董 煜

(大連市食品藥品檢驗所，遼寧 大連 116021)

奮乃靜片含量測定方法的比較

董 煜

(大連市食品藥品檢驗所，遼寧 大連 116021)

目的用高效液相色譜法測定奮乃靜片的含量及有關物質。方法用Tigerkin ODS-3C18色譜柱（4.6 mm×150 mm，5 μm），緩沖液（取冰醋酸28.6 mL，置100 mL量瓶中，在攪拌下加入三乙胺34.8 mL，繼續(xù)攪拌約5 min，加水稀釋至刻度，搖勻，精密量取該溶液10 mL，置1000 mL量瓶中，加水稀釋至刻度）-乙腈-甲醇（52∶40∶8）為流動相，流速：1.0mL/min，檢測波長：254 nm，柱溫：40 ℃，進樣量：10 μL。結果含量測定方法在10.12～30.36μg/mL范圍內(nèi)，r=0.9999，平均回收率為99.92%。結論本方法簡便，專屬性強、準確可靠，適合于奮乃靜片的質量控制。

HPLC；奮乃靜；含量；有關物質

奮乃靜又名羥哌氯丙嗪，為抗精神病用藥。臨床上用于精神分裂或其他精神病性障礙。此品種收載于中國藥典2010版[1]，其含量測定方法是UV法，有很多文獻報道采用HPLC法測定含量[2,3]。本文采用與其不同的色譜條件，用HPLC法和UV法，對奮乃靜片含量測定方法進行比較。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Waters2695/2996高效液相色譜儀（紫外檢測器）。

1.2 試藥

甲醇、乙腈均為色譜純，其他試劑均為分析純。奮乃靜對照品（批號100133-200602，中檢所）；供試品（批號A1、A2，規(guī)格為2 mg；B1、B2，規(guī)格為4 mg，共4批；市售）。

2 方法與結果

2.1 色譜條件

高效液相色譜柱為Alltima C18（4.6 mm×150 mm，5 μm），流動相：緩沖液（取冰醋酸28.6 mL，置100 mL量瓶中，在攪拌下加入三乙胺34.8 mL，繼續(xù)攪拌約5 min，加水稀釋至刻度，搖勻，精密量取該溶液10 mL，置1000 mL量瓶中，加水稀釋至刻度）-乙腈-甲醇（52∶40∶8）；檢測波長：254 nm[1]。流速：1.0 mL/min；柱溫：40 ℃。進樣量：10 μL。奮乃靜的保留時間約為8 min，奮乃靜及其他有關物質峰的分離度符合要求，理論板數(shù)按奮乃靜計為2500。

2.2 線性關系

對照品溶液 取奮乃靜對照品10.12 mg，精密稱定，置50 mL量瓶中，加甲醇適量，振搖使溶解，并稀釋至刻度，搖勻，分別精密量取2.5、4、5、6及7.5 mL置50 mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度搖勻，進樣10 μL(n=3)，記錄色譜圖，以濃度X為橫坐標，峰面積Y為縱坐標，計算線性回歸方程：Y=58587 X-11208，r=0.9999。結果表明：奮乃靜在10.12～30.36 μg/mL濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關系。

2.3 方法專屬性研究

取奮乃靜對照品10 mg，分別置10 mL具塞刻度試管中，進行如下處理：①加1 mol/L鹽酸1 mL，100 ℃加熱2 h；②加1 mol/L氫氧化鈉溶液1 mL，105 ℃加熱2 h；③加10%過氧化氫溶液1 mL，放1.5 h；④光照破壞（4500lx，2 d）；⑤高溫破壞（100 ℃，43 h），然后調(diào)pH至中性，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液按“2.1”項下色譜條件測定，記錄色譜圖，結果表明降解產(chǎn)物與主成分能有效分離。

2.4 加樣回收率試驗

精密吸取已知含量的樣品（201.7 μg/mL）（批號：A1）2.5 mL共9份，分別置50 mL量瓶中，分別精密加入奮乃靜對照品溶液（202.4μg/mL）2、2.5、3 mL，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，相當于80%，100%，120%濃度的供試品溶液，按“2.1”項下色譜條件測定，計算加樣回收率，結果見表1，平均回收率（n=3）以%表示，測定低、中、高3種濃度的回收率，結果分別為99.30%(RSD=0.53%)，99.88%(RSD=0.21)，99.47%(RSD=0.45%)平均回收率(n=9)為99.6%，RSD=0.3%。

2.5 穩(wěn)定性實驗

取供試品溶液（批號A1），室溫放置，0、4、8、12、24 h后進樣測定，面積基本不變，結果表明：該溶液穩(wěn)定性良好，能滿足測定要求。

2.6 精密度試驗

取含量測定項下供試品溶液（批號A1），連續(xù)6次進樣測定，其RSD為0.9%。

2.7 含量測定

①HPLC法：避光操作。取本品20片，除去包衣后，精密稱定，研細，精密稱取細粉（約相當于奮乃靜10 mg），置50 mL量瓶中，加甲醇適量，超聲10 min使溶解，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液5 mL，置50 mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，為供試品溶液；分別取供試品溶液和線性關系項下的對照品溶液各10 μL注入液相色譜儀，按“2.1”項下色譜條件測定，記錄色譜圖，按外標法計算，測定結果與UV法[1]比較，見表1。②按文獻[1]的方法測定含量結果，見表1。

表1 樣品測定結果 （%）（n=3）

3 討 論

3.1 流動相的選則

①以甲醇-水（50∶50）為流動相，不論如何調(diào)比例，主峰與雜質峰分不開；②以甲醇-水-8.5%磷酸（50∶50∶0.15）為流動相，主峰與雜質峰仍分不開；③以0.05 mol/L磷酸氫二鈉溶液[用磷酸（1→5）溶液調(diào)pH至5.2]-甲醇（40∶60）為流動相，主峰出峰時間太快；④以緩沖液（取冰醋酸28.6 mL，置100 mL量瓶中，在攪拌下加入三乙胺34.8 mL，繼續(xù)攪拌約5 min，加水稀釋至刻度，搖勻，精密量取該溶液10 mL，置1000 mL量瓶中，加水稀釋至刻度）-乙腈-甲醇（52∶40∶8）為流動相，出峰時間恰好且主峰與雜質能達到很好分離，理論板數(shù)及分離度均能達到規(guī)定。

3.2 從表1可以看出，紫外法測定含量的數(shù)據(jù)高于HPLC法的測定的數(shù)據(jù)，其原因有可能是其他物質在此波長也有吸收，吸光度產(chǎn)生疊加從而使主藥的吸光度偏高。本實驗建立的HPLC測定方法，經(jīng)專屬性試驗考察，主峰均能與其他降解物很好的分離；HPLC測定含量排除了雜質的干擾，專屬性更強，比紫外專屬性更強，比紫外法更準確，而且簡便。可用于奮乃靜片的質量控制。

[1] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(二部)[M].2010年版.北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010:452.

[2] 胡丹,呂長淮,吳瑋,等.RP-HPLC法測定奮乃靜片的含量[J].安徽醫(yī)藥,2012,16(4):467-469.

[3] 吳珺.HPLC法測定奮乃靜片的含量和有關物質[J].中國藥品標準,2010(6):458-460.

R9

B

1671-8194（2014）23-0078-02