孫 娜 ,齊 巍 ,劉 江 ,李 冉 ,王 茜 ,張一兵 ,秦麗娟 ,楊秀紅
(1.河北聯(lián)合大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院,河北 唐山 063000;2.唐山市第二醫(yī)院,河北 唐山 063000)
迷走神經(jīng)背核(dorsal motor nucleus of the vagus,DMV)是調(diào)節(jié)胃運(yùn)動(dòng)的最基本核團(tuán)之一。支配胃不同部位的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元在DMV的分布存在一定的定位關(guān)系,并已基本得到肯定 。但DMV對(duì)大鼠小腸運(yùn)動(dòng)的影響并未十分明確。本文通過觀察電刺激前后大鼠小腸電活動(dòng)的變化進(jìn)一步研究DMV對(duì)小腸運(yùn)動(dòng)的影響。
健康雄性Wistar大鼠28只,體重180~220 g,由河北聯(lián)合大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。實(shí)驗(yàn)前禁食12~18 h,自由飲水。
1.2.1 制作電刺激DMV模型 用10%氨基甲酸乙酯(1 g/kg)腹腔注射麻醉,麻醉穩(wěn)定后將大鼠俯臥位固定于鼠腦立體定位儀上,根據(jù)Paxinos和Watson大鼠腦立體定位圖譜定位DMV[1]:P:13.24 mm,R:0.7 mm,H:8.15 mm,用牙膠封堵鉆孔固定電極。刺激參數(shù)為:刺激強(qiáng)度1.5 V,頻率60 Hz,波寬0.3 ms,刺激時(shí)間1 min。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,在相應(yīng)核團(tuán)上通以陽極電壓5.0 V,20~30 s,損毀DMV。將大鼠斷頭取腦,置入福爾馬林溶液。2~3 d后,冷卻切片檢查定位是否準(zhǔn)確,不準(zhǔn)確的棄去不列入數(shù)據(jù)分析。
1.2.2 測定方法 打開大鼠腹腔,暴露胃及腸管,自幽門向下10~12 cm處找到空腸上段,用RM6240B型多通道生物信號(hào)采集系統(tǒng)采用雙極法記錄電位變化[2]。先記錄基礎(chǔ)狀態(tài)下腸電活動(dòng)20 min,隨后電刺激DMV,繼續(xù)記錄20 min。記錄參數(shù)為:常數(shù) T:1 s、高頻濾波 F:500 Hz、采樣頻率:1 KHz、走紙速度:2.5 div/s。
各組數(shù)據(jù)均以(x±s)表示,采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。電刺激前后空腸慢波的變化采用自身配對(duì)t檢驗(yàn),快波出現(xiàn)率的變化采用χ2檢驗(yàn)進(jìn)行分析。
表1 電刺激迷走神經(jīng)背核前后10 min內(nèi)大鼠空腸慢波的變化(x±s)
表2 電刺激迷走神經(jīng)背核大鼠空腸快波情況
DMV是一個(gè)重要的內(nèi)臟運(yùn)動(dòng)和內(nèi)臟感覺核團(tuán),它與中樞及外周都存在廣泛的纖維聯(lián)系。胃運(yùn)動(dòng)的相關(guān)神經(jīng)元主要投射到消化道壁內(nèi)神經(jīng)叢和胃腸上段的ICC細(xì)胞(interstitial cell sorcajal)[3]。
ICC細(xì)胞主要分布在胃腸道自主神經(jīng)末梢與平滑肌細(xì)胞之間。肌間神經(jīng)叢周圍的ICC細(xì)胞能夠產(chǎn)生慢波,并通過縫隙連接將慢波傳給平滑肌細(xì)胞,因此胃腸運(yùn)動(dòng)具有自主節(jié)律性[4]。ICC細(xì)胞產(chǎn)生慢波的具體機(jī)制尚不完全清楚,目前認(rèn)為ICC細(xì)胞的起搏作用是通過Ca2+通道產(chǎn)生非選擇性電壓依賴的Ca2+內(nèi)流以及 K+外流形成的[5,6]。
由于胃腸平滑肌的膜電位極不穩(wěn)定,在靜息電位的基礎(chǔ)上會(huì)產(chǎn)生慢波,過去認(rèn)為慢波電位不能直接引起肌肉收縮,但是能觸發(fā)動(dòng)作電位[7,8]。當(dāng)慢波去極化接近或達(dá)到頂峰,在其上產(chǎn)生的前電位去極化到閾電位水平時(shí),就觸發(fā)一個(gè)或一連串的峰電位,進(jìn)一步通過興奮收縮耦聯(lián)引起平滑肌收縮[2]?,F(xiàn)已證明,平滑肌細(xì)胞存在機(jī)械閾和電閾兩個(gè)臨界膜電位值。當(dāng)慢波去極化達(dá)到或超過機(jī)械閾時(shí),可引起細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度增加,激活肌細(xì)胞收縮,且收縮幅度與慢波幅度呈正相關(guān),并不一定和動(dòng)作電位有關(guān)。當(dāng)去極化達(dá)到或超過電閾時(shí),則可引發(fā)動(dòng)作電位使更多的Ca2+內(nèi)流,使收縮進(jìn)一步增強(qiáng),慢波上出現(xiàn)的動(dòng)作電位越多,肌細(xì)胞收縮越強(qiáng)[9,10],慢波具體的離子機(jī)制尚未完全清楚,有待科學(xué)研究的進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)。