吳多榮，姚敏，黃會(huì)，韓小勝，張冬霞，周望

(海口市人民醫(yī)院中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院附屬?？卺t(yī)院檢驗(yàn)科，海南 ?？?570208）

·論著·

2012年度海口市人民醫(yī)院細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)

吳多榮，姚敏，黃會(huì)，韓小勝，張冬霞，周望

(?？谑腥嗣襻t(yī)院中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院附屬?？卺t(yī)院檢驗(yàn)科，海南 海口 570208）

目的分析?？谑腥嗣襻t(yī)院2012年臨床分離細(xì)菌對(duì)抗菌藥物的耐藥趨勢(shì)。方法用VITEK 2 compact鑒定儀對(duì)細(xì)菌進(jìn)行鑒定，采用紙片擴(kuò)散法（K-B法）、儀器法和E-test法對(duì)2012年度臨床分離菌株分別進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，結(jié)果按CLSI 2012年版標(biāo)準(zhǔn)判讀，用WHONET5.6軟件進(jìn)行耐藥性分析。結(jié)果2012年共收集非重復(fù)臨床分離菌株3746株，其中革蘭氏陰性菌占78.8%(2950/4746)，革蘭氏陽(yáng)性菌占21.2%(796/3746)。MRSA和MRCNS檢出率分別為35.4%和69.9%，未發(fā)現(xiàn)對(duì)萬(wàn)古霉素和利奈唑胺耐藥的葡萄球菌和腸球菌。肺炎鏈球菌中青霉素耐藥株(PRSP)為26.7%。β溶血鏈球菌對(duì)萬(wàn)古霉素、青霉素、氨芐西林和頭孢吡肟均高度敏感。大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌中ESBLs陽(yáng)性率分別為59.0%和35.8%，發(fā)現(xiàn)對(duì)亞胺培南和美羅培南耐藥的大腸埃希菌3株和肺炎克雷伯菌2株。銅綠假單胞菌對(duì)亞胺培南和美羅培南的耐藥率分別為17.6%和14.5%。鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)11種抗生素的耐藥率均在30%以下。左氧氟沙星和復(fù)方新諾明對(duì)嗜麥芽窄食單胞菌有較好的抗菌活性(耐藥率< 10%)。結(jié)論2012年該院分離的細(xì)菌主要以革蘭氏陰性桿菌為主，臨床分離細(xì)菌對(duì)常用抗菌藥物呈不同程度的耐藥，未檢出對(duì)萬(wàn)古霉素耐藥的腸球菌和葡萄球菌，腸桿菌科細(xì)菌對(duì)碳青霉烯類(lèi)藥物呈較低水平耐藥狀態(tài)，應(yīng)繼續(xù)做好對(duì)該類(lèi)藥物的保護(hù)。

細(xì)菌；耐藥性監(jiān)測(cè)；藥敏試驗(yàn)

2012 年是國(guó)家開(kāi)展抗菌藥物專項(xiàng)整治活動(dòng)的第二年，經(jīng)過(guò)一年的管控，抗菌藥物的應(yīng)用逐漸規(guī)范。由于我國(guó)細(xì)菌耐藥形勢(shì)較為嚴(yán)峻，因此各地區(qū)和單位及時(shí)準(zhǔn)確地做好本單位的細(xì)菌耐藥監(jiān)測(cè)和報(bào)告工作，對(duì)于指導(dǎo)臨床合理使用抗菌藥物具有重要意義。現(xiàn)將?？谑腥嗣襻t(yī)院2012年細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)結(jié)果回顧分析如下：

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 菌株來(lái)源收集海南省?？谑腥嗣襻t(yī)院2012年1月1日至2012年12月31日臨床分離株，剔除同一患者相同部位的重復(fù)菌株。所有菌株嚴(yán)格按照臨床操作規(guī)程進(jìn)行鑒定。

1.1.2 培養(yǎng)基和藥敏紙片培養(yǎng)基購(gòu)自廣州市迪景微生物科技有限公司，肺炎鏈球菌藥敏試驗(yàn)卡為法國(guó)生物梅里埃產(chǎn)品，萬(wàn)古霉素E紙片和所有抗菌藥物紙片均為英國(guó)OXOID公司產(chǎn)品，具體品種見(jiàn)結(jié)果表中所列。

1.2 方法

1.2.1 藥敏試驗(yàn)按照CLSI推薦的紙片擴(kuò)散法測(cè)定菌株對(duì)抗菌藥物敏感性[1]；葡萄球菌對(duì)萬(wàn)古霉素的敏感性用E試驗(yàn)條測(cè)試；肺炎鏈球菌藥敏試驗(yàn)采用梅里埃VITEK 2 compact儀器法檢測(cè)。質(zhì)控菌株為大腸埃希菌ATCC25922、銅綠假單胞菌ATCC27853、肺炎克雷伯菌ATCC700603、金黃色葡萄球菌ATCC25923、糞腸球菌ATCC29212、肺炎鏈球菌ATCC49619、流感嗜血桿菌ATCC49247。

1.2.2 ESBLs檢測(cè)參照CLSI2012[1]推薦的篩選試驗(yàn)和確證試驗(yàn)進(jìn)行。

1.2.3 MRS檢測(cè)用頭孢西丁測(cè)定苯唑西林耐藥性,MSSA、MRSA和MSCNS、MRCNS判定標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)頭孢西丁的折點(diǎn)分別為S≥22 mm、R≤21 mm和S≥25 mm、R≤24 mm。

1.2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用世界衛(wèi)生組織(WHO)提供的WHONET 5.6軟件進(jìn)行耐藥性統(tǒng)計(jì)分析，耐藥率比較應(yīng)用SPSS11.0軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)分析，P<0.05或者P<0.01為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各類(lèi)細(xì)菌的分離情況及其在標(biāo)本中的分布2012年共分離非重復(fù)臨床株3 746株，其中革蘭氏陰性菌2 950株(78.8%)，革蘭氏陽(yáng)性菌796株(21.2%)。分離自痰液標(biāo)本1 558株(占41.6%)，尿液標(biāo)本751株(占20.0%)，血液標(biāo)本420株(占11.2%)，傷口及膿液標(biāo)本376株(占10.0%)，胸腹水和腦脊液標(biāo)本142株(占3.8%)，膽汁標(biāo)本112株(占3.0%)，其他標(biāo)本386株(10.3%)。主要菌種分布見(jiàn)表1。

表1 2012年臨床分離菌株分布情況

2.2 革蘭氏陽(yáng)性球菌對(duì)抗菌藥物的敏感性

2.2.1 葡萄球菌屬M(fèi)RSA檢出率為35.4%，MRCNS檢出率為69.9%，359株葡萄球菌經(jīng)萬(wàn)古霉素E試驗(yàn)條測(cè)試，結(jié)果顯示其MIC值均≤1 mg/L，未發(fā)現(xiàn)對(duì)萬(wàn)古霉素和利奈唑胺耐藥的葡萄球菌。葡萄球菌屬對(duì)抗菌藥物的敏感性見(jiàn)表2。

2.2.2 腸球菌屬屎腸球菌對(duì)常規(guī)檢測(cè)藥物的耐藥率均明顯高于糞腸球菌，未發(fā)現(xiàn)對(duì)萬(wàn)古霉素和利奈唑胺耐藥株。腸球菌屬對(duì)抗菌藥物的敏感性見(jiàn)表2。

表2 葡萄球菌屬和腸球菌屬對(duì)抗菌藥物的敏感性(%)

2.2.3 鏈球菌屬共分離肺炎鏈球菌131株，95.4%(125/131)來(lái)源于痰液標(biāo)本，藥敏結(jié)果顯示對(duì)青霉素的耐藥率為26.7%；未發(fā)現(xiàn)利奈唑胺和萬(wàn)古霉素的耐藥株。β溶血性鏈球菌對(duì)青霉素仍呈高度敏感，敏感率為92.3%；對(duì)紅霉素的耐藥率較高，為78.8%；未發(fā)現(xiàn)對(duì)萬(wàn)古霉素耐藥株。鏈球菌屬對(duì)抗菌藥物的敏感性見(jiàn)表3。

表3 肺炎鏈球菌、β溶血性鏈球菌和流感嗜血桿菌對(duì)抗菌藥物的敏感性(%)

2.3 革蘭氏陰性菌對(duì)抗菌藥物的敏感性

2.3.1 腸桿菌科細(xì)菌大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌中ESBLs陽(yáng)性率分別為59.0%和35.8%。其中產(chǎn)ESBLs株耐藥率(亞胺培南和美羅培南除外)均顯著高于非產(chǎn)ESBLs株(P＜0.05)。發(fā)現(xiàn)對(duì)亞胺培南和美羅培南均耐藥的大腸埃希菌3株和肺炎克雷伯菌2株。腸桿菌屬細(xì)菌對(duì)15種抗菌藥物中的10種耐藥率均在30%以下。檸檬酸桿菌屬耐藥率低于20%的藥物為頭孢派酮/舒巴坦、哌拉西林-他唑巴坦、頭孢他啶、頭孢吡肟、亞胺培南、美羅培南、阿米卡星、妥布霉素和左氧氟沙星。沙雷菌屬除對(duì)氨芐西林、阿莫西林/克拉維酸和頭孢呋辛耐藥率較高外，對(duì)其余抗菌藥物的耐藥率均低于20%。腸桿菌科細(xì)菌對(duì)碳青霉烯類(lèi)藥物呈較低水平耐藥狀態(tài)，耐藥率均低于5%。腸桿菌科細(xì)菌對(duì)抗菌藥物的敏感性見(jiàn)表4、5。

2.3.2 不發(fā)酵糖革蘭氏陰性桿菌銅綠假單胞菌除對(duì)頭孢噻肟和復(fù)方新諾明耐藥率較高外，對(duì)所測(cè)試其他抗菌藥物的耐藥率均在30%以下，對(duì)亞胺培南和美羅培南的耐藥率分別為17.1%和17.6%。鮑曼不動(dòng)桿菌除對(duì)頭孢噻肟呈現(xiàn)較高的耐藥率外，對(duì)其余11種抗菌藥物的耐藥率均在30%以下，呈現(xiàn)較好的敏感率。左氧氟沙星和復(fù)方新諾明對(duì)嗜麥芽窄食單胞菌有較好的抗菌活性(耐藥率＜10%)。不發(fā)酵糖革蘭氏陰性桿菌對(duì)抗菌藥物的敏感性見(jiàn)表6。

2.3.3 嗜血桿菌屬流感嗜血桿菌對(duì)復(fù)方新諾明、氨芐西林和頭孢他啶的耐藥率分別為41.5%、24.4%和2.4%，對(duì)頭孢呋辛、左氧氟沙星和阿莫西林/克拉維酸100%敏感，見(jiàn)表3。

表4 腸桿菌科細(xì)菌對(duì)抗菌藥物的敏感性（%）

表5 腸桿菌科細(xì)菌對(duì)抗菌藥物的敏感性（%）

表6 銅綠假單胞菌、鮑曼不動(dòng)桿菌、嗜麥芽窄食單胞菌對(duì)抗菌藥物的敏感性（%）

3 討論

近三年來(lái)，隨著抗生素專項(xiàng)治理工作的深入開(kāi)展，臨床醫(yī)生逐漸認(rèn)識(shí)到病原菌檢測(cè)對(duì)感染性疾病診斷和治療的重要性，臨床微生物培養(yǎng)標(biāo)本的送檢及時(shí)、規(guī)范，無(wú)菌體液標(biāo)本特別是血培養(yǎng)的送檢量明顯增加，2012年該院非重復(fù)臨床分離的3 746株菌中41.6%分離自痰液標(biāo)本，比2011年的55.0%明顯降低[2]，低于其他地區(qū)的報(bào)道[3]。有11.2%分離自血液標(biāo)本，比2011年的3.5%明顯增加[2]，這與該院自2012年開(kāi)始血培養(yǎng)實(shí)行雙瓶雙套送檢有關(guān)，與中國(guó)CHINET報(bào)道相近[4]。

MRS是導(dǎo)致葡萄球菌多重耐藥的主要原因[5]，從結(jié)果可見(jiàn)該院MRSA的檢出率為35.4%，明顯低于黃紅宇等[6]報(bào)道水平，高于王華麗等[7]的報(bào)道。MRCNS的檢出率為69.9%，與中國(guó)CHINET報(bào)道相近[4]，MRS株對(duì)抗菌藥物的耐藥率明顯高于MSS株，萬(wàn)古霉素對(duì)葡萄球菌的MIC值均≤1 mg/L，低于王鈺[6]報(bào)道水平，未發(fā)現(xiàn)對(duì)萬(wàn)古霉素和利奈唑胺耐藥的葡萄球菌。腸球菌對(duì)萬(wàn)古霉素和利奈唑胺100%敏感，屎腸球菌對(duì)其余抗菌藥物的耐藥率明顯高于糞腸球菌，這與其他地區(qū)報(bào)道相近[8]。對(duì)青霉素耐藥的肺炎鏈球菌(PRSP)越來(lái)越引起人們的關(guān)注，該院PRSP分離率為26.7%，明顯高于其他地區(qū)[9]，氧氟沙星、左氧氟沙星、莫西沙星、利奈唑胺和萬(wàn)古霉素等對(duì)它呈現(xiàn)較強(qiáng)的抗菌活性，敏感率為95.4%～100%。

從結(jié)果可見(jiàn)，該院腸桿菌科細(xì)菌對(duì)碳青霉烯類(lèi)藥物呈較低水平耐藥狀態(tài)，應(yīng)繼續(xù)做好對(duì)該類(lèi)藥物的保護(hù)。產(chǎn)ESBLs仍是大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對(duì)常用抗菌藥物耐藥的主要機(jī)制之一，該院產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌檢出率分別為59.0%和35.8%，低于其他地區(qū)[10]，比2011年有所下降[2]。產(chǎn)ESBLs株比非產(chǎn)ESBLs株對(duì)抗菌藥物的耐藥率差異性具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。其他腸桿菌科細(xì)菌除對(duì)氨芐西林和阿莫西林/克拉維酸外耐藥率較高外，對(duì)其余抗菌藥物都呈現(xiàn)較好的敏感性。

據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，銅綠假單胞菌和鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)亞胺培南和美羅培南的耐藥率都呈現(xiàn)較高的耐藥水平，該院監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)顯現(xiàn)兩種細(xì)菌對(duì)亞胺培南和美羅培南的耐藥率均低于20%[4]。銅綠假單胞菌除對(duì)頭孢噻肟和復(fù)方新諾明耐藥率較高外，對(duì)其余抗菌藥物的耐藥率均低于30%，但已發(fā)現(xiàn)有個(gè)別全耐的銅綠假單胞菌檢出，對(duì)于全耐細(xì)菌所引起的感染治療非常困難，大劑量黏菌素或多黏菌素B是可選擇的治療方案[11]，但仍需臨床積極探索治療經(jīng)驗(yàn)。鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)11種抗生素的耐藥率均在30%以下，明顯低于其他地區(qū)[3,5]。左氧氟沙星和復(fù)方新諾明仍對(duì)嗜麥芽窄食單胞菌有較好的抗菌活性(耐藥率<10%)。

總之，加強(qiáng)對(duì)微生物標(biāo)本的檢測(cè)和細(xì)菌耐藥監(jiān)測(cè)工作的重視力度，不斷提高抗菌藥物的合理使用，這將對(duì)有效保護(hù)細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生，延緩抗菌藥物的使用壽命等起著非常關(guān)鍵的作用，更好地促進(jìn)我國(guó)醫(yī)療資源的健康、有序發(fā)展。

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Bacterial resistance surveillance in Haikou People’s Hospital in 2012.

WU Duo-rong,YAO Min,HUANG Hui,HAN Xiao-sheng,ZHANG Dong-xia,ZHOU Wang.Department of Clinical Laboratory,HaiKou People's Hospital,the Affiliated Hospital of Xiangya Medical School of Central South University,Haikou 570208,Hainan,CHINA

ObjectiveTo investigate the resistance of clinical isolates of bacteria in Haikou People's Hospital in 2012.MethodsBacteria were identified by VITEK 2 compact instrument,and antimicrobial susceptibility testing was carried out by Kirby-Bauer(K-B)method,instrument and E-test.Then the data was analyzed by WHONET 5.6 software according to CLSI 2012 breakpoints.ResultsOf the 3 746 clinical isolates collected in 2012,gram-negative bacilli and gram-positive bacilli accounted for 78.8%(2 950/3 746)and 21.2%(796/3746),respectively.The detection rates of the meticillin-resistant Staphylococcus aureus(MRSA)and coagulase-negative Staphylococcus (MRCNS)were 35.4%and 69.9%.Neither vancomycin nor linezolid resistant isolate was found in Staphylococcus. The rate of penicillin-resistant Streptococcus pneumoniae(PRSP)was 26.7%.Beta-hemolytic Streptococcus was found highly sensitive to vancomycin,penicillin,ampicillin and Levofloxacin.ESBLs positive rates of E.coli and K.pneumoniae accounted for 59.0%and 35.8%.Three E.coli strains and 2 K.peumoniae isolates were resistant to imipenem and meropenem.The resistance rate of Pseudomonas aeruginosa to imipenem and meropenem were 17.6%and 14.5%, respectively.The resistance rates of Acinetobacter baumannii to 11 antibiotics were all below 30%.Stenotrophomonas maltophilia was sensitive to levofloxacin medicine and Sulfamethoxazole-trmethoprim(drug-resistant rate<10%). ConclusionGram-negative bacilli are the most common isolates in our hospital in 2012.No Vancomycin-resistant isolates were detected in Enterococci and Staphylococcus.Carbopenems-resistant isolates in Enterobacteriaceae were detected in our surveillance,which should be noted.

Bacteria;Resistance surveillance;Susceptibility testing

R37

A

1003—6350（2014）07—0992—05

10.3969/j.issn.1003-6350.2014.07.0384

2013-08-21)

吳多榮。E-mail：wuduorong@163.com