王傳生，安永宏，許佳琳，張 穎，王 昭，呂瑞芳，胡建功

(1.承德護(hù)理職業(yè)學(xué)院病理教研室，河北 承德 067000 2.天津中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院病理科，天津 300150)

胃癌是人類最常見的惡性腫瘤之一，位居癌癥死因的第二位。隨著內(nèi)鏡技術(shù)的發(fā)展，胃粘膜活檢在胃粘膜疾病的確診和胃癌的早期診斷中發(fā)揮著越來(lái)越重要的作用。表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)家族屬于酪氨酸激酶受體家族，在許多腫瘤中過表達(dá)，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)失控和惡性程度增加。為觀察EGFR在胃粘膜活檢病變組織中的表達(dá)意義，探討EGFR在胃癌發(fā)生發(fā)展中的作用，及對(duì)胃粘膜活檢組織的診斷意義，本研究檢測(cè)了胃粘膜活檢不同病變組織中EGFR的表達(dá)。

1 材料與方法

1.1 對(duì)象：選取胃鏡活檢組織，包括10例正常胃粘膜上皮、16例胃上皮瘤樣病變(7例胃底腺息肉、9例增生性息肉)、19例胃上皮內(nèi)瘤(低高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變分別為13例、7例)及47例胃腺癌組織。胃癌組男28例，女19例;小于50歲13例，50歲以上34例;高、中分化15例，低分化32例。所有病例均經(jīng)病理診斷證實(shí)，為初次活檢診斷病例，所有病例均未做過放化療。

1.2 檢測(cè)方法：鼠抗人EGFR單克隆抗體，即用型免疫組化試劑盒，購(gòu)自廣州深達(dá)生物技術(shù)有限公司。所有標(biāo)本均經(jīng)10%中性福爾馬林溶液及時(shí)固定。采用免疫組化iVision二步法，具體操作按說明書進(jìn)行。DAB顯色，蘇木素復(fù)染，脫水封片。以PBS代替一抗作為陰性對(duì)照，以已知陽(yáng)性切片作為陽(yáng)性對(duì)照。

1.3 結(jié)果判定：光學(xué)顯微鏡下觀察：以細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞膜出現(xiàn)棕黃色顆粒視為EGFR的陽(yáng)性著色。染色結(jié)果以表達(dá)陽(yáng)性率的形式表示。選取細(xì)胞分布均勻的視野，計(jì)數(shù)每個(gè)高倍視野中陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)與細(xì)胞總數(shù)，每例計(jì)數(shù)3個(gè)高倍視野，計(jì)算其中平均陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)，以百分?jǐn)?shù)表示。即表達(dá)陽(yáng)性率=(陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)/細(xì)胞總數(shù))×100%。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，率的比較采用方差分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 EGFR在胃粘膜組織中的表達(dá)：在正常胃粘膜上皮、上皮瘤樣病變、上皮內(nèi)瘤及腺癌組織中，EGFR的表達(dá)陽(yáng)性率分別為6.56 ± 2.21%、10.25 ± 3.59%、36.37 ± 4.80%、70.47 ± 7.78%，在胃上皮內(nèi)瘤及腺癌組顯著高于正常胃粘膜上皮及上皮瘤樣病變組(P＜0.05，P＜0.01)，腺癌組顯著高于上皮內(nèi)瘤組(P＜0.05)，在正常胃粘膜上皮、上皮瘤樣病變組中，差異無(wú)顯著性(P＞0.05)。EGFR的表達(dá)陽(yáng)性率見表1。

表1 EGFR在胃粘膜組織中的表達(dá)率(%，±s)

表1 EGFR在胃粘膜組織中的表達(dá)率(%，±s)

*與正常粘膜比較，△與正常粘膜及上皮瘤樣病變比較，☆與上皮內(nèi)瘤比較

組別n EGFR P正常粘膜10 6.56 ±2.21上皮瘤樣病變＜0.05 16 10.25 ±3.59 * ﹥ 0.05上皮內(nèi)瘤 20 36.37±4.80 △ ＜0.05腺癌 47 70.47 ±7.78△☆△ ＜0.01，☆

表2 EGFR表達(dá)胃癌臨床病理特征的關(guān)系(±s)

表2 EGFR表達(dá)胃癌臨床病理特征的關(guān)系(±s)

臨床病理因素 n (%)p性別男28 68.03 ±8.69女19 74.07 ±9.38 ﹥ 0.05年齡(歲)≥50 34 69.81 ±8.67＜50 13 72.19 ±9.56 ﹥0.05分化程度高、中 15 64.92 ±10.35低32 73.07 ±9.77 ﹥0.05

2.2 EGFR表達(dá)與胃癌臨床病理特征的關(guān)系：EGFR表達(dá)陽(yáng)性率在高、中分化組與低分化癌組差異無(wú)顯著性(P＞0.05)，也與患者性別、年齡無(wú)關(guān)(P＞0.05)。EGFR表達(dá)與胃癌臨床病理特征的關(guān)系見表2。

3 討論

EGFR由1186個(gè)氨基酸殘基構(gòu)成，是一種分子量為170kDa的跨膜受體糖蛋白，屬于I型生長(zhǎng)因子受體家族成員，目前已確定其基因定位于染色體7p12。EGFR具有酪氨酸激酶活性，與其配體如EGF、TGF-α等結(jié)合后，可以激活位于細(xì)胞內(nèi)的激酶通路，包括 Y992，Y1045，Y1068，Y1148 and Y1173等激活位點(diǎn)，引起下游信號(hào)傳導(dǎo)的增強(qiáng)，導(dǎo)致細(xì)胞生存和遷徙相關(guān)的基因，c-Myc，cyclin-D，MMP-2和matrilysin的表達(dá)增加，進(jìn)一步發(fā)揮生理效應(yīng)，對(duì)維持細(xì)胞分化、增殖等起著關(guān)鍵作用［1］。一組針對(duì)HP感染兒童的研究中，EGFR在胃竇粘膜表層上皮細(xì)胞表達(dá)顯著增加，在腺細(xì)胞表達(dá)顯著減少，兩者差異顯著，提示EGFR在胃竇粘膜上皮細(xì)胞再生中可能發(fā)揮著重要作用［2］。

研究顯示，EGFR在多種腫瘤中過表達(dá)，可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖，并抑制腫瘤細(xì)胞的凋亡，在腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)、侵襲、血管生成、轉(zhuǎn)移、播散中起到重要作用［3］。目前，已被應(yīng)用于多種腫瘤生物治療的靶向治療研究。有研究顯示，EGFR在胃上皮異型增生組織中的表達(dá)顯著高于正常粘膜組織［4］。EGFR在胃癌組織表達(dá)明顯高于癌旁正常粘膜，并與侵犯深度、臨床分期有關(guān)［5］。EGFR在胃腺癌組織及細(xì)胞中表達(dá)顯著高于癌旁正常組織及正常胃上皮細(xì)胞，并能促進(jìn)淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移［6］。

本研究顯示，在正常胃粘膜上皮、上皮瘤樣病變、上皮內(nèi)瘤及腺癌組織中，EGFR的表達(dá)陽(yáng)性率分別為6.56±2.21%、10.25 ±3.59%、36.37 ±4.80%、70.47 ±7.78%，在胃上皮內(nèi)瘤及腺癌組顯著高于正常胃粘膜上皮及上皮瘤樣病變組(P＜0.05，P＜0.01)，與上述研究結(jié)果相近。表明隨著胃粘膜上皮的增生活躍，EGFR的表達(dá)逐漸增強(qiáng)，在胃癌組織中表達(dá)最強(qiáng)，提示其在胃癌的發(fā)生發(fā)展中可能起到重要作用。EGFR在腺癌組的表達(dá)顯著高于上皮內(nèi)瘤組(P＜0.05)，提示EGFR在胃癌中的功能增強(qiáng)，發(fā)揮了更強(qiáng)的促進(jìn)增殖，抑制凋亡、促進(jìn)腫瘤形成的作用，可能對(duì)于良惡性病變的鑒別也有一定意義。在正常胃粘膜上皮、上皮瘤樣病變組中，差異無(wú)顯著性，提示EGFR在非瘤組織中也發(fā)揮著生理功能，上皮瘤樣病變具有較低的增殖活性，這也與其臨床行為相一致。

本研究結(jié)果顯示，EGFR的表達(dá)與胃癌患者年齡、性別、分化程度等因素?zé)o關(guān)，可能與本組病例數(shù)相對(duì)較少有關(guān)，尚待進(jìn)一步研究。

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