許建民　王永平

摘要：采用間歇浸沒(méi)培養(yǎng)裝置對(duì)紅葉石楠進(jìn)行組培快繁研究，結(jié)果表明：在液體間歇浸沒(méi)培養(yǎng)下，紅葉石楠的株高、地上部鮮重和干重都比固體培養(yǎng)的高；液體間歇浸沒(méi)培養(yǎng)下的紅葉石楠積累的生物量接近傳統(tǒng)固體培養(yǎng)的3倍；液體間歇浸沒(méi)培養(yǎng)下紅葉石楠的葉片水勢(shì)比固體培養(yǎng)的低，但沒(méi)有玻璃化現(xiàn)象發(fā)生；液體間歇浸沒(méi)培養(yǎng)下，紅葉石楠的繼代和生根過(guò)程合二為一，因此可以縮短培養(yǎng)時(shí)間；在液體間歇浸沒(méi)培養(yǎng)下，紅葉石楠的氣孔面積是固體培養(yǎng)下的3.2倍，氣孔頻度是固體培養(yǎng)的1.7倍。綜合研究結(jié)果，間歇浸沒(méi)培養(yǎng)方式相對(duì)于傳統(tǒng)的固體培養(yǎng)在各項(xiàng)生理指標(biāo)上均表現(xiàn)較好，可用于大規(guī)模培養(yǎng)紅葉石楠。

關(guān)鍵詞：紅葉石楠；間歇浸沒(méi)生物反應(yīng)器；植物組織培養(yǎng)；組培苗；工廠化生產(chǎn)

中圖分類號(hào)： Q813.1+2 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A 文章編號(hào)：1002-1302（2014）04-0063-03

收稿日期：2013-08-05

項(xiàng)目資助：江蘇省科技支撐計(jì)劃（編號(hào)：BE2011349）；江蘇省鎮(zhèn)江市科技支撐計(jì)劃（編號(hào)：NY2010023）。

作者簡(jiǎn)介：許建民（1981—），男，甘肅張掖人，博士研究生，講師，研究方向?yàn)樵O(shè)施作物的生理生態(tài)。E-mail：cauee@163.com。

通信作者：王永平，男，江蘇宜興人，教授，研究方向園藝植物育種，Tel：（0511）87291229；E-mail：wyp1961@126.com。紅葉石楠（Photinia frasery）是光葉石楠（P. glabra） 和石楠（P. serrulata）的雜交種，屬于薔薇科石楠屬常綠闊葉小喬木或多枝叢生灌木，因其新梢和嫩葉鮮紅而得名。紅葉石楠生長(zhǎng)速度快，且萌芽性強(qiáng)、耐修剪，可以根據(jù)園林需要栽培成不同的樹(shù)形，因而在園林綠化上的用途廣泛[1-2]。目前紅葉石楠的繁殖多采用扦插繁殖，但隨著扦插代數(shù)增加，其葉色會(huì)變淡、變暗，且葉色不整齊，從而降低了其品質(zhì)[3-4]。利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)可大規(guī)模生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)種苗，大大提高商品的產(chǎn)量及質(zhì)量，但傳統(tǒng)的培養(yǎng)方式程序多、苗木成本高，且隨著繼代次數(shù)的增加，增殖系數(shù)降低，在工廠化生產(chǎn)方面的應(yīng)用仍較少。間歇浸沒(méi)培養(yǎng)是在液體培養(yǎng)的基礎(chǔ)上發(fā)展的新型組培方式，主要依靠外在動(dòng)力實(shí)現(xiàn)液體培養(yǎng)基的間歇式供給，間歇液體培養(yǎng)過(guò)程中的培養(yǎng)基物質(zhì)交換速度快，植物組織產(chǎn)生的代謝物質(zhì)不易在組織塊周?chē)e累，因此植物組織在液體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)速度大于固體培養(yǎng)基，特別是在易發(fā)生褐變的花卉培養(yǎng)上效果明顯。國(guó)外對(duì)液體間歇浸沒(méi)培養(yǎng)的研究和應(yīng)用較多，主要集中于玉簪[5]、芭蕉[6]、馬鈴薯[7]等經(jīng)濟(jì)作物；國(guó)內(nèi)有人對(duì)辰星草[8]、甘蔗[9]、馬鈴薯[10]、三葉半夏[11]等植物進(jìn)行過(guò)初步研究，但關(guān)于紅葉石楠的液體間歇浸沒(méi)培養(yǎng)尚未見(jiàn)報(bào)道。本研究將利用液體間歇浸沒(méi)培養(yǎng)技術(shù)開(kāi)展對(duì)紅葉石楠生長(zhǎng)的研究，并對(duì)比傳統(tǒng)的固體培養(yǎng)技術(shù)和液體間歇浸沒(méi)培養(yǎng)技術(shù)在生長(zhǎng)指標(biāo)上的優(yōu)劣，以期為紅葉石楠的大規(guī)模工廠化生產(chǎn)提供理論參考。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

供試材料為紅葉石楠組培苗——紅羅賓（Photinia fraseri “Red Robin”），由江蘇農(nóng)林職業(yè)技術(shù)學(xué)院組培室提供。

1.2試驗(yàn)方法

選取在傳統(tǒng)固體培養(yǎng)條件下生長(zhǎng)一致的紅葉石楠組培苗，分別接種至液體間歇浸沒(méi)培養(yǎng)容器和傳統(tǒng)固體培養(yǎng)容器內(nèi)。在固體培養(yǎng)過(guò)程中，取300 mL的組培瓶作為培養(yǎng)容器，每個(gè)組培瓶中接種3株組培苗。液體培養(yǎng)基配方為：MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA。根據(jù)預(yù)試驗(yàn)結(jié)果設(shè)置培養(yǎng)的浸沒(méi)頻率為1 min/6 h；培養(yǎng)時(shí)間為45 d；培養(yǎng)室溫度為（25±2） ℃，光照時(shí)間為12 h/d，光照強(qiáng)度為 70 μmol/（m2·s）。每種培養(yǎng)方式設(shè)5個(gè)重復(fù)。

1.3測(cè)定項(xiàng)目及方法

1.3.1測(cè)定項(xiàng)目在上述條件下培養(yǎng)45 d后測(cè)定組培苗的株高、莖粗、葉長(zhǎng)、葉寬、葉面積、根長(zhǎng)、根莖的干鮮重、根系活力、葉綠素含量、葉片水勢(shì)、氣孔特性參數(shù)（氣孔長(zhǎng)度、氣孔寬度、氣孔開(kāi)度、氣孔密度）等參數(shù)。

1.3.2測(cè)定方法株高、葉長(zhǎng)、葉寬、根長(zhǎng)采用直尺測(cè)量，莖粗用游標(biāo)卡尺測(cè)定，葉面積用Photoshop圖像處理法獲得，根莖鮮重用電子天平稱量，根系活力用TTC法測(cè)定，葉綠素含量采用舒展等的方法[12]，葉片水勢(shì)用WP4C露點(diǎn)水勢(shì)儀測(cè)定，組培瓶?jī)?nèi)的濕度用濕度傳感器測(cè)定。

3討論

間歇浸沒(méi)培養(yǎng)能降低生產(chǎn)成本，縮短培養(yǎng)時(shí)間，主要是由于間歇浸沒(méi)培養(yǎng)使得植物根部與營(yíng)養(yǎng)液充分接觸，而且氧氣的交換也較充足[13]。Yan等研究表明，在液體間歇浸沒(méi)培養(yǎng)下羅漢果的增殖率、株高、根的干鮮重和生物量等各項(xiàng)指標(biāo)均優(yōu)于固體培養(yǎng)和液體培養(yǎng)，間歇浸沒(méi)培養(yǎng)還可以抑制愈傷組織的生長(zhǎng)[14]。Jova等研究表明，采用液體間歇浸沒(méi)培養(yǎng)可以使得甘薯試管薯的質(zhì)量大于3g，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于固體培養(yǎng)的對(duì)照組[15]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，紅葉石楠在液體間歇浸沒(méi)培養(yǎng)下的株高、地上部干鮮重、葉綠素總量等指標(biāo)均優(yōu)于傳統(tǒng)的固體培養(yǎng)；此外在固體培養(yǎng)條件下，紅葉石楠的繼代和生根是2個(gè)相對(duì)獨(dú)立的過(guò)程，而在液體培養(yǎng)下的紅葉石楠除了莖的生長(zhǎng)優(yōu)于固體培養(yǎng)外，還可直接在繼代培養(yǎng)過(guò)程中生根，這與Yan等的研究結(jié)果[14]基本一致?？傮w看來(lái)，間歇浸沒(méi)培養(yǎng)可以在同樣的條件下得到更多更優(yōu)質(zhì)的組培苗，而且可以縮短組培生產(chǎn)時(shí)間，從而相應(yīng)減少組培苗的培育成本。

水勢(shì)是表示植物水分狀況或水分虧缺程度的一個(gè)直接指標(biāo)，在植物各部位的水勢(shì)中，葉片水勢(shì)是反映植物體內(nèi)水分虧缺最靈敏的生理指標(biāo)， 反映了植物各種生理活動(dòng)受環(huán)境水分

條件的制約程度。本研究中2種培養(yǎng)條件下紅葉石楠葉片水勢(shì)不同，固體培養(yǎng)的葉片水勢(shì)高于液體間歇浸沒(méi)培養(yǎng)的。Hahn等研究發(fā)現(xiàn)，固體培養(yǎng)下菊花的葉片水勢(shì)要高于液體間歇浸沒(méi)培養(yǎng)的[16]。本試驗(yàn)中液體間歇浸沒(méi)培養(yǎng)下的紅葉石楠葉片水勢(shì)比傳統(tǒng)固體培養(yǎng)的低，為-1.00 MPa，與Hahn等的結(jié)果[16]一致；雖然液體間歇培養(yǎng)下的水勢(shì)較低，但液體間歇浸沒(méi)培養(yǎng)下的地上部含水率為75.43%，低于固體培養(yǎng)的77.98%，表明液體間歇浸沒(méi)培養(yǎng)沒(méi)有使植株產(chǎn)生玻璃化現(xiàn)象。徐志剛的研究表明：相對(duì)濕度為50%～65%較適合荔蒲芋組培苗生根階段培養(yǎng)的需要，其次是75%～80%的相對(duì)濕度[17]；本研究中液體間歇培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)、固體培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的濕度分別為83%、65%，恰好在這2個(gè)范圍之內(nèi)，說(shuō)明液體間歇浸沒(méi)培養(yǎng)條件下瓶?jī)?nèi)的濕度是適合植物生長(zhǎng)的濕度。

氣孔作為植物與外界環(huán)境進(jìn)行氣體交換（主要是二氧化碳和水蒸氣）的重要通道，在調(diào)節(jié)植物光合作用、蒸騰作用以及水分利用中扮演著至關(guān)重要的角色。植物通過(guò)蒸騰散失的水分中有90%以上是通過(guò)氣孔散失的，植物通過(guò)改變氣孔數(shù)目和開(kāi)閉程度而調(diào)節(jié)葉片的蒸騰速率和水勢(shì)。當(dāng)葉片水勢(shì)降至某一閾值時(shí)會(huì)引起氣孔關(guān)閉，而氣孔關(guān)閉反過(guò)來(lái)又會(huì)減少水分散失并有助于葉片水勢(shì)恢復(fù)。本試驗(yàn)中液體間歇浸沒(méi)培養(yǎng)和傳統(tǒng)固體培養(yǎng)相比容器內(nèi)濕度不同，液體間歇浸沒(méi)培養(yǎng)的環(huán)境濕度大于傳統(tǒng)固體培養(yǎng)，受此影響，液體間歇浸沒(méi)培養(yǎng)下氣孔開(kāi)度較大，氣孔面積也較大，氣孔頻度也最大。左應(yīng)梅等對(duì)木薯的盆栽試驗(yàn)研究表明，空氣相對(duì)濕度與氣孔導(dǎo)度之間呈極顯著正相關(guān)，當(dāng)土壤相對(duì)含水量較低時(shí)，土壤相對(duì)含水量是影響氣孔導(dǎo)度的主導(dǎo)因子[18]。考慮到植物進(jìn)行光合作用和干物質(zhì)積累所需要的二氧化碳也是通過(guò)氣孔而獲得，而在組培生產(chǎn)過(guò)程中，培養(yǎng)容器內(nèi)氣體成分復(fù)雜，因此影響液體間歇浸沒(méi)培養(yǎng)下氣孔開(kāi)閉的主要因素是容器內(nèi)濕度還是其他因素還需要進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn)：

[1]吳麗君. 紅葉石楠推廣應(yīng)用現(xiàn)狀及前景分析[J]. 福建林業(yè)科技，2009，36（2）：145-148，161.

[2]王真真，王衛(wèi)娜，徐國(guó)超，等. 紅葉石楠研究現(xiàn)狀及發(fā)展前景[J]. 黑龍江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，6（6）：150-153.

[3]陸小清，李云龍，毛志濱，等. 紅葉石楠扦插試驗(yàn)[J]. 江蘇林業(yè)科技，2005，32（3）：22-23，43.

[4]趙曉偉，黃美娟，黃海泉. 彩葉樹(shù)種紅葉石楠的開(kāi)發(fā)與應(yīng)用[J]. 北方園藝，2008（6）：161-163.

[5]Adelberg J. Efficiency in thin-film liquid system for Hosta micropropagation[J]. Plant Cell，Tissue and Organ Culture，2005，81（3）：359-368.

[6]Aragón C E，Escalona M，Rodriguez R，et al. Effect of sucrose，light，and carbon dioxide on plantain micropropagation in temporary immersion bioreactors[J]. In Vitro Cellular & Developmental Biology-Plant，2010，46（1）：89-94.

[7]Kmrinen-Karppinen T，Virtanen E，Rokka V M，et al. Novel bioreactor technology for mass propagation of potato microtubers[J]. Plant Cell，Tissue and Organ Culture，2010，101（2）：245-249.

[8]廉美蘭，樸炫春，王穎，等. 間歇浸沒(méi)式生物反應(yīng)器在辰星草培養(yǎng)苗擴(kuò)繁中的應(yīng)用[J]. 園藝學(xué)報(bào)，2004，31（4）：532-532.

[9]劉麗敏，譚裕模，李松，等. 利用間歇浸沒(méi)式生物反應(yīng)器進(jìn)行甘蔗脫毒苗快繁研究[J]. 西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2009，22（4）：1038-1041.

[10]許建民，王永平，王宇. 馬鈴薯組培苗液體間歇浸沒(méi)培養(yǎng)初探[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013，41（1）：53-55.

[11]賈明良，張本厚，高偉平，等. 三葉半夏[Pinellia ternata （Thunb.） Breit]的間歇浸沒(méi)培養(yǎng)[J]. 中國(guó)生物工程雜志，2012，32（11）：49-54.

[12]舒展，張曉素，陳娟，等. 葉綠素含量測(cè)定的簡(jiǎn)化[J]. 植物生理學(xué)通訊，2010（4）：399-402.

[13]許建民，王永平. 間歇浸沒(méi)培養(yǎng)條件下硝酸銀對(duì)草莓組培苗生長(zhǎng)的影響[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013，41（10）：50-51.

[14]Yan H，Liang C，Yang L，et al. In vitro and ex vitro rooting of Siratia grosvenorii，a traditional medicinal plant[J]. Acta Physiologiae Plantarum，2010，32（1）：115-120.

[15]Jova M C，Kosky R G，Pérez M B，et al. Production of yam microtubers using a temporary immersion system[J]. Plant Cell，Tissue and Organ Culture，2005，83（1）：103-107.

[16]Hahn E J，Paek K Y. Multiplication of Chrysanthemum shoots in bioreactors as affected by culture method and inoculation density of single node stems[M]//Liquid Culture Systems for in vitro Plant Propagation，2005：143-153.

[17]徐志剛. 組培微環(huán)境與規(guī)?；缭O(shè)施環(huán)境調(diào)控的研究[D]. 南京：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)，2002：124.

[18]左應(yīng)梅，陳秋波，鄧權(quán)權(quán)，等. 土壤水分、光照和空氣濕度對(duì)木薯氣孔導(dǎo)度的影響[J]. 生態(tài)學(xué)雜志，2011，30（4）：689-693.

氣孔作為植物與外界環(huán)境進(jìn)行氣體交換（主要是二氧化碳和水蒸氣）的重要通道，在調(diào)節(jié)植物光合作用、蒸騰作用以及水分利用中扮演著至關(guān)重要的角色。植物通過(guò)蒸騰散失的水分中有90%以上是通過(guò)氣孔散失的，植物通過(guò)改變氣孔數(shù)目和開(kāi)閉程度而調(diào)節(jié)葉片的蒸騰速率和水勢(shì)。當(dāng)葉片水勢(shì)降至某一閾值時(shí)會(huì)引起氣孔關(guān)閉，而氣孔關(guān)閉反過(guò)來(lái)又會(huì)減少水分散失并有助于葉片水勢(shì)恢復(fù)。本試驗(yàn)中液體間歇浸沒(méi)培養(yǎng)和傳統(tǒng)固體培養(yǎng)相比容器內(nèi)濕度不同，液體間歇浸沒(méi)培養(yǎng)的環(huán)境濕度大于傳統(tǒng)固體培養(yǎng)，受此影響，液體間歇浸沒(méi)培養(yǎng)下氣孔開(kāi)度較大，氣孔面積也較大，氣孔頻度也最大。左應(yīng)梅等對(duì)木薯的盆栽試驗(yàn)研究表明，空氣相對(duì)濕度與氣孔導(dǎo)度之間呈極顯著正相關(guān)，當(dāng)土壤相對(duì)含水量較低時(shí)，土壤相對(duì)含水量是影響氣孔導(dǎo)度的主導(dǎo)因子[18]?？紤]到植物進(jìn)行光合作用和干物質(zhì)積累所需要的二氧化碳也是通過(guò)氣孔而獲得，而在組培生產(chǎn)過(guò)程中，培養(yǎng)容器內(nèi)氣體成分復(fù)雜，因此影響液體間歇浸沒(méi)培養(yǎng)下氣孔開(kāi)閉的主要因素是容器內(nèi)濕度還是其他因素還需要進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn)：

[1]吳麗君. 紅葉石楠推廣應(yīng)用現(xiàn)狀及前景分析[J]. 福建林業(yè)科技，2009，36（2）：145-148，161.

[2]王真真，王衛(wèi)娜，徐國(guó)超，等. 紅葉石楠研究現(xiàn)狀及發(fā)展前景[J]. 黑龍江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，6（6）：150-153.

[3]陸小清，李云龍，毛志濱，等. 紅葉石楠扦插試驗(yàn)[J]. 江蘇林業(yè)科技，2005，32（3）：22-23，43.

[4]趙曉偉，黃美娟，黃海泉. 彩葉樹(shù)種紅葉石楠的開(kāi)發(fā)與應(yīng)用[J]. 北方園藝，2008（6）：161-163.

[5]Adelberg J. Efficiency in thin-film liquid system for Hosta micropropagation[J]. Plant Cell，Tissue and Organ Culture，2005，81（3）：359-368.

[6]Aragón C E，Escalona M，Rodriguez R，et al. Effect of sucrose，light，and carbon dioxide on plantain micropropagation in temporary immersion bioreactors[J]. In Vitro Cellular & Developmental Biology-Plant，2010，46（1）：89-94.

[7]Kmrinen-Karppinen T，Virtanen E，Rokka V M，et al. Novel bioreactor technology for mass propagation of potato microtubers[J]. Plant Cell，Tissue and Organ Culture，2010，101（2）：245-249.

[8]廉美蘭，樸炫春，王穎，等. 間歇浸沒(méi)式生物反應(yīng)器在辰星草培養(yǎng)苗擴(kuò)繁中的應(yīng)用[J]. 園藝學(xué)報(bào)，2004，31（4）：532-532.

[9]劉麗敏，譚裕模，李松，等. 利用間歇浸沒(méi)式生物反應(yīng)器進(jìn)行甘蔗脫毒苗快繁研究[J]. 西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2009，22（4）：1038-1041.

[10]許建民，王永平，王宇. 馬鈴薯組培苗液體間歇浸沒(méi)培養(yǎng)初探[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013，41（1）：53-55.

[11]賈明良，張本厚，高偉平，等. 三葉半夏[Pinellia ternata （Thunb.） Breit]的間歇浸沒(méi)培養(yǎng)[J]. 中國(guó)生物工程雜志，2012，32（11）：49-54.

[12]舒展，張曉素，陳娟，等. 葉綠素含量測(cè)定的簡(jiǎn)化[J]. 植物生理學(xué)通訊，2010（4）：399-402.

[13]許建民，王永平. 間歇浸沒(méi)培養(yǎng)條件下硝酸銀對(duì)草莓組培苗生長(zhǎng)的影響[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013，41（10）：50-51.

[14]Yan H，Liang C，Yang L，et al. In vitro and ex vitro rooting of Siratia grosvenorii，a traditional medicinal plant[J]. Acta Physiologiae Plantarum，2010，32（1）：115-120.

[15]Jova M C，Kosky R G，Pérez M B，et al. Production of yam microtubers using a temporary immersion system[J]. Plant Cell，Tissue and Organ Culture，2005，83（1）：103-107.

[16]Hahn E J，Paek K Y. Multiplication of Chrysanthemum shoots in bioreactors as affected by culture method and inoculation density of single node stems[M]//Liquid Culture Systems for in vitro Plant Propagation，2005：143-153.

[17]徐志剛. 組培微環(huán)境與規(guī)?；缭O(shè)施環(huán)境調(diào)控的研究[D]. 南京：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)，2002：124.

[18]左應(yīng)梅，陳秋波，鄧權(quán)權(quán)，等. 土壤水分、光照和空氣濕度對(duì)木薯氣孔導(dǎo)度的影響[J]. 生態(tài)學(xué)雜志，2011，30（4）：689-693.

氣孔作為植物與外界環(huán)境進(jìn)行氣體交換（主要是二氧化碳和水蒸氣）的重要通道，在調(diào)節(jié)植物光合作用、蒸騰作用以及水分利用中扮演著至關(guān)重要的角色。植物通過(guò)蒸騰散失的水分中有90%以上是通過(guò)氣孔散失的，植物通過(guò)改變氣孔數(shù)目和開(kāi)閉程度而調(diào)節(jié)葉片的蒸騰速率和水勢(shì)。當(dāng)葉片水勢(shì)降至某一閾值時(shí)會(huì)引起氣孔關(guān)閉，而氣孔關(guān)閉反過(guò)來(lái)又會(huì)減少水分散失并有助于葉片水勢(shì)恢復(fù)。本試驗(yàn)中液體間歇浸沒(méi)培養(yǎng)和傳統(tǒng)固體培養(yǎng)相比容器內(nèi)濕度不同，液體間歇浸沒(méi)培養(yǎng)的環(huán)境濕度大于傳統(tǒng)固體培養(yǎng)，受此影響，液體間歇浸沒(méi)培養(yǎng)下氣孔開(kāi)度較大，氣孔面積也較大，氣孔頻度也最大。左應(yīng)梅等對(duì)木薯的盆栽試驗(yàn)研究表明，空氣相對(duì)濕度與氣孔導(dǎo)度之間呈極顯著正相關(guān)，當(dāng)土壤相對(duì)含水量較低時(shí)，土壤相對(duì)含水量是影響氣孔導(dǎo)度的主導(dǎo)因子[18]?？紤]到植物進(jìn)行光合作用和干物質(zhì)積累所需要的二氧化碳也是通過(guò)氣孔而獲得，而在組培生產(chǎn)過(guò)程中，培養(yǎng)容器內(nèi)氣體成分復(fù)雜，因此影響液體間歇浸沒(méi)培養(yǎng)下氣孔開(kāi)閉的主要因素是容器內(nèi)濕度還是其他因素還需要進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn)：

[1]吳麗君. 紅葉石楠推廣應(yīng)用現(xiàn)狀及前景分析[J]. 福建林業(yè)科技，2009，36（2）：145-148，161.

[2]王真真，王衛(wèi)娜，徐國(guó)超，等. 紅葉石楠研究現(xiàn)狀及發(fā)展前景[J]. 黑龍江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，6（6）：150-153.

[3]陸小清，李云龍，毛志濱，等. 紅葉石楠扦插試驗(yàn)[J]. 江蘇林業(yè)科技，2005，32（3）：22-23，43.

[4]趙曉偉，黃美娟，黃海泉. 彩葉樹(shù)種紅葉石楠的開(kāi)發(fā)與應(yīng)用[J]. 北方園藝，2008（6）：161-163.

[5]Adelberg J. Efficiency in thin-film liquid system for Hosta micropropagation[J]. Plant Cell，Tissue and Organ Culture，2005，81（3）：359-368.

[6]Aragón C E，Escalona M，Rodriguez R，et al. Effect of sucrose，light，and carbon dioxide on plantain micropropagation in temporary immersion bioreactors[J]. In Vitro Cellular & Developmental Biology-Plant，2010，46（1）：89-94.

[7]Kmrinen-Karppinen T，Virtanen E，Rokka V M，et al. Novel bioreactor technology for mass propagation of potato microtubers[J]. Plant Cell，Tissue and Organ Culture，2010，101（2）：245-249.

[8]廉美蘭，樸炫春，王穎，等. 間歇浸沒(méi)式生物反應(yīng)器在辰星草培養(yǎng)苗擴(kuò)繁中的應(yīng)用[J]. 園藝學(xué)報(bào)，2004，31（4）：532-532.

[9]劉麗敏，譚裕模，李松，等. 利用間歇浸沒(méi)式生物反應(yīng)器進(jìn)行甘蔗脫毒苗快繁研究[J]. 西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2009，22（4）：1038-1041.

[10]許建民，王永平，王宇. 馬鈴薯組培苗液體間歇浸沒(méi)培養(yǎng)初探[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013，41（1）：53-55.

[11]賈明良，張本厚，高偉平，等. 三葉半夏[Pinellia ternata （Thunb.） Breit]的間歇浸沒(méi)培養(yǎng)[J]. 中國(guó)生物工程雜志，2012，32（11）：49-54.

[12]舒展，張曉素，陳娟，等. 葉綠素含量測(cè)定的簡(jiǎn)化[J]. 植物生理學(xué)通訊，2010（4）：399-402.

[13]許建民，王永平. 間歇浸沒(méi)培養(yǎng)條件下硝酸銀對(duì)草莓組培苗生長(zhǎng)的影響[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013，41（10）：50-51.

[14]Yan H，Liang C，Yang L，et al. In vitro and ex vitro rooting of Siratia grosvenorii，a traditional medicinal plant[J]. Acta Physiologiae Plantarum，2010，32（1）：115-120.

[15]Jova M C，Kosky R G，Pérez M B，et al. Production of yam microtubers using a temporary immersion system[J]. Plant Cell，Tissue and Organ Culture，2005，83（1）：103-107.

[16]Hahn E J，Paek K Y. Multiplication of Chrysanthemum shoots in bioreactors as affected by culture method and inoculation density of single node stems[M]//Liquid Culture Systems for in vitro Plant Propagation，2005：143-153.

[17]徐志剛. 組培微環(huán)境與規(guī)?；缭O(shè)施環(huán)境調(diào)控的研究[D]. 南京：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)，2002：124.

[18]左應(yīng)梅，陳秋波，鄧權(quán)權(quán)，等. 土壤水分、光照和空氣濕度對(duì)木薯氣孔導(dǎo)度的影響[J]. 生態(tài)學(xué)雜志，2011，30（4）：689-693.