周竹琇

(江蘇省中醫(yī)院 江蘇 南京 210029)

?

不同產(chǎn)地生五味子飲片中五味子醇甲含量比較

周竹琇

(江蘇省中醫(yī)院 江蘇 南京 210029)

目的：測(cè)定和比較不同產(chǎn)地生五味子飲片中五味子醇甲的含量。方法：利用高效液相色譜法測(cè)定不同產(chǎn)地生五味子飲片中五味子醇甲的含量，色譜柱為Lichrospher5-C18(5μm，4.6mm×250mm)，流動(dòng)相為甲醇-水(60∶40)，流速為1.0mL/min，檢測(cè)波長為250nm，柱溫為30℃。結(jié)果：不同產(chǎn)地生五味子飲片中五味子醇甲的含量不同，但各個(gè)產(chǎn)地的五味子醇甲含量均大于0.4%。結(jié)論：采用高效液相色譜法可以準(zhǔn)確測(cè)定五味子醇甲含量，操作方法簡單、重現(xiàn)性較好。

五味子；五味子醇甲；產(chǎn)地;含量測(cè)定

五味子，俗稱秤砣子、山花椒、面藤、藥五味子、五梅子等，最早列于《神農(nóng)本草經(jīng)》上品，作為一種中藥，其主要功效為滋補(bǔ)強(qiáng)壯之力，具有極高的藥用價(jià)值[1]。五味子性溫、酸、甘，歸肺、心、腎經(jīng)，為干燥成熟果實(shí)，屬木蘭科，植株可供觀賞。五味子有南北之分，分布于河北、吉林、遼寧、黑龍江等地為北五味子，分布于四川、云南、陜西等地則為南五味子。五味子主要有效成分包括有機(jī)酸、揮發(fā)油和木脂素等三種，大量研究文獻(xiàn)表明，木脂素是五味子最主要的一種有效成分，并且在《藥典》中明確規(guī)定，該藥材質(zhì)量控制的指標(biāo)是五味子醇甲[2]。因此本文通過測(cè)定不同產(chǎn)地生五味子飲片中五味子醇甲的含量，比較不同產(chǎn)地生五味子的質(zhì)量。

1 儀器與試藥

儀器：高效液相色譜儀選用安捷倫公司提供的AgiLent 1100LC液相色譜儀，采用昆山超聲儀器有限公司提供的KQ-500E型醫(yī)用超聲清洗器，以及石英亞沸重蒸水器。

試藥：自制雙蒸水，甲醇(分析純、色譜純)，五味子醇甲對(duì)照品由中國食品藥品檢定研究院提供(批號(hào)為11857-200309)，五味子飲片選擇和興堂中藥飲片加工廠提供的中試產(chǎn)品。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱為Lichrospher5-C18(5μm，4.6mm×250mm)，流動(dòng)相為甲醇-水(60∶40)，流速為1.0mL/min，檢測(cè)波長為250nm，柱溫為30℃，每次進(jìn)樣量為10μL。

2.2 對(duì)照品溶液制備

精密稱取適量經(jīng)105℃干燥后恒溫的五味子醇甲對(duì)照品0.12g于25mL量瓶中，加入甲醇溶液充分溶解，稀釋至刻度后搖勻，即得含量為0.446mg/mL的五味子醇甲對(duì)照品溶液。

2.3 供試品溶液制備

取適量五味子樣品粉末，過三號(hào)篩(篩孔內(nèi)徑為355±13μm)，精密稱取0.2g于25mL容量瓶中，加入約23mL甲醇溶解。以20kHz頻率，250W功率做超聲處理20min后取出，再加入甲醇至刻度，充分搖勻后進(jìn)行濾過，所得濾液作供試品溶液使用。

2.4 線性關(guān)系考察

分別精密量取0.5、1.0、2.0、3.0、4.0mL五味子醇甲對(duì)照品溶液(0.446mg/mL)，置于五個(gè)20mL的容量瓶中，加入適量甲醇分別配制成11.15、22.30、44.6、66.9、89.2 μg/mL的對(duì)照品溶液。利用上述色譜條件，分別精密吸取10μL對(duì)照品溶液注入高效液相色譜儀中，根據(jù)色譜圖繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，橫坐標(biāo)為對(duì)照品濃度，縱坐標(biāo)為峰面積積分值[3]。得回歸方程為Y=2119582X-1017279(r=0.9999)，回歸結(jié)果顯示，在0.115～0.892μg范圍內(nèi)，五味子醇甲呈現(xiàn)較好的線性關(guān)系。

2.5 精密度檢驗(yàn)

精密吸取10μL五味子醇甲對(duì)照品溶液(0.446mg/mL)，連續(xù)進(jìn)樣6次，通過峰面積計(jì)算精密度，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD=0.75%，結(jié)果表明，儀器的精密度較好。

2.6 穩(wěn)定性檢驗(yàn)

精密吸取10μL五味子供試品，分別在0、2、4、8、12、16、20h注入高效液相色譜儀中，通過峰面積計(jì)算出穩(wěn)定性，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD=1.51%，計(jì)算結(jié)果表明，供試品在20h內(nèi)相對(duì)穩(wěn)定。

2.7 重復(fù)性檢驗(yàn)

精密平行稱取6份0.2g生五味子，按照供試品溶液制備操作步驟，制得6份供試品溶液，精密吸取10μL注入液相色譜儀內(nèi)，通過計(jì)算求出相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD=0.88%，表明該實(shí)驗(yàn)重復(fù)性較好。

2.8 加樣回收率檢驗(yàn)

精密量取含量已知的生五味子樣品，加入適量五味子醇甲對(duì)照品溶液，按供試品項(xiàng)操作，并按照含量測(cè)定的方法測(cè)定，計(jì)算結(jié)果顯示，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD=1.24%，平均加樣回收率為99.73%。詳見表1。

2.9 不同產(chǎn)地生五味子飲片中五味子醇甲含量測(cè)定

分別稱取八個(gè)不同產(chǎn)地生五味子樣品，分別來自河北安國市、陜西商州、沈陽蘇家屯區(qū)、遼寧丹東、吉林白山、黑龍江雞西、遼寧撫順、黑龍江綏化。精密稱取后按供試品液項(xiàng)下操作，在上述色譜條件下進(jìn)行分離，進(jìn)樣量為10μL，峰面積測(cè)定后計(jì)算五味子醇甲含量。測(cè)定結(jié)果分別為0.557%，0.621%，0.504%，0.405%，0.549%，0.542%，0.408%，0.471%。

表1 加樣回收率檢驗(yàn)結(jié)果

3 討論

本實(shí)驗(yàn)中流動(dòng)相的選擇參考2005版藥典五味子項(xiàng)下及文獻(xiàn)，有研究者曾用流動(dòng)相為甲醇-水(55∶45)、甲醇-水(62∶38)、甲醇-水(13∶7)，但均未得到比較滿意的分離效果[4]。因此本文根據(jù)以往經(jīng)驗(yàn)，選擇甲醇-水(60∶40)作為流動(dòng)相，可取得較佳效果。

五味子藥用價(jià)值較大，具有斂肺止咳、澀精止瀉、生津斂汗之功效，對(duì)于一切氣血耗散的虛脫、休克，均可配上補(bǔ)藥服用[5]。其主要活性成分木脂素是抗肝臟損傷、治療神經(jīng)衰竭的關(guān)鍵成分?，F(xiàn)行藥典以五味子里含有的五味子醇甲作為該藥材質(zhì)量控制的一個(gè)指標(biāo)。本文采用高效液相色譜法，測(cè)定八個(gè)不同地區(qū)生產(chǎn)的五味子飲片中五味子醇甲的含量，測(cè)定結(jié)果顯示，不同地區(qū)的飲片五味子醇甲含量不同，但均高于0.40%。含量不同可能與五味子的種植、管理、采收以及加工等方面有關(guān)，因此，應(yīng)該提高五味子種植、管理、采收以及加工等工作的重視程度，從而提高五味子的質(zhì)量。

[1] 張春輝,段少麗,范曉慶.不同產(chǎn)地五味子中五味子醇甲的含量測(cè)定及分析比較[J].中國藥事,2008,22(8):701-702.

[2] 邢文善,林大專,張凌嬴.長春地區(qū)不同藥店的五味子藥材質(zhì)量比較[J].中外醫(yī)療,2010,29(25):122-123.

[3] 施祖勇,譚軍.高效液相色譜法測(cè)定復(fù)方益肝靈片中五味子醇甲、五味子醇乙和五味子甲素的含量[J].中南藥學(xué),2011,9(4):264-267.

[4] 郭美華,胡寶榮,李丹露,等.高效液相色譜法測(cè)定安神益心液中五味子醇甲含量[J].醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2010,29(11):1487-1488.

[5] 譚忠謀,楊帆,韋升堅(jiān).HPLC法測(cè)定消渴靈片中五味子醇甲的含量[J].中國中醫(yī)藥現(xiàn)代遠(yuǎn)程教育,2012,10(3):143-144.

(責(zé)任編輯：魏 曉)

2014-08-07

周竹琇(1986—)，女，江蘇省中醫(yī)院中藥師，研究方向?yàn)橹兴幷{(diào)配。

R284

A

1673-2197(2014)23-0017-02