摘要：隨著我國醫(yī)療技術(shù)的不斷發(fā)展，人們對游離脂肪酸及高糖對內(nèi)皮細胞功能的影響越來越關(guān)注，主要是由于游離脂肪酸和高糖對人的健康具有很大的影響。因此，研究游離脂肪酸及高糖對內(nèi)皮細胞功能的影響具有非常重大的意義。本文介紹了一些測定方法，闡述了葡萄糖與FFA對內(nèi)皮細胞形態(tài)學變化的影響，最后進行了一定的討論。通過本文的論述，筆者一方面，希望能起到拋磚引玉的作用，另一方面，希望能給相關(guān)的工作人員提供一點參考借鑒的材料。

關(guān)鍵詞：游離脂肪酸；高糖；內(nèi)皮細胞功能 【中圖分類號】R587 【文獻標識碼】B 【文章編號】1672-8602(2014)03-0036-01

目前，游離脂肪酸及高糖很容易引起血管并發(fā)癥，還會導致糖尿病的產(chǎn)生，嚴重影響患者的正常生活，由于內(nèi)皮細胞的損傷在對血管并發(fā)癥中具有非常關(guān)鍵的作用，現(xiàn)在已經(jīng)證實了游離脂肪酸和高糖對于血管的損傷很重要。隨著游離脂肪酸含量的增大，血管并發(fā)癥疾病的發(fā)生率也增加，F(xiàn)FA是導致血管內(nèi)皮細胞功能受損的關(guān)鍵因素。但是，F(xiàn)FA造成的血管內(nèi)部細胞功能受損的原因很多，現(xiàn)在醫(yī)學界還沒有研究清楚，當然，氧化造成的損傷是現(xiàn)在研究的重點，主要包括HUVEC、NO和SICAM-l等影響因素，因而需要對這些影響因素的測定方法進行研究。當然，體外培養(yǎng)的內(nèi)皮細胞是血管功能研究中最常見的細胞培養(yǎng)方法，為了解決醫(yī)學上的這一問題，加大對游離脂肪酸和高糖對內(nèi)皮細胞功能的影響研究力度顯得至關(guān)重要。

1 測定方法介紹

1.1 HUVEC原代細胞培養(yǎng):HUVEC細胞培養(yǎng)方法是原代培養(yǎng)方法的一種，主要是采取健康嬰兒的細胞，先用膠原酶進行消化處理，再用培養(yǎng)液重新懸浮培養(yǎng)細胞，使得細胞活性達到一定的活性，然后，將懸浮后的細胞接種到培養(yǎng)皿中，在合適的環(huán)境下進行細胞培養(yǎng)。因此，HUVEC原代細胞培養(yǎng)是現(xiàn)代測定方法中非常重要的一種細胞培養(yǎng)方法。

1.2 NO的測定:NO測定法主要是對細胞上清液中的NO含量進行測定，由于NO的化學活性較高，很容易在人體內(nèi)進新陳代謝過程轉(zhuǎn)化為硝酸鹽和亞硝酸鹽等，因此，采用硝酸還原法可以測定細胞中的NO水平。

1.3 SICAM-l測定:SICAW-1測定方法是采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗法對細胞上清液中的SICAM-1的含量進行測定，并且測定操作過程還應該嚴格按照試劑盒進行。同時，SICAM-1測定方法是現(xiàn)在比較先進的一種細胞培養(yǎng)的測定方法。

2 葡萄糖與FFA對內(nèi)皮細胞形態(tài)學變化的影響

高濃度的葡萄糖和高濃度的FFA中的內(nèi)皮細胞形態(tài)與對照組細胞有明顯的不同，然后，通過透射電鏡觀察觀察高濃度FFA作用下的內(nèi)皮細胞的形態(tài)，主要觀察是否有空泡細胞樣產(chǎn)生，由于染色質(zhì)一般都會聚集在核膜附近，因而形成凋亡小體。高濃度的FFA處理過的內(nèi)皮細胞漿液中會出現(xiàn)大量的空泡，說明高糖和高濃度的FFA都能誘導內(nèi)皮細胞發(fā)生凋亡。因此，葡萄糖與FFA對內(nèi)皮細胞形態(tài)學變化具有非常大的影響。

3 討論

糖尿病血管并發(fā)癥是糖尿病的主要發(fā)病形態(tài)，并且血管內(nèi)皮細胞對發(fā)病的關(guān)鍵，血管不僅不能阻隔血液與血管內(nèi)膜下組分的接觸，同時，血管還能分泌出一些活性物質(zhì)，進而能夠調(diào)節(jié)血管的收縮和白細胞移行等功能。在糖尿病狀態(tài)下，患者的血管很容易受到損傷，導致內(nèi)皮細胞發(fā)生變化，因此，現(xiàn)在血管的損傷會是形成糖尿病并發(fā)癥的基礎。近年來，對糖尿病及其血管并發(fā)癥的研究已經(jīng)成為醫(yī)學研究的熱點，大多數(shù)研究者都認為糖尿病及其并發(fā)癥是由于炎癥因子引起的血管問題，這也對糖尿病血管并發(fā)癥的發(fā)生起著非常重要的作用，這些炎癥因子主要包括內(nèi)皮黏附分子、白介素系列和纖溶酶原激活物抑制物等。在患有糖尿病血管并發(fā)癥的情況下，這些炎癥因子的高低能夠反映糖尿病的異?，F(xiàn)象。

糖尿病的血管損傷的具體原因目前還沒有明確的結(jié)論，但是，醫(yī)學上已經(jīng)證實高濃度糖類和FFA是影響血管出現(xiàn)損傷的重要因素。FFA是脂類新陳代謝中最重要的一種物質(zhì)，一旦人體類的FFA濃度升高到一定程度，就會導致血管出現(xiàn)功能性損傷。當然，F(xiàn)FA造成血管損傷的機理有很多種，主要包括誘導致細胞凋亡、一氧化氮合酶活性改變和細胞因子刺激等。目前，氧化損傷是醫(yī)學中研究的最大熱點，有研究人員研究表明，高濃度的FFA可以使得細胞內(nèi)活性氧的濃度增大，進而導致血管損害。

激活的活性物質(zhì)會導致NO濃度的減少，進而引起血管損傷，這也是引起糖尿病血管并發(fā)癥的原因之一。同時，高糖通過黏附到細胞分子上面，以成為糖尿病內(nèi)皮功能損傷的一個重要機制。但是，造成細胞內(nèi)皮損傷的類型有很多種，但都與腎病和心血管疾病等有關(guān)。然而，游離脂肪酸和高糖對內(nèi)皮細胞功能引起的血管紊亂現(xiàn)象，研究表明導致血管收縮主要是由PKCD導致的。凝血酶也能刺激血管基因的表達，并且在HUVEC存在的情況下會刺激凝血酶。

通過研究采用靜脈血管內(nèi)外培養(yǎng)細胞的方法，探討FFA對血管的損傷作用，結(jié)果表明，高糖和高濃度的FFA對血管的NO形成具有較好的抑制作用，同時，還能刺激SICAM-1的表達，然而，在高糖培養(yǎng)中加入FFA可以增大對血管的損傷。當然，游離脂肪酸和高糖還能誘導PKCD轉(zhuǎn)位，這也說明高糖和FFA對血管的損傷具有很大的影響。

4 總結(jié)

總而言之，血管的損傷是血管疾病的主要環(huán)節(jié)，F(xiàn)FA可能會通過氧化應激等方式損傷血管，導致細胞內(nèi)皮組織中的NO濃度下降，同時，炎性物質(zhì)ICAM-1的濃度也會升高，這在糖尿病血管并發(fā)癥的發(fā)生過程中具有非常重要的作用。FFA濃度已經(jīng)成為引起糖尿病血管并發(fā)癥的重要因素，因此，應該及時對糖尿病患者FFA代謝進行控制，以改變PKCD對血管的功能，從而成為糖尿病并發(fā)癥又一個新的治療點。因此，現(xiàn)階段研究游離脂肪酸及高糖對內(nèi)皮細胞功能的影響具有非常重大的現(xiàn)實意義。

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