趙郭林，張 澤，王 聰，江振洲,2，壽曉云，王 濤,2，鄒節(jié)明*

(1.中國藥科大學 江蘇省新藥篩選中心；2.中國藥科大學 江蘇省藥效學研究與評價服務中心，江蘇 南京210009；3.桂林三金藥業(yè)股份有限公司，廣西 桂林541004)

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不同產地金櫻根藥材根和莖抗炎鎮(zhèn)痛活性研究

趙郭林1，張 澤1，王 聰1，江振洲1,2，壽曉云3，王 濤1,2，鄒節(jié)明3*

(1.中國藥科大學 江蘇省新藥篩選中心；2.中國藥科大學 江蘇省藥效學研究與評價服務中心，江蘇 南京210009；3.桂林三金藥業(yè)股份有限公司，廣西 桂林541004)

目的：選取廣西、云南、貴州三種產地的金櫻根藥材，對其根和莖樣品的抗炎鎮(zhèn)痛活性進行評價。方法：采用鼠耳腫脹法、大鼠足跖腫脹法對金櫻根藥材根和莖樣品的抗炎活性進行比較，采用小鼠醋酸扭體法對其鎮(zhèn)痛活性進行比較。結果：金櫻根藥材均可抑制鼠耳廓腫脹和小鼠扭體反應；部分金櫻根藥材樣品對角叉菜膠致大鼠足跖腫脹表現(xiàn)為抑制作用。結論：金櫻根藥材樣品具有一定的抗炎作用并且具有不同程度的鎮(zhèn)痛作用。

金櫻根藥材；抗炎；鎮(zhèn)痛

金櫻根又名金櫻子根、金櫻蔃、脫骨丹，為薔薇科薔薇屬常綠攀援有刺灌木金櫻子(RosalaevigataMichx.)的根或根皮。2010年版《中國藥典》附錄收載金櫻根為薔薇科植物金櫻子、小果薔薇和粉團薔薇植物的干燥根。臨床上金櫻根藥材常用于治療前列腺炎、婦科疾病、遺精、遺尿、泌尿系統(tǒng)感染以及燒傷燙傷等[1]。在金櫻根藥材市場，時常將金櫻根藥材的莖混入金櫻根中[2]。而莖與根的混用，對金櫻根的臨床應用是否有不良影響，這方面的研究未見深入報道。本文對廣西、云南、貴州三個不同產地金櫻根藥材的根和莖兩個藥用部位的抗炎、鎮(zhèn)痛藥效作用進行比較，為進一步開發(fā)利用此藥材提供一定的藥理學依據(jù)。

1 材料

1.1 試劑

受試藥物：金櫻根藥材3種產地的根和莖樣品共6種，均由廣西桂林三金藥業(yè)有限公司提供，主要信息如表1所示。

受試樣品配制方法：臨用前稱取所需藥量，采用無菌蒸餾水溶解，4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

陽性藥物：扎托布洛芬(純度98.7%)，由合肥科大生物技術有限公司提供，用于抗炎和鎮(zhèn)痛試驗。配制方法：臨用前稱取所需藥量，采用0.5% CMC-Na研磨混懸均勻，4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

二甲苯(南京化學試劑一廠)；0.9%氯化鈉注射液(南京小營制藥廠)；λ-角叉菜膠(C3889，Lot 122k1444，購自Sigma公司)；羧甲基纖維素鈉(CMC-Na)(國藥集團化學試劑有限公司)；醋酸(南京化學試劑有限公司)。

表1 金櫻根藥材信息

1.2 動物

ICR小鼠，清潔級，18～22g，雄性，購自南通大學實驗動物中心；SD大鼠，SPF級，150～180g，雄性，購自浙江省實驗動物中心。小鼠、大鼠均飼養(yǎng)于實驗室常規(guī)條件。

1.3 儀器

BSA124S 精密電子天平(0.1mg～120g)：德國賽多利斯(sartorius)；KD-160型電子秤：東莞百利達健康器材有限公司。

1.4 劑量設置及依據(jù)

金櫻根藥材的臨床最大用量為60g/人/天，人體重按60kg計，受試藥物高、中、低劑量按體表面積折算，分別約相當于人臨床劑量的2.0、1.0、0.5倍。各組劑量設定見表2。

表2 金櫻根藥材高、中、低劑量設置

2 方法

2.1 對二甲苯引起小鼠耳廓腫脹的影響

2.1.1 劑量與分組 200只小鼠隨機分為20組，每組10只：1為對照組，2為陽性藥，3～5為廣西莖(GX-J)高、中、低劑量組，6～8為廣西根(GX-G)高、中、低劑量組，9～11為貴州莖(GZ-J)高、中、低劑量組，12～14為貴州根(GZ-G)高、中、低劑量組，15～17為云南莖(YN-J)高、中、低劑量組，18～20為云南根(YN-G)高、中、低劑量組。各組劑量參照表2設定，每組配制不同濃度，給藥體積均為20mL/kg，灌胃給藥，每天1次，給藥5天。

2.1.2 炎癥模型 末次給藥前禁食過夜，不禁水，末次給藥30min后，在小鼠右耳兩側涂二甲苯30μL/只為致炎耳，左耳不作任何處理為非致炎耳。2h后將動物處死，剪下兩耳，用直徑8mm的打孔器自相同部位分別打出圓形耳片，用電子天平稱重。

2.1.3 檢測指標 以致炎耳片重減去非致炎耳片重的差值作為腫脹度，計算腫脹率和腫脹度抑制率。腫脹率=腫脹度/正常耳片重×100%，腫脹度抑制率=(對照組腫脹度-受試組腫脹度)/對照組腫脹度×100%。比較各組腫脹度和腫脹率的平均值，進而得出各組藥抗炎作用的強弱[3]。

2.2 對角叉菜膠致大鼠足跖腫脹的作用

2.2.1 劑量與分組 同“2.1.1”。各組劑量參照表2設定，每組配制不同濃度，給藥體積均為10mL/kg，灌胃給藥，每天1次，給藥5天。

2.2.2 大鼠足跖腫脹誘發(fā) 末次給藥后即刻進行角叉菜膠注射造模。1%角叉菜膠于試驗前1天配制，按比例稱取后置于0.9%氯化鈉注射液中溶脹過夜備用。致炎前將動物灌胃給予0.9%氯化鈉注射液1mL/100g，然后將動物后肢拉直，于右足跖中部皮下注入1%角叉菜膠0.1mL致炎。

2.2.4 檢測指標 采用排水法測定大鼠后足體積。角叉菜膠注入后即測定，作為基礎體積，隨后測定致炎0.5、1、2和4h大鼠后足體積，觀察腫脹達峰時間和消退時間，求出各時間點腫脹度及腫脹率，比較給藥組和對照組的差異情況，算出藥物的腫脹抑制率，進行抗炎作用評價[3]。

腫脹度(mL)=(測定體積-基礎體積)

腫脹率(%)= (測定體積-基礎體積)/基礎體積×100%

2.3 小鼠扭體反應

2.3.1 劑量與分組 同“2.1.1”。

2.3.2 試驗方法 預防給藥5天,試驗前各組小鼠禁食過夜，試驗當天各組灌胃相應受試藥物，給藥1h后，腹腔注射0.6%醋酸(0.2mL/只)，記錄注射后10min內小鼠出現(xiàn)扭體的次數(shù)。以小鼠出現(xiàn)腰部肌肉反復收縮、拱背、臀部扭轉和后肢伸展為扭體反應陽性[3]，按下列公式計算藥物抑制扭體百分率。

抑制率(%)=(對照組扭體數(shù)—給藥組扭體數(shù))/對照組扭體數(shù)×100%

2.4 統(tǒng)計學方法

3 結果

3.1 對二甲苯引起小鼠耳廓腫脹的影響

與對照組相比，金櫻根藥材18個受試組中除GZ-G中、GZ-G低、YN-J低3個組無抑制作用外，其余15個組均有不同程度的抑制作用(圖1)，其中YN-G、GX-G、YN-J的抗炎作用相對較強。各實驗組按腫脹率由低到高排序如下：YN-G高

圖1 金櫻根藥材樣品對二甲苯引起小鼠耳廓腫脹的影響 (n=10，±s)與對照組比較，*P<0.05，**P<0.01

3.2 對角叉菜膠致大鼠足跖腫脹作用

如表4所示，與對照組相比，部分金櫻根藥材樣品對角叉菜膠致大鼠足跖腫脹表現(xiàn)為抑制作用，其中YN-G、GZ-G和GZ-J三個樣品抑制作用相對較強，但劑量相關性不明顯。

3.3 小鼠扭體反應

如圖2所示，與對照組相比，三個產地的金櫻根藥材樣品對小鼠扭體反應具有不同程度的抑制作用，組間比較未見明顯差異。各實驗組按扭體數(shù)由低到高排序如下：YN-J高

4 討論

金櫻子始載于《蜀本草》，在《本草綱目》中亦有記載：“金櫻當作金罌，謂其子形黃櫻也”。金櫻子主產于華東、華中、華南及陜西、四川、貴州、云南等地[4]。金櫻根性酸、澀、平，歸腎、脾經。其根和根皮含有豐富的鞣質、多糖、皂苷等成分。目前市場上含有金櫻根藥材的藥品有三金膠囊、三金片、婦科千金片、廣東涼茶顆粒、金雞膠囊等，具有清熱解毒、利濕通淋、益腎的作用，用于下焦?jié)駸崴碌臒崃?、小便短赤、淋瀝澀痛、尿急頻數(shù)、急慢性腎盂腎炎、膀胱炎、尿路感染見上述證候者。

表4 金櫻根藥材樣品對角叉菜膠致大鼠足跖腫脹率的影響 (n=10，±s)

注：與對照組比較，*P<0.05，**P<0.01。

圖2 金櫻根藥材樣品對小鼠扭體反應的影響 (n=10，±s)與對照組比較，*P<0.05，**P<0.01

在2010版藥典附錄、廣東省中藥材標準第一冊(2004)以及廣西省中藥材標準(1990)中收錄的金櫻根藥用部位為金櫻子的根部，湖南省中藥材標準(2009年版)收錄的金櫻根藥用部位為金櫻子的干燥根及莖(莖不得超過40%)[5]。但由于金櫻根用量較大，民間習用根和老莖入藥。

金櫻根藥材的現(xiàn)代藥理研究文獻較少，已有的研究顯示金櫻根對急性炎癥和慢性炎癥均有抑制作用，且其根和莖的水提液、醇提液具有不同程度的抗炎作用[6,7]。但關于不同產地的金櫻根藥材的抗炎作用及鎮(zhèn)痛作用目前尚無文獻報道。

基于金櫻根藥材的主要臨床用途，本文就金櫻根藥材廣西、云南、貴州三個代表性產地的根和莖兩個部位的抗炎、鎮(zhèn)痛藥效作用進行了比較。通過二甲苯引起小鼠耳廓腫脹和角叉菜膠致大鼠足跖腫脹的炎癥試驗結果顯示：三個產地金櫻根藥材根和莖的樣品均具有一定的抗炎作用，部分樣品抗炎作用的劑量依賴性不明顯。在二甲苯引起小鼠耳廓腫脹實驗中，YN-G高、GX-G低、YN-G低、GX-G中、GX-G高、GZ-J中、YN-J中、YN-G中與對照組比較有明顯的統(tǒng)計學差異(P<0.05，P<0.01)；在角叉菜膠致大鼠足跖腫脹實驗中，YN-G、GZ-G和GZ-J三個樣品抑制作用相對較強。鎮(zhèn)痛實驗結果顯示，三個產地金櫻根藥材根及莖樣品對小鼠扭體反應具有不同程度的明顯抑制作用，其中YN-J高、GZ-J中、GX-G中、YN-G中、GZ-G高、GX-J中、GX-J高、YN-J中、YN-G高、YN-J低各樣品組與對照組相比具有顯著統(tǒng)計學差異(P<0.05，P<0.01)，各樣品組間比較均未見明顯差異。

根據(jù)以上結果，推測金櫻根的根和莖在抗炎和鎮(zhèn)痛作用方面差異不明顯，來自不同產地的產品也沒有明顯的差異，為解決金櫻根僅根部入藥而導致資源短缺的問題提供了一定的參考，為金櫻根的莖部位入藥提供了理論依據(jù)。

[1] 劉佩沂，田素英，梅全喜.金櫻根的研究進展[J]．海峽藥學，2010，22(1):98．

[2] 鐘小清，呂高榮，鄒節(jié)明.金櫻根藥材的名實考證[J].中草藥，2009，7(7)：1140-1143.

[3] 陳奇.中藥藥理研究方法學[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2000:258-330.

[4] 廣東省食品藥品監(jiān)督管理局.廣東省中藥材標準[S].第1冊. 廣州：廣東科技出版社, 2004.

[5] 湖南省食品藥品監(jiān)督管理局.湖南省中藥材標準[S].長沙：湖南科技出版社,2010.

[6] 王艷，楊靜，李志響，等.金櫻根、莖抗炎作用的對比研究[J].中國現(xiàn)代中藥，2010，12(3);34-35.

[7] 譚年秀，王嵩，江振霖，等.金櫻根、莖提取物的抗炎解熱作用對比研究[J].中國現(xiàn)代中藥，2012,14(9):19-22.

(責任編輯：魏 曉)

Anti-inflammatory and Analgesic Activity of Root and Rhizome Samples of Radix Rosa Laevigata in Different Regions

Zhao Guolin1，Zhang Ze1，Wang Cong1，Jiang Zhenzhou1,2,Shou Xiaoyun3，Wang Tao1,2，Zou Jieming3*

(1.Jiangsu Center for Drug Screening, China Pharmaceutical University；2.Jiangsu Center for Pharmacodynamics Research and Evaluation, China Pharmaceutical University, Nanjing 210009，China；Guilin Sanjin Pharmaceutical Co.,Ltd., Guilin 541004，China)

Objective:To evaluate the anti-inflammatory and analgesic activity of root and rhizome samples of Radix Rosa Laevigata in Guangxi, Yunnan, Guizhou.Methods:The mouse auricular model and carrageenan-induced rat paw edema model were used to test the anti-inflammatory activity of root and rhizome samples of Radix Rosa Laevigata.The mouse acetic acid writhing test was used to compare their analgesic activities.Results:All the Radix Rosa Laevigata samples suppressed xylene-induced mouse ear edema and reduced the writhing number; Parts of Radix Rosa Laevigata samples could remarkably inhibit the rat paw edema.Conclusion:All the Radix Rosa Laevigata samples could have certain anti-inflammatory and analgesic activity of different levels.

Radix Rosa Laevigata；Anti-inflammatory；Analgesic Activity

2014-06-13

趙郭林(1992-)，女，中國藥科大學碩士研究生，研究方向為分子藥理學。

鄒節(jié)明(1943-)，男，廣西桂林三金藥業(yè)股份有限公司教授級高級工程師、博士生導師，研究方向為中藥新藥研發(fā)。E-mail：zjm@sanjin.com.cn。

R285

A

1673-2197(2014)19-0014-03