周振 周能
摘要:采用三氯化鈦光度法測定苦瓜(Balsm pear)中草酸含量,最佳測定條件是顯色體系為pH 1.5~1.7,檢測波長403 nm,顯色時間10 min。用沸水或鹽水處理3 min可以去除一定量的草酸,平均去除率分別為39.76%和37.41%,且用沸水的平均去除率更高一些。
關(guān)鍵詞:苦瓜(Balsm pear);草酸;分光光度法;測定
中圖分類號:Q815 文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A 文章編號:0439-8114(2014)06-1391-04
Effects of Pre-Treatment of Cooking on Oxalate Content in Balsm pear
ZHOU Zhen,ZHOU Neng
(Department of Chemistry-Material, Yulin Normal University, Yulin, Guangxi 537000)
Abstract: The oxalate contents in bitter gourd were detected with titanium trichloride spectrophotometry. The optimal conditions of detection were pH from 1.5 to 1.7, detection wavelength of 403 nm, the coloration time of 10 min. The oxalate was removed by soaked 3 min in boiling water and salt water. The average removal efficiency was 39.76% and 37.41%, respectively.
Key words: Balsm pear; oxalate; spectrophotometry; detection
苦瓜(Balsm pear)不但營養(yǎng)豐富,而且有很高的藥用價值,苦瓜產(chǎn)品的開發(fā)與利用日益受到國內(nèi)外的普遍重視[1-4]。但是苦瓜中草酸含量偏高,處理不當(dāng)對人體營養(yǎng)具有很大危害。研究表明,利用三氯化鈦等與草酸的顯色反應(yīng)可定量分析草酸[5-10]。應(yīng)用分光光度法測定苦瓜中的草酸含量,研究了這種方法用于苦瓜汁中草酸測定的可行性及烹飪前用開水和鹽處理苦瓜,對草酸去除的影響;為很好地調(diào)控苦瓜中草酸的含量,降低了草酸對人體的危害,提供試驗科學(xué)依據(jù)。
1 材料與方法
1.1 材料與試劑
草酸鈉(分析純)、三氯化鈦(分析純)、鹽酸(分析純),西隴化工廠有限公司。
1.2 儀器與設(shè)備
TU-(1901)型雙光束紫外分光光度計,北京普析通用儀器有限責(zé)任公司;WFJ2100 型可見分光光度計,[尤尼柯(上海)儀器有限公司];SHB-B95型循環(huán)水式多用正空泵(鄭州長城科工貿(mào)有限公司)。
1.3 方法
1.3.1 草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)液的配制 0.166 0 mol/L草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)儲備液:準(zhǔn)確稱取分析純草酸鈉5.561 g,用100 mL的去離子水溶解,定容至250 mL,搖勻,備用。
1.3.2 測定方法 量取0.016 6 mol/L的草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液12.5 mL于25 mL的比色管中,先加入1%三氯化鈦溶液1.8 mL,然后再6 mol/L HCl 0.125 mL,加去離子水稀釋至刻度,搖勻,靜置10 min。以1%三氯化鈦和6 mol/L HCl作參比,在波長403 nm處測量吸光度(A)。
2 結(jié)果與分析
2.1 吸收曲線
取0.016 6 mol/L的草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液12.5 mL于25 mL的比色管中,先加入1%三氯化鈦溶液1.8 mL,然后加6 mol/L HCl 0.125 mL,最后加去離子水稀釋至刻度,搖勻,靜置10 min。以三氯化鈦和HCl作參比,用TU-(1901)型雙光束紫外分光光度計在350~450 nm下掃描。結(jié)果表明,在波長為403 nm處吸收最大,因此選擇403 nm作為測定波長。
2.2 溶液pH的影響
試驗結(jié)果表明,當(dāng)溶液pH為1.5~1.7時,加入0.125 mL 6 mol/L HCl時吸光度高且穩(wěn)定;隨HCl加入量的增加,吸光度降低。故6 mol/L HCl的最佳加入量為0.125 mL。
2.3 三氯化鈦用量的影響
對三氯化鈦的用量進行了考察,結(jié)果見圖1。由圖1可看出,吸光度隨著三氯化鈦加入量的增加呈先增大后減小的趨勢,適宜用量在1.6~2.0 mL,最大值在三氯化鈦用量為1.8 mL時出現(xiàn)。故確定三氯化鈦的用量為1.80 mL。
2.4 顯色時間對吸光度的影響
取12.5 mL 0.016 6 mol/L的草酸鈉標(biāo)樣于25 mL的比色管,加入1.8 mL 1%三氯化鈦溶液和0.125 mL 6 mol/L HCl,加去離子水稀釋至刻度,搖勻,以三氯化鈦和HCl作參比,在403 nm波長處測定吸光度隨時間的變化情況,如圖4。由圖4可知,吸光度隨顯色時間的增加而減少,到9 min時吸光度保持穩(wěn)定,故顯色時間確定為10 min。
2.5 顯色溫度對吸光度的影響
將草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)液用水浴預(yù)熱到30 ℃以上,再進行顯色反應(yīng),在較短的時間內(nèi)溶液退色而變渾濁,溫度越高變化越快,以致無法測定其吸光度值。因此顯色反應(yīng)以在室溫25 ℃左右進行為宜。
2.6 雜酸對吸光度的影響
食品原料中含有的有機酸品種是很多的,常見的有檸檬酸、酒石酸、蘋果酸、醋酸和乳酸等,為了分析本測定方法用于食品原料草酸含量測定的可行性,對一些雜酸進行了研究。分別取0.016 6 mol/L的草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液12.5 mL于3支比色管中,然后分別加入0.332 mol/L的檸檬酸、醋酸溶液,再加入1%三氯化鈦1.8 mL和6 mol/L HCl 0.125 mL,加去離子水稀釋至刻線,搖勻,顯色10 min后在403 nm波長下測定反應(yīng)液的吸光度。
從表1中可以看出,即使在雜酸濃度(0.332 mol/L)為草酸濃度(0.016 6 mol/L)的20倍時,對本測定方法的影響程度也是很小的。
2.7 干擾離子的影響
分別取0.016 6 mol/L的草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液12.5 mL于2支25 mL的比色管,然后分別加入0.332 mol/L的CaCl2、MgCl2溶液,再加入1%的三氯化鈦1.8 mL和6 mol/L HCl 0.125 mL,加去離子水稀釋至刻線,搖勻,顯色10 min后在403 nm波長下測定其吸光度。
由表2 中可以看出,鈉離子和鎂離子的濃度(0.332 mol/L)為草酸濃度(0.016 6 mol/L)的20倍時,對本測定方法的影響很小。
2.8 標(biāo)準(zhǔn)曲線的測定
準(zhǔn)確配制濃度在0.001~0.012 mol/L的草酸鈉溶液,在室溫條件下,分別吸取12.5 mL草酸鈉標(biāo)樣,添加1.80 mL 1%三氯化鈦和0.125 mL 6 mol/L HCl,顯色10 min后在403 nm波長下檢測吸光度。繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖3。
由表3可知,標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程為Y=-0.040 13+0.045 46X,R2=0.993 9,線性相關(guān)性較好,最低檢測限為0.001 mol/L,測量范圍為0.001~0.012 mol。
2.9 精密度試驗
分別取12.5 mL已知濃度為0.016 6 mol/L的草酸鈉溶液于4支25 mL的比色皿中,然后再分別加入1.80 mL 1%三氯化鈦和0.125 mL 6 mol/L HCl,加去離子水稀釋至刻度,搖勻,放置10 min后,在分光光度計上于403 nm測定各試液的吸光度。由表3可知,4次測定的平均值為0.019 3 mol/L,相對平均偏差為3.1%,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.6%。
3 烹飪前處理對苦瓜中草酸含量的影響
3.1 苦瓜中草酸含量的測定
稱取新鮮的已剔去了瓜瓤和種子的苦瓜100 g,用攪拌機攪碎,再用SHB-III型循環(huán)水式多用真空泵進行抽濾,將得到的苦瓜汁定容于250 mL的容量瓶。取100 mL的苦瓜汁于燒杯,加入8 g活性炭,在常溫下脫色30 min,然后用80-2型離心機分離活性炭,離心機轉(zhuǎn)速為3 000 r/min,時間為15 min。一次脫色不完全,再用同樣的方法進行二次脫色,待其溶液呈無色或乳白色為此,備用。
移取脫色好的苦瓜汁各3 mL于25 mL的5支比色管中,加入1%三氯化鈦溶液1.8 mL和6 mol/L HCl 0.125 mL,加去離子水稀釋至刻度,搖勻,靜置10 min,在分光光度計上于403 nm處測定各試液的吸光度,并計算其相應(yīng)的濃度。
由表4可知,被測苦瓜汁中的草酸平均濃度為0.003 24 mol/L,苦瓜中草酸平均含量為5.94 mg/g。
3.2 回收試驗
移取脫色好的苦瓜汁各3 mL于25 mL的6支比色管中,其中5支比色管分別加入0.001、0.002、0.003、0.004、0.005 mol/L草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液各12.5 mL,加入1%三氯化鈦溶液1.8 mL和6 mol/L HCl 0.125 mL,加去離子水稀釋至刻度,搖勻,靜置10 min,在分光光度計上于403 nm處測定各試液的吸光度,并計算其回收率。
由表5可知,用該種方法測定草酸鈉的回收率在97%~104.5%,平均回收率為101.5%,回收效果較好。
3.3 用沸水和鹽浸泡對苦瓜中草酸含量的影響
3.3.1 用100 ℃的沸水處理苦瓜 稱取新鮮的已剔去了瓜瓤和種子的苦瓜100 g,放入100 ℃的沸水浸泡3 min,然后用攪拌機攪碎,再用SHB-III型循環(huán)水式多用真空泵進行抽濾,將得到的苦瓜汁定容于250 mL的容量瓶。取100 mL的苦瓜汁于燒杯,加入8 g的活性炭,在常溫下脫色30 min,然后分離活性炭,轉(zhuǎn)速為3 000 r/min,時間為15 min。一次脫色不完全,再用同樣的方法進行二次脫色,待其溶液呈無色或乳白色為止,備用。
移取脫色好的苦瓜汁各3 mL于25 mL的6支比色管中,加入1%三氯化鈦溶液1.80 mL和6 mol/L HCl 0.125 mL,加去離子水稀釋至刻度,搖勻,靜置10 min,在分光光度計上于403 nm處測定各試液的吸光度,并計算苦瓜中草酸的濃度和去除率。
由表6可知,用沸水來浸泡苦瓜,可以去除一定量的草酸,去除率在21.30%~47.53%,平均去除率為39.76%。
3.3.2 用鹽水處理苦瓜 稱取新鮮的已剔去了瓜瓤和種子的苦瓜100 g,放入鹽水中浸泡3 min后再用蒸餾水洗滌,然后用攪拌機攪碎,再用SHB-III循環(huán)水式多用真空泵進行抽濾,將得到的苦瓜汁定容于250 mL的容量瓶。取100 mL的苦瓜汁于燒杯,加入8 g的活性炭,在常溫下脫色30 min,然后用心機分離活性炭,轉(zhuǎn)速為3 000 r/min,時間為15 min。一次脫色不完全,再用同樣的方法進行二次脫色,待其溶液呈無色或乳白色為止,備用。
移取脫色好的苦瓜汁各3 mL于25 mL的6支比色管中,加入1%三氯化鈦溶液1.8 mL和1∶1的鹽酸0.125 mL,加蒸餾水稀釋至刻度,搖勻,放置10 min,在分光光度計上于403 nm處測定各試液的吸光度,并計算苦瓜中草酸的濃度和去除率。
由表7可知,用鹽水來浸泡苦瓜也可以去除一定量的草酸,去除率23.77%~50.93%,平均去除率為37.41%,比用沸水處理的平均去除率低一些。
4 結(jié)論
采用三氯化鈦光度法測定苦瓜中草酸含量,測定方法的精密度:相對平均偏差為3.1%,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.6%,回收率為97%~104.5%。每克苦瓜中平均含草酸5.94 mg。用鹽或用100 ℃的沸水處理苦瓜,可以去除一定量的草酸,用100 ℃的沸水處理苦瓜的平均去除率為39.76%;用鹽處理苦瓜的平均去除率為37.41%,用沸水的平均去除率更高一些。
參考文獻(xiàn):
[1] 袁 仲,侯雪梅.苦瓜的營養(yǎng)價值與保健作用[J].農(nóng)產(chǎn)品加工·學(xué)刊,2005(5):49-51.
[2] 王爭光,俞頌東.苦瓜的有效成分和藥用價值[J].浙江中醫(yī)雜志,2003(10):448-450.
[3] 曾正明,況浩池,楊躍華,等.苦瓜的研究進展及展望[J].貴州農(nóng)業(yè)科學(xué),2007,35(2):124-126.
[4] 朱新產(chǎn),張庭榮,宋玉芹.苦瓜的營養(yǎng)成分研究[J].廣西科學(xué),2003,10(3):238-240.
[5] 何春燕,黃敏華,李惠萍.比色法測定啤酒中的草酸含量[J].啤酒科技,2006(11):13-15.
[6] NOONAN S C,SAVAGE G P.Oxalate content of foods and its effect on humans[J]. Asia Pacific J Clin Nutr,1999,8(1):64-74.
[7] 劉叢力.草酸檢測方法的研究進展[J].海洋水產(chǎn)研究所,2004, 10(5):93-96.
[8] HODGKINSON A,WILLAMS A. An improved colorimetric procedure forurine oxalate[J].Clin Chim Acta,1972,36(1):127-132.
[9] 李天瑞,楊松青.草酸根的分光光度法測定[J].礦冶工程,1994, 14(2):59-61
[10] 張繼民,鐘成義,駱春華.草酸的分光光度法測定[J].安徽機電學(xué)院學(xué)報,1997,12(4):31-35.
從表1中可以看出,即使在雜酸濃度(0.332 mol/L)為草酸濃度(0.016 6 mol/L)的20倍時,對本測定方法的影響程度也是很小的。
2.7 干擾離子的影響
分別取0.016 6 mol/L的草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液12.5 mL于2支25 mL的比色管,然后分別加入0.332 mol/L的CaCl2、MgCl2溶液,再加入1%的三氯化鈦1.8 mL和6 mol/L HCl 0.125 mL,加去離子水稀釋至刻線,搖勻,顯色10 min后在403 nm波長下測定其吸光度。
由表2 中可以看出,鈉離子和鎂離子的濃度(0.332 mol/L)為草酸濃度(0.016 6 mol/L)的20倍時,對本測定方法的影響很小。
2.8 標(biāo)準(zhǔn)曲線的測定
準(zhǔn)確配制濃度在0.001~0.012 mol/L的草酸鈉溶液,在室溫條件下,分別吸取12.5 mL草酸鈉標(biāo)樣,添加1.80 mL 1%三氯化鈦和0.125 mL 6 mol/L HCl,顯色10 min后在403 nm波長下檢測吸光度。繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖3。
由表3可知,標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程為Y=-0.040 13+0.045 46X,R2=0.993 9,線性相關(guān)性較好,最低檢測限為0.001 mol/L,測量范圍為0.001~0.012 mol。
2.9 精密度試驗
分別取12.5 mL已知濃度為0.016 6 mol/L的草酸鈉溶液于4支25 mL的比色皿中,然后再分別加入1.80 mL 1%三氯化鈦和0.125 mL 6 mol/L HCl,加去離子水稀釋至刻度,搖勻,放置10 min后,在分光光度計上于403 nm測定各試液的吸光度。由表3可知,4次測定的平均值為0.019 3 mol/L,相對平均偏差為3.1%,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.6%。
3 烹飪前處理對苦瓜中草酸含量的影響
3.1 苦瓜中草酸含量的測定
稱取新鮮的已剔去了瓜瓤和種子的苦瓜100 g,用攪拌機攪碎,再用SHB-III型循環(huán)水式多用真空泵進行抽濾,將得到的苦瓜汁定容于250 mL的容量瓶。取100 mL的苦瓜汁于燒杯,加入8 g活性炭,在常溫下脫色30 min,然后用80-2型離心機分離活性炭,離心機轉(zhuǎn)速為3 000 r/min,時間為15 min。一次脫色不完全,再用同樣的方法進行二次脫色,待其溶液呈無色或乳白色為此,備用。
移取脫色好的苦瓜汁各3 mL于25 mL的5支比色管中,加入1%三氯化鈦溶液1.8 mL和6 mol/L HCl 0.125 mL,加去離子水稀釋至刻度,搖勻,靜置10 min,在分光光度計上于403 nm處測定各試液的吸光度,并計算其相應(yīng)的濃度。
由表4可知,被測苦瓜汁中的草酸平均濃度為0.003 24 mol/L,苦瓜中草酸平均含量為5.94 mg/g。
3.2 回收試驗
移取脫色好的苦瓜汁各3 mL于25 mL的6支比色管中,其中5支比色管分別加入0.001、0.002、0.003、0.004、0.005 mol/L草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液各12.5 mL,加入1%三氯化鈦溶液1.8 mL和6 mol/L HCl 0.125 mL,加去離子水稀釋至刻度,搖勻,靜置10 min,在分光光度計上于403 nm處測定各試液的吸光度,并計算其回收率。
由表5可知,用該種方法測定草酸鈉的回收率在97%~104.5%,平均回收率為101.5%,回收效果較好。
3.3 用沸水和鹽浸泡對苦瓜中草酸含量的影響
3.3.1 用100 ℃的沸水處理苦瓜 稱取新鮮的已剔去了瓜瓤和種子的苦瓜100 g,放入100 ℃的沸水浸泡3 min,然后用攪拌機攪碎,再用SHB-III型循環(huán)水式多用真空泵進行抽濾,將得到的苦瓜汁定容于250 mL的容量瓶。取100 mL的苦瓜汁于燒杯,加入8 g的活性炭,在常溫下脫色30 min,然后分離活性炭,轉(zhuǎn)速為3 000 r/min,時間為15 min。一次脫色不完全,再用同樣的方法進行二次脫色,待其溶液呈無色或乳白色為止,備用。
移取脫色好的苦瓜汁各3 mL于25 mL的6支比色管中,加入1%三氯化鈦溶液1.80 mL和6 mol/L HCl 0.125 mL,加去離子水稀釋至刻度,搖勻,靜置10 min,在分光光度計上于403 nm處測定各試液的吸光度,并計算苦瓜中草酸的濃度和去除率。
由表6可知,用沸水來浸泡苦瓜,可以去除一定量的草酸,去除率在21.30%~47.53%,平均去除率為39.76%。
3.3.2 用鹽水處理苦瓜 稱取新鮮的已剔去了瓜瓤和種子的苦瓜100 g,放入鹽水中浸泡3 min后再用蒸餾水洗滌,然后用攪拌機攪碎,再用SHB-III循環(huán)水式多用真空泵進行抽濾,將得到的苦瓜汁定容于250 mL的容量瓶。取100 mL的苦瓜汁于燒杯,加入8 g的活性炭,在常溫下脫色30 min,然后用心機分離活性炭,轉(zhuǎn)速為3 000 r/min,時間為15 min。一次脫色不完全,再用同樣的方法進行二次脫色,待其溶液呈無色或乳白色為止,備用。
移取脫色好的苦瓜汁各3 mL于25 mL的6支比色管中,加入1%三氯化鈦溶液1.8 mL和1∶1的鹽酸0.125 mL,加蒸餾水稀釋至刻度,搖勻,放置10 min,在分光光度計上于403 nm處測定各試液的吸光度,并計算苦瓜中草酸的濃度和去除率。
由表7可知,用鹽水來浸泡苦瓜也可以去除一定量的草酸,去除率23.77%~50.93%,平均去除率為37.41%,比用沸水處理的平均去除率低一些。
4 結(jié)論
采用三氯化鈦光度法測定苦瓜中草酸含量,測定方法的精密度:相對平均偏差為3.1%,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.6%,回收率為97%~104.5%。每克苦瓜中平均含草酸5.94 mg。用鹽或用100 ℃的沸水處理苦瓜,可以去除一定量的草酸,用100 ℃的沸水處理苦瓜的平均去除率為39.76%;用鹽處理苦瓜的平均去除率為37.41%,用沸水的平均去除率更高一些。
參考文獻(xiàn):
[1] 袁 仲,侯雪梅.苦瓜的營養(yǎng)價值與保健作用[J].農(nóng)產(chǎn)品加工·學(xué)刊,2005(5):49-51.
[2] 王爭光,俞頌東.苦瓜的有效成分和藥用價值[J].浙江中醫(yī)雜志,2003(10):448-450.
[3] 曾正明,況浩池,楊躍華,等.苦瓜的研究進展及展望[J].貴州農(nóng)業(yè)科學(xué),2007,35(2):124-126.
[4] 朱新產(chǎn),張庭榮,宋玉芹.苦瓜的營養(yǎng)成分研究[J].廣西科學(xué),2003,10(3):238-240.
[5] 何春燕,黃敏華,李惠萍.比色法測定啤酒中的草酸含量[J].啤酒科技,2006(11):13-15.
[6] NOONAN S C,SAVAGE G P.Oxalate content of foods and its effect on humans[J]. Asia Pacific J Clin Nutr,1999,8(1):64-74.
[7] 劉叢力.草酸檢測方法的研究進展[J].海洋水產(chǎn)研究所,2004, 10(5):93-96.
[8] HODGKINSON A,WILLAMS A. An improved colorimetric procedure forurine oxalate[J].Clin Chim Acta,1972,36(1):127-132.
[9] 李天瑞,楊松青.草酸根的分光光度法測定[J].礦冶工程,1994, 14(2):59-61
[10] 張繼民,鐘成義,駱春華.草酸的分光光度法測定[J].安徽機電學(xué)院學(xué)報,1997,12(4):31-35.
從表1中可以看出,即使在雜酸濃度(0.332 mol/L)為草酸濃度(0.016 6 mol/L)的20倍時,對本測定方法的影響程度也是很小的。
2.7 干擾離子的影響
分別取0.016 6 mol/L的草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液12.5 mL于2支25 mL的比色管,然后分別加入0.332 mol/L的CaCl2、MgCl2溶液,再加入1%的三氯化鈦1.8 mL和6 mol/L HCl 0.125 mL,加去離子水稀釋至刻線,搖勻,顯色10 min后在403 nm波長下測定其吸光度。
由表2 中可以看出,鈉離子和鎂離子的濃度(0.332 mol/L)為草酸濃度(0.016 6 mol/L)的20倍時,對本測定方法的影響很小。
2.8 標(biāo)準(zhǔn)曲線的測定
準(zhǔn)確配制濃度在0.001~0.012 mol/L的草酸鈉溶液,在室溫條件下,分別吸取12.5 mL草酸鈉標(biāo)樣,添加1.80 mL 1%三氯化鈦和0.125 mL 6 mol/L HCl,顯色10 min后在403 nm波長下檢測吸光度。繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖3。
由表3可知,標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程為Y=-0.040 13+0.045 46X,R2=0.993 9,線性相關(guān)性較好,最低檢測限為0.001 mol/L,測量范圍為0.001~0.012 mol。
2.9 精密度試驗
分別取12.5 mL已知濃度為0.016 6 mol/L的草酸鈉溶液于4支25 mL的比色皿中,然后再分別加入1.80 mL 1%三氯化鈦和0.125 mL 6 mol/L HCl,加去離子水稀釋至刻度,搖勻,放置10 min后,在分光光度計上于403 nm測定各試液的吸光度。由表3可知,4次測定的平均值為0.019 3 mol/L,相對平均偏差為3.1%,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.6%。
3 烹飪前處理對苦瓜中草酸含量的影響
3.1 苦瓜中草酸含量的測定
稱取新鮮的已剔去了瓜瓤和種子的苦瓜100 g,用攪拌機攪碎,再用SHB-III型循環(huán)水式多用真空泵進行抽濾,將得到的苦瓜汁定容于250 mL的容量瓶。取100 mL的苦瓜汁于燒杯,加入8 g活性炭,在常溫下脫色30 min,然后用80-2型離心機分離活性炭,離心機轉(zhuǎn)速為3 000 r/min,時間為15 min。一次脫色不完全,再用同樣的方法進行二次脫色,待其溶液呈無色或乳白色為此,備用。
移取脫色好的苦瓜汁各3 mL于25 mL的5支比色管中,加入1%三氯化鈦溶液1.8 mL和6 mol/L HCl 0.125 mL,加去離子水稀釋至刻度,搖勻,靜置10 min,在分光光度計上于403 nm處測定各試液的吸光度,并計算其相應(yīng)的濃度。
由表4可知,被測苦瓜汁中的草酸平均濃度為0.003 24 mol/L,苦瓜中草酸平均含量為5.94 mg/g。
3.2 回收試驗
移取脫色好的苦瓜汁各3 mL于25 mL的6支比色管中,其中5支比色管分別加入0.001、0.002、0.003、0.004、0.005 mol/L草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液各12.5 mL,加入1%三氯化鈦溶液1.8 mL和6 mol/L HCl 0.125 mL,加去離子水稀釋至刻度,搖勻,靜置10 min,在分光光度計上于403 nm處測定各試液的吸光度,并計算其回收率。
由表5可知,用該種方法測定草酸鈉的回收率在97%~104.5%,平均回收率為101.5%,回收效果較好。
3.3 用沸水和鹽浸泡對苦瓜中草酸含量的影響
3.3.1 用100 ℃的沸水處理苦瓜 稱取新鮮的已剔去了瓜瓤和種子的苦瓜100 g,放入100 ℃的沸水浸泡3 min,然后用攪拌機攪碎,再用SHB-III型循環(huán)水式多用真空泵進行抽濾,將得到的苦瓜汁定容于250 mL的容量瓶。取100 mL的苦瓜汁于燒杯,加入8 g的活性炭,在常溫下脫色30 min,然后分離活性炭,轉(zhuǎn)速為3 000 r/min,時間為15 min。一次脫色不完全,再用同樣的方法進行二次脫色,待其溶液呈無色或乳白色為止,備用。
移取脫色好的苦瓜汁各3 mL于25 mL的6支比色管中,加入1%三氯化鈦溶液1.80 mL和6 mol/L HCl 0.125 mL,加去離子水稀釋至刻度,搖勻,靜置10 min,在分光光度計上于403 nm處測定各試液的吸光度,并計算苦瓜中草酸的濃度和去除率。
由表6可知,用沸水來浸泡苦瓜,可以去除一定量的草酸,去除率在21.30%~47.53%,平均去除率為39.76%。
3.3.2 用鹽水處理苦瓜 稱取新鮮的已剔去了瓜瓤和種子的苦瓜100 g,放入鹽水中浸泡3 min后再用蒸餾水洗滌,然后用攪拌機攪碎,再用SHB-III循環(huán)水式多用真空泵進行抽濾,將得到的苦瓜汁定容于250 mL的容量瓶。取100 mL的苦瓜汁于燒杯,加入8 g的活性炭,在常溫下脫色30 min,然后用心機分離活性炭,轉(zhuǎn)速為3 000 r/min,時間為15 min。一次脫色不完全,再用同樣的方法進行二次脫色,待其溶液呈無色或乳白色為止,備用。
移取脫色好的苦瓜汁各3 mL于25 mL的6支比色管中,加入1%三氯化鈦溶液1.8 mL和1∶1的鹽酸0.125 mL,加蒸餾水稀釋至刻度,搖勻,放置10 min,在分光光度計上于403 nm處測定各試液的吸光度,并計算苦瓜中草酸的濃度和去除率。
由表7可知,用鹽水來浸泡苦瓜也可以去除一定量的草酸,去除率23.77%~50.93%,平均去除率為37.41%,比用沸水處理的平均去除率低一些。
4 結(jié)論
采用三氯化鈦光度法測定苦瓜中草酸含量,測定方法的精密度:相對平均偏差為3.1%,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.6%,回收率為97%~104.5%。每克苦瓜中平均含草酸5.94 mg。用鹽或用100 ℃的沸水處理苦瓜,可以去除一定量的草酸,用100 ℃的沸水處理苦瓜的平均去除率為39.76%;用鹽處理苦瓜的平均去除率為37.41%,用沸水的平均去除率更高一些。
參考文獻(xiàn):
[1] 袁 仲,侯雪梅.苦瓜的營養(yǎng)價值與保健作用[J].農(nóng)產(chǎn)品加工·學(xué)刊,2005(5):49-51.
[2] 王爭光,俞頌東.苦瓜的有效成分和藥用價值[J].浙江中醫(yī)雜志,2003(10):448-450.
[3] 曾正明,況浩池,楊躍華,等.苦瓜的研究進展及展望[J].貴州農(nóng)業(yè)科學(xué),2007,35(2):124-126.
[4] 朱新產(chǎn),張庭榮,宋玉芹.苦瓜的營養(yǎng)成分研究[J].廣西科學(xué),2003,10(3):238-240.
[5] 何春燕,黃敏華,李惠萍.比色法測定啤酒中的草酸含量[J].啤酒科技,2006(11):13-15.
[6] NOONAN S C,SAVAGE G P.Oxalate content of foods and its effect on humans[J]. Asia Pacific J Clin Nutr,1999,8(1):64-74.
[7] 劉叢力.草酸檢測方法的研究進展[J].海洋水產(chǎn)研究所,2004, 10(5):93-96.
[8] HODGKINSON A,WILLAMS A. An improved colorimetric procedure forurine oxalate[J].Clin Chim Acta,1972,36(1):127-132.
[9] 李天瑞,楊松青.草酸根的分光光度法測定[J].礦冶工程,1994, 14(2):59-61
[10] 張繼民,鐘成義,駱春華.草酸的分光光度法測定[J].安徽機電學(xué)院學(xué)報,1997,12(4):31-35.