張鳳榮，程玲瑗

(甘肅省天水市第一人民醫(yī)院，天水 741000)

子宮肌瘤是女性生殖系統(tǒng)中最常見的一種良性腫瘤，子宮切除是最常見的治療方案。近年來，子宮肌瘤的發(fā)病率不斷增高，但其發(fā)病原因和機(jī)制仍然不明確。有學(xué)者認(rèn)為雌激素誘發(fā)并促進(jìn)子宮肌瘤生長，而孕激素可能是通過增加生長因子或受體來促進(jìn)肌瘤的生長，因此生長因子在肌瘤中的表達(dá)是目前研究的熱點(diǎn)。子宮肌瘤是本地區(qū)高發(fā)疾病，本文通過觀察雌激素受體(estrogen receptor, ER)、孕激素受體(progesterone receptor, PR)、血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)及Wilms瘤基因(Wilm’s tumor-suppressor gene, WT-1)在子宮肌瘤中的表達(dá)情況，探討本地區(qū)子宮肌瘤的發(fā)病機(jī)制和治療措施。

1 資料與方法

1.1 研究對象 2012年1月至2013年8月于我院手術(shù)切除、病理診斷明確的子宮肌瘤病例686例，排除合并腺肌癥、子宮內(nèi)膜癌、腺瘤樣瘤、卵巢腫瘤、宮頸癌及合并妊娠切除子宮者后，隨機(jī)選擇75例手術(shù)前至少3月內(nèi)沒有經(jīng)過任何激素治療的單純子宮肌瘤切除者的病理組織作為病例組，并隨機(jī)選擇其中25例子宮肌層組織作為對照組，各切片4張，做ER、PR、VEGF及WT-1標(biāo)記并比較。

1.2 試劑及方法 所有標(biāo)本均采用4%的甲醛固定，石蠟包埋、H-E染色。免疫組化采用SP法，切片厚4 μm，各切片4張，高溫修復(fù)或酶消化，一抗4℃過夜，以PBS緩沖液代替第一抗體作陰性對照，已知的陽性組織作陽性對照。免疫組化試劑ER、PR、VEGF、WT-1及SP試劑盒購自邁新公司，操作按試劑盒上的要求進(jìn)行。

1.3 結(jié)果判讀 ER、PR及WT-1陽性表達(dá)定位在細(xì)胞核，VEGF定位在細(xì)胞質(zhì)，以看到棕黃色顆粒分布為陽性，分級方法為:① 選染色均勻有表達(dá)的區(qū)域，陽性細(xì)胞占視野的多少分級。0：<5%;1級：6%～25%;2級：26%～50%;3級：>50%。②按著色強(qiáng)弱分。0：陰性;1：弱，淡黃色;2：中等，黃色;3：強(qiáng)，棕褐色。①、②相加為判讀結(jié)果：0～2為(-)，3～4為(+)，5～6為(++)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 所有數(shù)據(jù)均采用SPSS 18.0軟件進(jìn)行處理，等級資料采用秩和檢驗(yàn)進(jìn)行分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 子宮肌瘤患者在不同年齡段的分布和并發(fā)癥情況 子宮肌瘤患者686例，<40歲患者113例，占16.47%，40～49歲患者454例，占66.18%，圍絕經(jīng)期及絕經(jīng)后(>50歲)患者119例，占17.35%。因子宮內(nèi)膜癌、腺肌病、宮頸癌、卵巢腫瘤等切除者196例，占28.57%，其中宮頸癌25例，合并子宮內(nèi)膜癌15例，合并腺肌病65例，合并腺瘤樣瘤10例，合并妊娠52例，合并卵巢腫瘤28例，合并侵襲性葡萄胎1例；單純子宮肌瘤切除者490例，占71.43%。

2.2 ER、PR、VEGF及WT-1在子宮肌瘤組織中的表達(dá)情況 ER、PR、VEGF、WT-1在病例組和對照組中的表達(dá)比較見表1，兩組各指標(biāo)比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)。

3 討 論

子宮肌瘤是女性生殖道最常見的良性腫瘤，多見于30～50歲婦女，其中40～50歲婦女的發(fā)病率高達(dá)51.2%～60.0%[1]。美國的一項(xiàng)資料顯示：77%的子宮切除的標(biāo)本中發(fā)現(xiàn)有子宮肌瘤[2]。本組資料中，子宮肌瘤以40～49歲占比最高，占66.18%。目前子宮肌瘤的病因和發(fā)病機(jī)制仍不確切，依據(jù)其多見于育齡期婦女，妊娠期增大，分娩或絕經(jīng)后肌瘤停止發(fā)育甚至萎縮、消失，可推斷子宮肌瘤具有激素依賴性。有資料顯示，雌、孕激素水平在肌瘤組織中的表達(dá)高于正常肌層組織，說明二者在肌瘤的發(fā)生、發(fā)展中起促進(jìn)作用[3]，本組資料亦顯示ER、PR在肌瘤中高表達(dá)，明顯高于周圍肌層組織，尤其是孕激素陽性強(qiáng)度更明顯，這與文獻(xiàn)報(bào)道相一致。

表1 ER及PR在子宮肌瘤中的表達(dá)情況

研究發(fā)現(xiàn)，雌、孕激素促進(jìn)肌瘤生長可能是通過生長因子介導(dǎo)，生長因子通過與細(xì)胞膜上相應(yīng)的受體結(jié)合，發(fā)揮其促進(jìn)有絲分裂及生長的作用[4]。在子宮肌層、子宮內(nèi)膜、肌瘤中均可鑒定出VEGF的存在[5]，VEGF主要作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞，促進(jìn)內(nèi)皮增殖、遷移、誘導(dǎo)新生血管的形成，并可顯著水解基底膜，增加微血管的通透性，有支持血管內(nèi)皮細(xì)胞生長的作用，而雌激素能增加血管的通透性，孕激素可以通過促進(jìn)血管生成，達(dá)到促進(jìn)肌瘤生長的目的。本組資料顯示，VEGF在部分肌瘤中陽性表達(dá)，說明其具有促進(jìn)肌瘤生長作用，與對照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與文獻(xiàn)報(bào)道[6]一致。

胰島素樣生長因子2(IGF-2)、胰島素樣生長因子1受體(IGF-1受體)、表皮生長因子(EGF)、轉(zhuǎn)化生長因子β(TGF-β)、Bcl-2和c-myc等基因，在子宮平滑肌瘤的發(fā)生中，通過抑制細(xì)胞凋亡或通過子宮平滑肌瘤分泌或旁分泌的方式，促進(jìn)子宮平滑肌瘤細(xì)胞增殖和生長[7]。WT-1基因是1990年在腎的Wilm腫瘤中作為抑癌基因被分離克隆，其染色體位于11P13，而且能與IGF-1、TGF-β、EGF、Bcl-2、C-myc等生長調(diào)控因子及其受體結(jié)合，調(diào)節(jié)這些生長因子的轉(zhuǎn)錄的激活和抑制[8]。我們研究發(fā)現(xiàn)：WT-1在子宮肌層和子宮平滑肌瘤中均過表達(dá)，證明子宮肌層和肌瘤中均有WT-1基因的存在，而肌瘤中WT-1的表達(dá)與肌層有一定差異，提示W(wǎng)T-1參與了肌瘤的發(fā)生。資料顯示W(wǎng)T-1能與上述調(diào)控因子及其受體結(jié)合，激活或抑制生長因子的轉(zhuǎn)錄，因此我們推測：子宮局部雌、孕激素水平的增高，導(dǎo)致部分生長因子及其受體含量增加，WT-1基因可能以不同的異構(gòu)體形式與以上調(diào)控因子結(jié)合，激活了其轉(zhuǎn)錄作用，導(dǎo)致子宮平滑肌瘤的發(fā)生、發(fā)展。WT-1可以與多種生長因子結(jié)合，而其在女性的胃壁和腸壁的平滑肌組織中均呈陰性，在正常子宮肌壁內(nèi)高表達(dá)，提示W(wǎng)T-1過度表達(dá)可能與雌、孕激素水平有關(guān)。因此，選擇使用激素拮抗劑，不僅可以有效控制肌瘤的生長，而且可以通過降低或抑制WT-1的表達(dá)，抑制上述生長因子，阻止肌瘤生長，甚至使其萎縮、消失；或通過選擇干預(yù)位點(diǎn)，進(jìn)行靶點(diǎn)治療，達(dá)到治療子宮平滑肌瘤的目的，為平滑肌瘤的藥物治療提供了理論依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

[1]回允中, 主譯. 婦產(chǎn)科診斷病理學(xué)[M]. 北京:北京大學(xué)醫(yī)學(xué)出版社,2007:623-625.

[2]曹澤毅, 主編. 中華婦產(chǎn)科學(xué)[M]. 北京:人民衛(wèi)生出版社,2000:1804.

[3]李衛(wèi)東. 孕激素對子宮平滑肌瘤生長的影響[J]. 實(shí)用醫(yī)技雜志,2007,14(20):2744-2745.

[4]李衛(wèi)平, 嚴(yán)雋鴻, 林其德, 等. 米非司酮對子宮肌瘤組織中雌孕激素受體和表皮生長因子受體的影響[J]. 中國實(shí)用婦科及產(chǎn)科雜志,2002,18(1):4-6.

[5]Anderson J. Growth factors and cytokines in uterine leiomyomas[J].SeminReprodEndocrinnol, 1996, 3(14):269.

[6]文華清, 鄧?yán)^紅, 普 蘋, 等. 血管內(nèi)皮生長因子、微血管密度在子宮平滑肌瘤中的表達(dá)及其意義[J]. 臨床腫瘤學(xué)雜志, 2007,121(11):839-842.

[7]紀(jì) 巍, 辛?xí)匝? 陳必良. IGF-1及其受體在子宮平滑肌瘤中的表達(dá)以及與雌、孕激素關(guān)系[J]. 臨床軍醫(yī)雜志,2009,37(6):1062-1064.

[8]Call K M, Glaser T, Ito C Y,etal. Isolation and characterization of zine finger polypeptide gene at the human chromosome 11 wilms’ tumor locus[J].Cell, 1990, 60(3): 509-520.