徐衛(wèi)珍

臨床標(biāo)本的微生物檢驗(yàn)方式研究

徐衛(wèi)珍

目的 對(duì)臨床標(biāo)本的微生物檢驗(yàn)方式進(jìn)行總結(jié)分析。方法 以靖州縣人民醫(yī)院在2013年搜集的180株臨床分離標(biāo)本為例，其均為酵母樣真菌，采用Rosco擴(kuò)散法對(duì)其耐藥性實(shí)施檢測(cè)。結(jié)果 其中在以上各酵母樣真菌檢測(cè)其陽(yáng)性率中，最高的為白色念珠菌為42.78%，其耐藥性最高的為克霉唑。結(jié)論 在臨床標(biāo)本微生物檢驗(yàn)中，其所采用的方法均為標(biāo)本分離、菌種檢定以及最后的藥敏試驗(yàn)。

微生物；臨床標(biāo)本；檢驗(yàn)方式

一般對(duì)臨床標(biāo)本的微生物檢驗(yàn)方法程序即標(biāo)本分離,菌種鑒定,藥敏試驗(yàn)。特采取酵母樣真菌來進(jìn)行微生物的檢驗(yàn)方法。近來年在臨床和院內(nèi)感染一般廣泛使用廣譜抗生素,皮質(zhì)類固醇激素,免疫劑等藥物[1],而酵母樣真菌對(duì)臨床危重患者感染概率明顯上升,抗真菌藥物治療的準(zhǔn)確和有效已經(jīng)顯得尤為重要。所以本文抽取了2013年臨床分離的180株真菌采用Rosco紙片法來進(jìn)行試驗(yàn),現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇靖州縣人民醫(yī)院2013年臨床分離標(biāo)本180株,送檢標(biāo)本中有著住院患者的不同檢測(cè)標(biāo)本。如,糞便,痰,血液等。患者都是以慢性感染疾病為主。

1.2 方法 在沙保弱瓊脂培養(yǎng)基將細(xì)菌分離,用API20 CAUX鑒定到種[2]。藥敏測(cè)試采用6種株菌：兩性霉素B、氟康唑、伊曲康唑、酮康唑、制霉菌素和克霉唑都來自丹麥Rosco公司。采用Rosco紙片法,在生理鹽水中放入單個(gè)菌落,將菌懸液調(diào)整到0.5左右,在改良的Shadomy平板上將菌懸液涂抹均與,等平板上的水分都曬干后,再將Rosco藥敏紙片貼上,這時(shí)不要將平板翻轉(zhuǎn),直接把Rosco的藥敏紙片放入35°培養(yǎng)箱孵育18～20h。

1.3 鑒定標(biāo)準(zhǔn) 藥敏標(biāo)準(zhǔn)參照相關(guān)規(guī)定測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)[3]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件包SPSS20.0分析處理本研究的所有數(shù)據(jù)及資料,計(jì)量資料用構(gòu)成比表示,組間比較采用χ2檢驗(yàn),P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 在臨床送檢的180株標(biāo)本中,白色念珠菌檢出率最高42.78%,克柔念珠菌5.56%,熱帶念珠菌20.56%,星形念珠菌14.44%,光滑念珠菌7.22%,近平滑念珠菌6.67%,其他念珠菌2.78%,其之間檢出率比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05,見表1）。

表1 180株念珠菌分布構(gòu)成

2.2 酵母樣真菌藥敏實(shí)驗(yàn)（見表2）。

2.3 氟康唑,對(duì)49株臨床分離酵母樣真菌進(jìn)行藥敏實(shí)驗(yàn)用Rosco紙片法,符合率為88.9%,敏感性為82%。

3 討論

臨床標(biāo)本微生物檢驗(yàn)陽(yáng)性率低,使得醫(yī)生對(duì)疾病的診斷和治療水平也在降低。其主要原因如下：隨著近年來醫(yī)院臨床檢驗(yàn)技術(shù)的發(fā)展,臨床檢驗(yàn)的自動(dòng)化使得臨床療效降低,其中臨床標(biāo)本微生物的陽(yáng)性率降低。臨床中標(biāo)本微生物檢驗(yàn)也大都是運(yùn)用微機(jī)、微量化、自動(dòng)化以及分子生物學(xué)的方式來進(jìn)行檢驗(yàn)工作的,同時(shí)檢驗(yàn)的結(jié)果也將成為疾病的臨床診斷和治療的重要依據(jù)和方法。對(duì)臨床中標(biāo)本微生物檢驗(yàn)結(jié)果的陽(yáng)性率研究中,微生物檢查結(jié)果在臨床治療中具有重要的意義。微生物標(biāo)本檢查可以使醫(yī)生準(zhǔn)確診斷出患者的疾病,并且醫(yī)生還可以根據(jù)微生物檢驗(yàn)結(jié)果來及時(shí)的制定相應(yīng)的治療對(duì)策,并結(jié)合患者臨床的癥狀變化,合理的使用抗菌藥物,減少因?yàn)榭咕幬锸褂貌划?dāng)而造成患者病情的加重,從而為患者制定合理的治療方案,提高患者的疾病治愈率,因此可以說臨床標(biāo)本微生物檢驗(yàn)在患者疾病治療中,具有重要意義。

酵母樣真菌外觀似酵母型菌落,但在菌落表面除有生芽細(xì)胞外還有伸長(zhǎng)的生芽細(xì)胞所形成的假菌絲伸入培養(yǎng)基內(nèi),如念珠菌。對(duì)它常規(guī)的鑒定方法有三種：(1)首先種玉米培養(yǎng)基和沙保若氏,觀察菌落特點(diǎn)在沙保若氏,觀察生長(zhǎng)特點(diǎn)在玉米培養(yǎng)基上。(2)鑒定常見的4種酵母樣真菌在培植科瑪嘉上,根據(jù)顯色不同來鑒定。(3)鑒別常見的酵母樣真菌使用簡(jiǎn)單的發(fā)酵試驗(yàn)。而在臨床上,酵母樣真菌對(duì)引起全身性多臟器,多系統(tǒng)感染,嚴(yán)重會(huì)引發(fā)死亡[4]。醫(yī)院感染一般都是由真菌引起,它最大的表現(xiàn)就在于感染率增多。不再局限感染的菌種,耐藥性也有不同程度的提高。根據(jù)國(guó)內(nèi)外的報(bào)告,白色念珠菌感染情況已經(jīng)有所下降,較往常相比,有所提高的則是熱帶念珠菌和近平滑念珠菌等[5]。

酵母樣真菌由于不同特性,它的耐藥性也有所不同,對(duì)49株臨床分離酵母樣真菌進(jìn)行藥敏實(shí)驗(yàn)其中氟康唑用Rosco紙片法,符合率為88.9%,敏感性為82%。很高的耐藥性也存在于其他酵母樣真菌中。不同的抗真菌藥物在臨床上有不同的耐藥性,為了使抗真菌藥物運(yùn)用更加合理,特采用了Rosco紙片法,它的經(jīng)濟(jì),便于觀察,結(jié)果重復(fù)性好[6]。不需特殊的培訓(xùn)是Rosco紙片法檢驗(yàn)方法最大的優(yōu)點(diǎn)。它適用各個(gè)微生物實(shí)驗(yàn)室。

綜上所述：在臨床中對(duì)微生物標(biāo)本進(jìn)行陽(yáng)性率檢驗(yàn),不僅能提高臨床中對(duì)患者的診斷率,還可以將此信息作為診斷的依據(jù),減少臨床治療中的誤診、漏診的發(fā)生。還可以通過臨床中不同微生物標(biāo)本的陽(yáng)性率檢驗(yàn),尋找患者病菌感染的原因,為疾病在臨床的診斷中提供客觀依據(jù)[7]。因此,應(yīng)該認(rèn)真分析臨床中不同年度的微生物標(biāo)本檢驗(yàn)的陽(yáng)性率,不僅為醫(yī)院中臨床微生物檢測(cè)提供有價(jià)值的信息,還能提高醫(yī)生檢驗(yàn)和診斷感染性疾病的水平,也對(duì)患者疾病的治療提供有效的幫助[8]。其中在不同臨床標(biāo)本微生物檢驗(yàn)中,雖然其不同的生長(zhǎng)與生化特點(diǎn)是不同病原菌的存在方式,盡管各種微生物的有千差萬別的特性,但它們之間的檢測(cè)方法是一致的,都要經(jīng)過三個(gè)步驟,即標(biāo)本分離,菌種鑒定,藥敏試驗(yàn),而本文中的Rosco紙片法可作為真菌藥敏的常規(guī)方法推行使用。

表2 6種臨床臨床常見酵母樣真菌的耐藥率

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10.3969/j.issn.1009-4393.2014.25.008

湖南 418400 靖州縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科（徐衛(wèi)珍）