細(xì)胞的增殖促進(jìn)作用明顯增加，而濃度達(dá)到500μg/mL濃度時(shí)，促進(jìn)作用進(jìn)一步增強(qiáng)，提示黃芪多糖能夠增加潰瘍部位成纖維細(xì)胞的增殖，并且隨著濃度的增加，其增強(qiáng)作用逐漸增加，這可能是黃芪外敷治療糖尿病足部潰瘍患者能夠促進(jìn)潰瘍愈合的機(jī)制之一。張正軍等[5]研究顯示100 μg/mL黃芪多糖可降低MMP-2、MMP-9活性及其蛋白的表達(dá)。肖正華等[6]研究顯示糖尿病足部潰瘍難以治愈的原因與傷口滲出液中IL-1β量過(guò)高、成纖維細(xì)胞增殖能力明顯受抑有關(guān)，黃芪多糖外敷可以降低傷口滲出液中IL-1β濃度，顯著縮短潰瘍GT和HT，降低截肢率。周倩等[7]研究顯示APS在（10～160）μg/mL濃度范圍內(nèi)可促進(jìn)體外培養(yǎng)的糖尿病足潰瘍Fb增殖，增加膠原合成，且呈量效、時(shí)效依賴關(guān)系；過(guò)高濃度（≥640μg/mL）的APS對(duì)Fb增殖、膠原合成產(chǎn)生抑制作用。朱貴明等[8]研究顯示黃芪多糖通過(guò)減慢染色體末端限制性片段（TRF）長(zhǎng)度縮短速度，提高衰老人胚肺二倍體成纖維細(xì)胞活力，發(fā)揮抗衰老作用。李光善等[9]研究顯示黃芪多糖對(duì)實(shí)驗(yàn)性糖尿病大鼠創(chuàng)面成纖維細(xì)胞增殖有促進(jìn)作用，但是聯(lián)合桂皮醛和川芎嗪效果更好。

綜上所述，黃芪多糖能夠促進(jìn)糖尿病足部潰瘍部位成纖維細(xì)胞的增殖，從而促進(jìn)潰瘍愈合，降低截肢風(fēng)險(xiǎn)。本研究局限性主要是納入研究的黃芪多糖濃度較少，沒(méi)有研究分析進(jìn)一步增加濃度會(huì)不會(huì)出現(xiàn)抑制作用，希望在今后的研究中進(jìn)一步完善。

[參考文獻(xiàn)]

[1]季宇彬，汲晨鋒. 黃芪多糖對(duì)腫瘤模型小鼠紅細(xì)胞免疫功能的影響[J]. 現(xiàn)代食品科技，2013，29（9）： 2042-2046，2052.

[2]李承德，周文賓，孫艷，等. 黃芪多糖對(duì)哮喘大鼠Th17／Treg細(xì)胞因子及肺部炎癥的影響[J]. 中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)，2013，29（9）：1275-1278.

[3]任麗宏，王越，姚定國(guó)，等. 黃芪多糖對(duì)2型糖尿病大鼠血清IL-1β、IL-6、IL-18的影響作用[J]. 實(shí)用糖尿病雜志，2013，9（5）： 15-16.

[4]肖彬，徐月，何涵，等. 黃芪多糖對(duì)粒單核系造血細(xì)胞的抗凋亡作用[J]. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志，2013，21（5）：1243-1247.

[5]張正軍，肖正華，陳定宇，等. 黃芪多糖對(duì)糖尿病足潰瘍滲出液成纖維細(xì)胞MMP-2、MMP-9表達(dá)的影響[J]. 中國(guó)糖尿病雜志，2007，15（4）：202-203.

[6]肖正華，周倩，余綺玲，等. 糖尿病足潰瘍滲出液中IL-1β動(dòng)態(tài)變化及黃芪提取液外敷治療[J]. 廣州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2008，36（6）： 11-14.

[7]周倩，王燕，肖正華，等. 黃芪多糖對(duì)糖尿病足潰瘍成纖維細(xì)胞膠原合成的影響[J]. 解剖學(xué)研究，2011，33（2）： 135-137.

[8]朱貴明，江旭東，王迪迪，等. 黃芪多糖對(duì)衰老HDF細(xì)胞染色體末端限制性片段長(zhǎng)度的影響[J]. 中國(guó)老年學(xué)雜志，2012，32（8）： 1635-1637.

[9]李光善，李萍，盛巡，等. 黃芪多糖、桂皮醛、川芎嗪對(duì)實(shí)驗(yàn)性糖尿病大鼠創(chuàng)面成纖維細(xì)胞增殖作用的影響[J]. 中國(guó)中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志，2004，10（4）： 20-22.

（收稿日期：2014-01-03）

endprint

黃芪的藥用迄今已有2000多年的歷史，其有增強(qiáng)機(jī)體免疫功能、保肝、利尿、抗衰老、抗應(yīng)激、降壓和較廣泛的抗菌作用。黃芪多糖是豆科植物蒙古黃芪或膜莢黃芪的干燥根經(jīng)提取、濃縮、純化而成的水溶性雜多糖。作為免疫促進(jìn)劑或調(diào)節(jié)劑，同時(shí)具有抗病毒、抗腫瘤、抗衰老、抗輻射、抗應(yīng)激、抗氧化等作用[2，3]。黃芪多糖（APS）可顯著增強(qiáng)非特異性免疫功能和體液免疫功能，黃芪皂苷能促進(jìn)淋巴結(jié)B細(xì)胞增殖分化和漿細(xì)胞抗體形成。黃芪多糖明顯增強(qiáng)巨噬細(xì)胞吞噬發(fā)光強(qiáng)度并抑制PGE2的釋放，但進(jìn)一步促進(jìn)TNF的釋放。黃芪在體液免疫、增強(qiáng)單核巨噬細(xì)胞的吞噬活性、對(duì)體細(xì)胞和自然殺傷細(xì)胞釋放免疫活性物質(zhì)、誘生干擾素和白細(xì)胞介素等多方面表現(xiàn)出多種生理活性。黃芪能促進(jìn)巨噬細(xì)胞的吞噬功能，能促進(jìn)B細(xì)胞的增殖并且抑制總補(bǔ)體活性，對(duì)白細(xì)胞介素有誘生作用。黃芪多糖是黃芪中免疫活性較強(qiáng)的一類物質(zhì)，它能增強(qiáng)吞噬細(xì)胞的吞噬功能，從脾及胸腺重量、溶血素、血凝素以及脾細(xì)胞總數(shù)及空斑形成細(xì)胞測(cè)定看出，黃芪多糖、紅芪多糖均能對(duì)環(huán)磷酰胺或強(qiáng)的松龍的免疫抑制作用有完全及部分對(duì)抗作用。黃芪多糖可通過(guò)調(diào)節(jié)含量以及促進(jìn)磷脂酰肌醇代謝，進(jìn)而提高創(chuàng)傷后活化T淋巴細(xì)胞內(nèi)IL-2mRNA及IL-2RmRNA的基因轉(zhuǎn)錄表達(dá)，這可能是黃芪多糖糾正創(chuàng)傷后細(xì)胞免疫功能低下的機(jī)制之一。黃芪對(duì)干擾素系統(tǒng)有明顯的刺激作用。黃芪還能促進(jìn)各類血細(xì)胞的生成、發(fā)育及成熟過(guò)程，促進(jìn)骨髓的造血功能[4]。對(duì)體外培養(yǎng)肝細(xì)胞，黃芪能促進(jìn)RNA及蛋白質(zhì)合成，提示其能延長(zhǎng)細(xì)胞壽命，增強(qiáng)細(xì)胞代謝推遲老化。黃芪可促進(jìn)小鼠血清和蛋白質(zhì)更新。

在本次實(shí)驗(yàn)中，當(dāng)黃芪多糖濃度達(dá)到100μg/mL時(shí)，其對(duì)成纖維細(xì)胞的增殖促進(jìn)作用明顯增加，而濃度達(dá)到500μg/mL濃度時(shí)，促進(jìn)作用進(jìn)一步增強(qiáng)，提示黃芪多糖能夠增加潰瘍部位成纖維細(xì)胞的增殖，并且隨著濃度的增加，其增強(qiáng)作用逐漸增加，這可能是黃芪外敷治療糖尿病足部潰瘍患者能夠促進(jìn)潰瘍愈合的機(jī)制之一。張正軍等[5]研究顯示100 μg/mL黃芪多糖可降低MMP-2、MMP-9活性及其蛋白的表達(dá)。肖正華等[6]研究顯示糖尿病足部潰瘍難以治愈的原因與傷口滲出液中IL-1β量過(guò)高、成纖維細(xì)胞增殖能力明顯受抑有關(guān)，黃芪多糖外敷可以降低傷口滲出液中IL-1β濃度，顯著縮短潰瘍GT和HT，降低截肢率。周倩等[7]研究顯示APS在（10～160）μg/mL濃度范圍內(nèi)可促進(jìn)體外培養(yǎng)的糖尿病足潰瘍Fb增殖，增加膠原合成，且呈量效、時(shí)效依賴關(guān)系；過(guò)高濃度（≥640μg/mL）的APS對(duì)Fb增殖、膠原合成產(chǎn)生抑制作用。朱貴明等[8]研究顯示黃芪多糖通過(guò)減慢染色體末端限制性片段（TRF）長(zhǎng)度縮短速度，提高衰老人胚肺二倍體成纖維細(xì)胞活力，發(fā)揮抗衰老作用。李光善等[9]研究顯示黃芪多糖對(duì)實(shí)驗(yàn)性糖尿病大鼠創(chuàng)面成纖維細(xì)胞增殖有促進(jìn)作用，但是聯(lián)合桂皮醛和川芎嗪效果更好。

綜上所述，黃芪多糖能夠促進(jìn)糖尿病足部潰瘍部位成纖維細(xì)胞的增殖，從而促進(jìn)潰瘍愈合，降低截肢風(fēng)險(xiǎn)。本研究局限性主要是納入研究的黃芪多糖濃度較少，沒(méi)有研究分析進(jìn)一步增加濃度會(huì)不會(huì)出現(xiàn)抑制作用，希望在今后的研究中進(jìn)一步完善。

[參考文獻(xiàn)]

[1]季宇彬，汲晨鋒. 黃芪多糖對(duì)腫瘤模型小鼠紅細(xì)胞免疫功能的影響[J]. 現(xiàn)代食品科技，2013，29（9）： 2042-2046，2052.

[2]李承德，周文賓，孫艷，等. 黃芪多糖對(duì)哮喘大鼠Th17／Treg細(xì)胞因子及肺部炎癥的影響[J]. 中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)，2013，29（9）：1275-1278.

[3]任麗宏，王越，姚定國(guó)，等. 黃芪多糖對(duì)2型糖尿病大鼠血清IL-1β、IL-6、IL-18的影響作用[J]. 實(shí)用糖尿病雜志，2013，9（5）： 15-16.

[4]肖彬，徐月，何涵，等. 黃芪多糖對(duì)粒單核系造血細(xì)胞的抗凋亡作用[J]. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志，2013，21（5）：1243-1247.

[5]張正軍，肖正華，陳定宇，等. 黃芪多糖對(duì)糖尿病足潰瘍滲出液成纖維細(xì)胞MMP-2、MMP-9表達(dá)的影響[J]. 中國(guó)糖尿病雜志，2007，15（4）：202-203.

[6]肖正華，周倩，余綺玲，等. 糖尿病足潰瘍滲出液中IL-1β動(dòng)態(tài)變化及黃芪提取液外敷治療[J]. 廣州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2008，36（6）： 11-14.

[7]周倩，王燕，肖正華，等. 黃芪多糖對(duì)糖尿病足潰瘍成纖維細(xì)胞膠原合成的影響[J]. 解剖學(xué)研究，2011，33（2）： 135-137.

[8]朱貴明，江旭東，王迪迪，等. 黃芪多糖對(duì)衰老HDF細(xì)胞染色體末端限制性片段長(zhǎng)度的影響[J]. 中國(guó)老年學(xué)雜志，2012，32（8）： 1635-1637.

[9]李光善，李萍，盛巡，等. 黃芪多糖、桂皮醛、川芎嗪對(duì)實(shí)驗(yàn)性糖尿病大鼠創(chuàng)面成纖維細(xì)胞增殖作用的影響[J]. 中國(guó)中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志，2004，10（4）： 20-22.

（收稿日期：2014-01-03）

endprint

黃芪的藥用迄今已有2000多年的歷史，其有增強(qiáng)機(jī)體免疫功能、保肝、利尿、抗衰老、抗應(yīng)激、降壓和較廣泛的抗菌作用。黃芪多糖是豆科植物蒙古黃芪或膜莢黃芪的干燥根經(jīng)提取、濃縮、純化而成的水溶性雜多糖。作為免疫促進(jìn)劑或調(diào)節(jié)劑，同時(shí)具有抗病毒、抗腫瘤、抗衰老、抗輻射、抗應(yīng)激、抗氧化等作用[2，3]。黃芪多糖（APS）可顯著增強(qiáng)非特異性免疫功能和體液免疫功能，黃芪皂苷能促進(jìn)淋巴結(jié)B細(xì)胞增殖分化和漿細(xì)胞抗體形成。黃芪多糖明顯增強(qiáng)巨噬細(xì)胞吞噬發(fā)光強(qiáng)度并抑制PGE2的釋放，但進(jìn)一步促進(jìn)TNF的釋放。黃芪在體液免疫、增強(qiáng)單核巨噬細(xì)胞的吞噬活性、對(duì)體細(xì)胞和自然殺傷細(xì)胞釋放免疫活性物質(zhì)、誘生干擾素和白細(xì)胞介素等多方面表現(xiàn)出多種生理活性。黃芪能促進(jìn)巨噬細(xì)胞的吞噬功能，能促進(jìn)B細(xì)胞的增殖并且抑制總補(bǔ)體活性，對(duì)白細(xì)胞介素有誘生作用。黃芪多糖是黃芪中免疫活性較強(qiáng)的一類物質(zhì)，它能增強(qiáng)吞噬細(xì)胞的吞噬功能，從脾及胸腺重量、溶血素、血凝素以及脾細(xì)胞總數(shù)及空斑形成細(xì)胞測(cè)定看出，黃芪多糖、紅芪多糖均能對(duì)環(huán)磷酰胺或強(qiáng)的松龍的免疫抑制作用有完全及部分對(duì)抗作用。黃芪多糖可通過(guò)調(diào)節(jié)含量以及促進(jìn)磷脂酰肌醇代謝，進(jìn)而提高創(chuàng)傷后活化T淋巴細(xì)胞內(nèi)IL-2mRNA及IL-2RmRNA的基因轉(zhuǎn)錄表達(dá)，這可能是黃芪多糖糾正創(chuàng)傷后細(xì)胞免疫功能低下的機(jī)制之一。黃芪對(duì)干擾素系統(tǒng)有明顯的刺激作用。黃芪還能促進(jìn)各類血細(xì)胞的生成、發(fā)育及成熟過(guò)程，促進(jìn)骨髓的造血功能[4]。對(duì)體外培養(yǎng)肝細(xì)胞，黃芪能促進(jìn)RNA及蛋白質(zhì)合成，提示其能延長(zhǎng)細(xì)胞壽命，增強(qiáng)細(xì)胞代謝推遲老化。黃芪可促進(jìn)小鼠血清和蛋白質(zhì)更新。

在本次實(shí)驗(yàn)中，當(dāng)黃芪多糖濃度達(dá)到100μg/mL時(shí)，其對(duì)成纖維細(xì)胞的增殖促進(jìn)作用明顯增加，而濃度達(dá)到500μg/mL濃度時(shí)，促進(jìn)作用進(jìn)一步增強(qiáng)，提示黃芪多糖能夠增加潰瘍部位成纖維細(xì)胞的增殖，并且隨著濃度的增加，其增強(qiáng)作用逐漸增加，這可能是黃芪外敷治療糖尿病足部潰瘍患者能夠促進(jìn)潰瘍愈合的機(jī)制之一。張正軍等[5]研究顯示100 μg/mL黃芪多糖可降低MMP-2、MMP-9活性及其蛋白的表達(dá)。肖正華等[6]研究顯示糖尿病足部潰瘍難以治愈的原因與傷口滲出液中IL-1β量過(guò)高、成纖維細(xì)胞增殖能力明顯受抑有關(guān)，黃芪多糖外敷可以降低傷口滲出液中IL-1β濃度，顯著縮短潰瘍GT和HT，降低截肢率。周倩等[7]研究顯示APS在（10～160）μg/mL濃度范圍內(nèi)可促進(jìn)體外培養(yǎng)的糖尿病足潰瘍Fb增殖，增加膠原合成，且呈量效、時(shí)效依賴關(guān)系；過(guò)高濃度（≥640μg/mL）的APS對(duì)Fb增殖、膠原合成產(chǎn)生抑制作用。朱貴明等[8]研究顯示黃芪多糖通過(guò)減慢染色體末端限制性片段（TRF）長(zhǎng)度縮短速度，提高衰老人胚肺二倍體成纖維細(xì)胞活力，發(fā)揮抗衰老作用。李光善等[9]研究顯示黃芪多糖對(duì)實(shí)驗(yàn)性糖尿病大鼠創(chuàng)面成纖維細(xì)胞增殖有促進(jìn)作用，但是聯(lián)合桂皮醛和川芎嗪效果更好。

綜上所述，黃芪多糖能夠促進(jìn)糖尿病足部潰瘍部位成纖維細(xì)胞的增殖，從而促進(jìn)潰瘍愈合，降低截肢風(fēng)險(xiǎn)。本研究局限性主要是納入研究的黃芪多糖濃度較少，沒(méi)有研究分析進(jìn)一步增加濃度會(huì)不會(huì)出現(xiàn)抑制作用，希望在今后的研究中進(jìn)一步完善。

[參考文獻(xiàn)]

[1]季宇彬，汲晨鋒. 黃芪多糖對(duì)腫瘤模型小鼠紅細(xì)胞免疫功能的影響[J]. 現(xiàn)代食品科技，2013，29（9）： 2042-2046，2052.

[2]李承德，周文賓，孫艷，等. 黃芪多糖對(duì)哮喘大鼠Th17／Treg細(xì)胞因子及肺部炎癥的影響[J]. 中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)，2013，29（9）：1275-1278.

[3]任麗宏，王越，姚定國(guó)，等. 黃芪多糖對(duì)2型糖尿病大鼠血清IL-1β、IL-6、IL-18的影響作用[J]. 實(shí)用糖尿病雜志，2013，9（5）： 15-16.

[4]肖彬，徐月，何涵，等. 黃芪多糖對(duì)粒單核系造血細(xì)胞的抗凋亡作用[J]. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志，2013，21（5）：1243-1247.

[5]張正軍，肖正華，陳定宇，等. 黃芪多糖對(duì)糖尿病足潰瘍滲出液成纖維細(xì)胞MMP-2、MMP-9表達(dá)的影響[J]. 中國(guó)糖尿病雜志，2007，15（4）：202-203.

[6]肖正華，周倩，余綺玲，等. 糖尿病足潰瘍滲出液中IL-1β動(dòng)態(tài)變化及黃芪提取液外敷治療[J]. 廣州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2008，36（6）： 11-14.

[7]周倩，王燕，肖正華，等. 黃芪多糖對(duì)糖尿病足潰瘍成纖維細(xì)胞膠原合成的影響[J]. 解剖學(xué)研究，2011，33（2）： 135-137.

[8]朱貴明，江旭東，王迪迪，等. 黃芪多糖對(duì)衰老HDF細(xì)胞染色體末端限制性片段長(zhǎng)度的影響[J]. 中國(guó)老年學(xué)雜志，2012，32（8）： 1635-1637.

[9]李光善，李萍，盛巡，等. 黃芪多糖、桂皮醛、川芎嗪對(duì)實(shí)驗(yàn)性糖尿病大鼠創(chuàng)面成纖維細(xì)胞增殖作用的影響[J]. 中國(guó)中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志，2004，10（4）： 20-22.

（收稿日期：2014-01-03）

endprint