萬景旺等

摘要：為了研究活體生防菌與生物源農藥混合使用對根結線蟲的防治效果，利用生防菌Jdm2分別與微生物源農藥阿維菌素及植物源農藥苦參堿、印楝素、藜蘆堿混用對黃瓜根結線蟲進行防治。單獨使用各藥劑時，生防菌Jdm2、阿維菌素、苦參堿、印楝素及藜蘆堿對黃瓜南方根結線蟲的防效分別是36%、42%、48%、48%和30%，分別使黃瓜單果增重15%、14%、18%、25%和10%。當Jdm2分別與阿維菌素、苦參堿、印楝素、藜蘆堿減量混用時，防效分別達到50%、56%、54%、44%，對黃瓜單果增重分別達到28%、31%、27%、18%?？梢娫诟髯詼p量的情況下，生防菌與生物源農藥混用可對黃瓜根結線蟲的防治起到增效作用。黃瓜平均單果重與黃瓜根結線蟲防效呈正相關（r=0.92），說明根結線蟲病情與黃瓜產量有著密切聯(lián)系。

關鍵詞：黃瓜；根結線蟲病；生防菌；生物源農藥；混用；增效

中圖分類號： S432.4+5 文獻標志碼： A 文章編號：1002-1302（2014）04-0108-03

收稿日期：2014-02-17

基金項目：國家公益性行業(yè)（農業(yè)）科研專項（編號：SQ201403032）；江蘇省農業(yè)科技自主創(chuàng)新資金[編號：CX（10）206]。

作者簡介：萬景旺（1987—），男，河南商丘人，碩士研究生，主要從事生物化工與生物技術研究。E-mail：cumtwan@gmail.com。

通信作者：肖雷（1975—），男，江蘇徐州人，博士，副教授，主要從事生物工程研究。Tel：（0516）83591070；E-mail：lxiao@cumt.edu.cn。根結線蟲（Meloidogyne spp.）是一類重要的植物病原線蟲，可寄生2 000～3 000種植物，造成嚴重危害，產量損失一般為10%～30%，嚴重者高達50%以上。根結線蟲主要危害植物根部，使根部形成串球狀根結，破壞根組織的分化和生理活動，影響地上部分生長發(fā)育[1]。根結線蟲中，以南方根結線蟲（M. incognita）的危害最為普遍[2]。對于根結線蟲病的防治，歷來以化學藥劑為主，但化學殺線蟲劑對環(huán)境污染嚴重，使用過程中對人、畜不安全，于是越來越多的研究者致力于安全高效的殺線劑的研究工作[3]。而其中應用微生物農藥及植物源農藥等生物源農藥進行根結線蟲防治的研究較多。微生物農藥是指由微生物及其代謝產物加工而成的具有殺蟲、殺菌、除草、殺鼠或調節(jié)植物生長的具有農藥活性的物質，包括農用抗生素和活體微生物農藥，是生物防治的物質基礎和重要手段[4]。目前生產中已有一些芽孢桿菌（Bucillus spp.）用于根結線蟲防治，收到了良好效果[5-6]。阿維菌素是由灰色鏈霉菌發(fā)酵產生的一種新型抗生素，對根結線蟲具有良好的防效[7-8]。植物源農藥如苦參堿、印楝素和藜蘆堿等也對根結線蟲具有較高的防治效果[9-10]。阿維菌素與植物源農藥復配或混用對根結線蟲等植物病原表現(xiàn)出了良好的拮抗效果[11-13]?；铙w生防菌與化學農藥混用以及活體生防菌之間的混用在防治植物病害中的應用也有報道[14-15]，但卻很少有利用活體生防菌與生物源農藥混用來防治根結線蟲的研究。本試驗利用生防菌Jdm2分別與微生物源農藥阿維菌素和植物源農藥苦參堿、印楝素、藜蘆堿混用對黃瓜根結線蟲進行防治，探討生防菌與生物源農藥的混用效果。

1材料與方法

1.1試驗時間、地點

田間試驗于2012年在江蘇省淮安市丁集鎮(zhèn)進行，室內試驗在江蘇省農業(yè)科學院植物保護研究所進行。試驗土壤類型為沙土兩合土，肥力中等偏上，有機質含量2.0 g/kg，pH值82，有效磷10～15 mg/kg，速效鉀90～100 mg/kg，有效鋅 1.0 mg/kg，有效硼0.4 mg/kg。

1.2試驗材料

1.2.1供試作物供試作物為黃瓜，品種為“津研35”，砧木為黑籽南瓜。

1.2.2供試菌株供試菌株Jdm2為江蘇省農業(yè)科學院植物保護研究所分離得到，經鑒定枯草芽孢桿菌（Bucillus subtilis）。將該菌株接種到改良PD培養(yǎng)液中培養(yǎng)（30 ℃、150 r/min）[16]，當培養(yǎng)至D600 nm為 0.5～0.8 時，將種子菌液以1 ∶100體積比加入PD培養(yǎng)液中，振蕩培養(yǎng)20～24 h，菌株發(fā)酵液作為接種物。接種后同樣條件搖培至D600 nm 為1.0左右（約108 CFU/mL），發(fā)酵液稀釋后灌根使用。

1.2.3供試藥劑1.8%阿維菌素乳油（陜西上格之路生物科技有限公司），0.3%苦參堿水劑（河南省亞樂生物科技股份有限公司），0.5%印楝素乳油（云南光明印楝產業(yè)開發(fā)股份有限公司），0.5%藜蘆堿可溶液劑（山東聊城賽德農藥有限公司）。

1.3試驗方法

于黃瓜移栽時采用生防菌及各藥劑進行灌根處理。每個處理3次重復，每個重復小區(qū)面積38 m2，定植210株，隨機排列。采用灌根法施藥，每株灌根500 mL藥劑。處理藥劑濃度參照表1。

2.3黃瓜根結線蟲病情與黃瓜果實單果重的相關性分析

由圖3分析可知，黃瓜根結線蟲病情與黃瓜果實發(fā)育有顯著關系，不同處理防效越高，其平均單果重也就越高，兩者呈正相關（r=0.92）。說明黃瓜根結線蟲病對黃瓜果實發(fā)育有很大的影響，根結線蟲病害嚴重的黃瓜植株，其果實發(fā)育遲緩，質量明顯減輕。

3討論與結論

單獨使用生防菌作為防治因子防治植物病害時，容易受到自然環(huán)境條件因素的干擾，造成田間防治效果不理想、不穩(wěn)定。本研究利用生防菌Jdm2分別與微生物源農藥阿維菌素及植物源農藥苦參堿、印楝素、藜蘆堿混用來防治黃瓜根結線蟲病，結果表明，混用的田間防效均不同程度高于兩者單獨使用，表現(xiàn)出不同程度的增效作用。這可能是因為生防菌和生物源農藥對根結線蟲的作用機理不同，即生物源農藥具有快速穩(wěn)定的體外殺蟲作用，主要作用于生活在土壤中的2齡幼蟲；而生防菌株不僅對根結線蟲2齡幼蟲具有抑制作用，還能顯著抑制根結線蟲卵孵化，甚至有可能誘導植物產生抗性，抵制根結線蟲2齡幼蟲的侵入[18-19]。

當生防菌Jdm2分別與幾種生物源農藥混用防治黃瓜根結線蟲病害時，防治效果差異與單用生物源農藥相似，如單獨使用時藜蘆堿防效最低，混用時，生防菌Jdm2與藜蘆堿的防效也是最低的，說明生防菌Jdm2與生物源農藥混用時，防效中生物源農藥貢獻比率較大。當單獨使用時，印楝素防效最高，但與生防菌Jdm2混用后，其防效要低于苦參堿與生防菌Jdm2混用，表明苦參堿與生防菌Jdm2增效作用更為明顯。本研究探討了黃瓜根結線蟲病情指數(shù)與黃瓜重量之間的關系，發(fā)現(xiàn)兩者存在較高的相關性。由圖3分析可知，各處理對黃瓜根結線蟲防效與黃瓜平均單果重趨勢相同，表明根結線蟲病可影響黃瓜果實發(fā)育，造成黃瓜果實發(fā)育遲緩，這可能是根結線蟲影響了黃瓜植株對水分及養(yǎng)分的吸收，不能滿足黃瓜果實發(fā)育需求造成的。

另外，值得一提的是，利用生防菌Jdm2與幾種生物源農藥混用后雖然可以提高防效，但總體看，防效并不理想，最高也僅為56%。這可能是所選用田塊發(fā)病較重，在移栽時進行灌根處理，可對土壤中根結線蟲2齡幼蟲發(fā)揮作用，抑制其進入黃瓜根內，初期防效較高（數(shù)據未列出）；但隨著黃瓜生長期的延長，各藥劑藥效逐漸降低，土壤中根結線蟲密度增大，黃瓜根結線蟲病情加重。如果在黃瓜不同生長期進行2次施藥處理，防效也許更加明顯，這需要進一步的研究驗證。

由于生防菌與生物源農藥混用不僅可以發(fā)揮生物源農藥安全高效的優(yōu)勢，同時還保持了生防菌在植物根周圍定殖、分泌抗生素、誘導植物產生抗病性等特點，因此在植物病害防治中具有廣闊的推廣應用前景。

參考文獻：

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當生防菌Jdm2分別與幾種生物源農藥混用防治黃瓜根結線蟲病害時，防治效果差異與單用生物源農藥相似，如單獨使用時藜蘆堿防效最低，混用時，生防菌Jdm2與藜蘆堿的防效也是最低的，說明生防菌Jdm2與生物源農藥混用時，防效中生物源農藥貢獻比率較大。當單獨使用時，印楝素防效最高，但與生防菌Jdm2混用后，其防效要低于苦參堿與生防菌Jdm2混用，表明苦參堿與生防菌Jdm2增效作用更為明顯。本研究探討了黃瓜根結線蟲病情指數(shù)與黃瓜重量之間的關系，發(fā)現(xiàn)兩者存在較高的相關性。由圖3分析可知，各處理對黃瓜根結線蟲防效與黃瓜平均單果重趨勢相同，表明根結線蟲病可影響黃瓜果實發(fā)育，造成黃瓜果實發(fā)育遲緩，這可能是根結線蟲影響了黃瓜植株對水分及養(yǎng)分的吸收，不能滿足黃瓜果實發(fā)育需求造成的。

另外，值得一提的是，利用生防菌Jdm2與幾種生物源農藥混用后雖然可以提高防效，但總體看，防效并不理想，最高也僅為56%。這可能是所選用田塊發(fā)病較重，在移栽時進行灌根處理，可對土壤中根結線蟲2齡幼蟲發(fā)揮作用，抑制其進入黃瓜根內，初期防效較高（數(shù)據未列出）；但隨著黃瓜生長期的延長，各藥劑藥效逐漸降低，土壤中根結線蟲密度增大，黃瓜根結線蟲病情加重。如果在黃瓜不同生長期進行2次施藥處理，防效也許更加明顯，這需要進一步的研究驗證。

由于生防菌與生物源農藥混用不僅可以發(fā)揮生物源農藥安全高效的優(yōu)勢，同時還保持了生防菌在植物根周圍定殖、分泌抗生素、誘導植物產生抗病性等特點，因此在植物病害防治中具有廣闊的推廣應用前景。

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當生防菌Jdm2分別與幾種生物源農藥混用防治黃瓜根結線蟲病害時，防治效果差異與單用生物源農藥相似，如單獨使用時藜蘆堿防效最低，混用時，生防菌Jdm2與藜蘆堿的防效也是最低的，說明生防菌Jdm2與生物源農藥混用時，防效中生物源農藥貢獻比率較大。當單獨使用時，印楝素防效最高，但與生防菌Jdm2混用后，其防效要低于苦參堿與生防菌Jdm2混用，表明苦參堿與生防菌Jdm2增效作用更為明顯。本研究探討了黃瓜根結線蟲病情指數(shù)與黃瓜重量之間的關系，發(fā)現(xiàn)兩者存在較高的相關性。由圖3分析可知，各處理對黃瓜根結線蟲防效與黃瓜平均單果重趨勢相同，表明根結線蟲病可影響黃瓜果實發(fā)育，造成黃瓜果實發(fā)育遲緩，這可能是根結線蟲影響了黃瓜植株對水分及養(yǎng)分的吸收，不能滿足黃瓜果實發(fā)育需求造成的。

另外，值得一提的是，利用生防菌Jdm2與幾種生物源農藥混用后雖然可以提高防效，但總體看，防效并不理想，最高也僅為56%。這可能是所選用田塊發(fā)病較重，在移栽時進行灌根處理，可對土壤中根結線蟲2齡幼蟲發(fā)揮作用，抑制其進入黃瓜根內，初期防效較高（數(shù)據未列出）；但隨著黃瓜生長期的延長，各藥劑藥效逐漸降低，土壤中根結線蟲密度增大，黃瓜根結線蟲病情加重。如果在黃瓜不同生長期進行2次施藥處理，防效也許更加明顯，這需要進一步的研究驗證。

由于生防菌與生物源農藥混用不僅可以發(fā)揮生物源農藥安全高效的優(yōu)勢，同時還保持了生防菌在植物根周圍定殖、分泌抗生素、誘導植物產生抗病性等特點，因此在植物病害防治中具有廣闊的推廣應用前景。

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