摘要:目的 研究復(fù)方大血藤(CDXT)對(duì)前列腺炎的防治作用,并探討白細(xì)胞總數(shù)與卵磷脂小體密度與前列腺炎的關(guān)系。方法 給予SD雄性大鼠CDXT連續(xù)7 d后,于大鼠前列腺腹葉注射角叉菜膠復(fù)制急性非細(xì)菌性前列腺炎動(dòng)物模型,術(shù)后24 h,處死大鼠,檢測(cè)前列腺液中白細(xì)胞總數(shù)和卵磷脂小體密度。結(jié)果 CDXT能抑制角叉菜膠所致大鼠前列腺炎癥反應(yīng),使前列腺液中白細(xì)胞總數(shù)減少、卵磷脂小體密度增加。結(jié)論 CDXT對(duì)前列腺炎具有較好的防治作用,可減輕前列腺炎癥組織的炎癥反應(yīng)。
關(guān)鍵詞:復(fù)方大血藤;前列腺炎;白細(xì)胞計(jì)數(shù);卵磷脂小體
前列腺炎是男科和泌尿外科的主要問題,世界范圍內(nèi)每年大約有800萬前列腺炎門診患者,近年來, 前列腺炎的發(fā)病率有逐年增加,嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量。其中,以慢性前列腺炎(CP)最為多見,而在CP中,又以慢性非細(xì)菌前列腺炎(CNP)更為多見,臨床上多以對(duì)癥治療為主,效果不佳。大量研究表明中醫(yī)藥治療前列腺炎具有獨(dú)到之處。本實(shí)驗(yàn)采用大鼠前列腺內(nèi)注射角叉菜膠建立大鼠非細(xì)菌性前列腺炎模型,觀察CDXT對(duì)前列腺炎的作用,并探討前列腺液中白細(xì)胞總數(shù)及卵磷脂小體密度與前列腺炎的關(guān)系。
1資料與方法
1.1一般資料
1.1.1動(dòng)物 雄性SD大鼠,體重200~250 g,由貴陽醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供,合格證號(hào)SCXK(黔)2002-0001。
1.1.2藥物與試劑 復(fù)方大血藤由貴州省貴定縣胡三帖藥業(yè)有限公司提供,每毫升藥液含生藥0.1 g;前列閉爾通栓(QLBETS)由黑龍江省濟(jì)仁藥業(yè)有限公司生產(chǎn),批號(hào):Z20020130;角叉菜膠 Sigma公司 批號(hào):020511。
1.2方法
1.2.1分組、給藥及造模方法 取雄性大鼠60只隨機(jī)分成6組,即對(duì)照組、模型組、CDXT低(0.16 g/Kg)、中(0.32 g/Kg)、高劑量組(0.64 g/Kg),以及陽性對(duì)照組(QLBETS 0.47 g/Kg)。對(duì)照組及模型組直腸給予等容量蒸餾水,各組按上述劑量分2次給藥,即上午9∶00及下午13∶00直腸給藥各1次/d, 連續(xù)給藥7 d。于末次給藥后4 h,用0.8%戊巴比妥鈉按0.5 mL/100 g腹腔麻醉,無菌條件下取下腹部正中切口,暴露膀胱及前列腺腹葉,對(duì)照組大鼠每只于兩側(cè)前列腺腹葉分別注射無菌生理鹽水0.1 mL,其余5組大鼠每只于相同部位分別注射1%角叉菜膠0.1 mL,關(guān)腹,腹腔注射慶大霉素(3萬u/kg)防止感染。
1.2.2觀察指標(biāo) 造模后24 h稱大鼠體重,斷頭處死大鼠,迅速取前列腺液計(jì)數(shù)白細(xì)胞總數(shù)和卵磷脂小體密度;取前列腺組織稱重并計(jì)算前列腺指數(shù)。
1.2.2.1前列腺系數(shù) 取前列腺,電子天平稱重,計(jì)算前列腺系數(shù)(前列腺重量:大鼠體重,mg/Kg)。
1.2.2.2白細(xì)胞數(shù)和卵磷脂小體密度計(jì)數(shù) 于小試管內(nèi)加入白細(xì)胞稀釋液0.38 mL,然后用微量加樣器準(zhǔn)確吸取前列腺液20 μL,擦去管尖外部的標(biāo)本,將槍頭插入小試管中稀釋液的底部,輕輕將標(biāo)本放出,并用上清液吸洗槍頭2~3次,將試管輕輕搖動(dòng)1~2 min,使前列腺液與稀釋液充分混勻。取少量已混勻的白細(xì)胞懸液,一次滴入計(jì)數(shù)板內(nèi),使池內(nèi)充滿,靜置2~3 min,待白細(xì)胞下沉后,在低倍鏡下計(jì)數(shù)四角4個(gè)大方格內(nèi)的白細(xì)胞總數(shù)。
白細(xì)胞總數(shù)/L=4個(gè)大方格內(nèi)的白細(xì)胞總數(shù)×50×106。
另取一滴前列腺液置于載玻片上,蓋上玻片,鏡下檢查卵磷脂小體密度。卵磷脂小體密度評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)。評(píng)分標(biāo)準(zhǔn):卵磷脂小體滿視野:4分;卵磷脂小體3/4視野:3分;卵磷脂小體1/2視野:2分;卵磷脂小體1/4視野:1分。
1.3統(tǒng)計(jì)方法 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以(x±s)表示,采用SPSS 11.5統(tǒng)計(jì)軟件,單因素方差分析(One-Way ANOVA),各組間兩兩比較采用LSD法,以P<0.05為差異顯著性。
2結(jié)果
模型組大鼠前列腺指數(shù)增加,白細(xì)胞總數(shù)增加,卵磷脂小體數(shù)目減少,與對(duì)照組相比,有顯著性差異(P<0.01)。CDTX高、中劑量組、QLBETS組可使前列腺指數(shù)降低,白細(xì)胞總數(shù)減少,卵磷脂小體數(shù)目增加,與模型組比較,有顯著性差異(P<0.05,P<0.01),見表1。
3討論
前列腺炎是男性泌尿外科的常見病、多發(fā)病之一,有逐年增加的趨勢(shì),有>1/2的男性受到前列腺炎的困擾,臨床上非細(xì)菌性前列腺炎最為多見,由于其發(fā)病機(jī)制不明,臨床上尚無統(tǒng)一的治療方案,抗菌治療大多無效。近年來,中藥在治療前列腺炎方面報(bào)道較多,且在很大程度上改善患者癥狀、提高生活質(zhì)量。
在本實(shí)驗(yàn)中,我們參照文獻(xiàn)[1-2],向大鼠前列腺組織內(nèi)注射角叉菜膠復(fù)制急性非細(xì)菌性前列腺炎模型。在造模過程中,我們嚴(yán)格遵循無菌操作的原則,并于術(shù)后給予慶大霉素防止感染。在急性非細(xì)菌性前列腺炎大鼠模型中,我們觀察到模型組大鼠前列腺液中白細(xì)胞總數(shù)明顯上升,卵磷脂小體密度明顯下降,與對(duì)照組比較,有顯著性差異(P<0.01),這說明角叉菜膠注射入組織以后可引起局部組織急性炎癥反應(yīng),與臨床診斷相符,表明造模成功。因此,采用角叉菜膠這種致炎劑能成功復(fù)制急性非細(xì)菌性前列腺炎,實(shí)驗(yàn)結(jié)果對(duì)指導(dǎo)臨床應(yīng)用具有較好的參考價(jià)值。
本次實(shí)驗(yàn),我們觀察到,CDXT高、中劑量組大鼠前列腺液中白細(xì)胞總數(shù)明顯下降,卵磷脂小體密度明顯上升,與模型組比較,有顯著性差異(P<0.01)。其中,白細(xì)胞總數(shù)是反映組織炎癥反應(yīng)嚴(yán)重程度的一個(gè)重要指標(biāo),當(dāng)前列腺發(fā)生炎癥時(shí),組織水腫、間質(zhì)纖維化,伴隨有大量的白細(xì)胞游出,當(dāng)白細(xì)胞游出后,在趨化因子的作用下聚集與損傷部位,從而在機(jī)體防御反應(yīng)中發(fā)揮吞噬作用和免疫作用,同時(shí)也對(duì)局部組織造成損傷和破壞,加重炎癥反應(yīng),實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明CDTX可使前列腺液中白細(xì)胞數(shù)目減少,減少炎性細(xì)胞浸潤(rùn),減輕局部組織炎癥反應(yīng);此外,卵磷脂小體是前列腺液的成分之一,在前列腺上皮細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生并被完整地分泌到前列腺液中,對(duì)精子有保護(hù)作用,并能促進(jìn)精液的液化,是反映前列腺分泌功能的指標(biāo)之一[3],前列腺發(fā)生炎癥時(shí),腺管周圍間質(zhì)有炎性細(xì)胞浸潤(rùn),腺體上皮組織有不同程度的破壞,腺腔內(nèi)有炎性細(xì)胞和炎性滲出物存留。由于炎性細(xì)胞的浸潤(rùn),使前列腺上皮細(xì)胞的分泌功能降低,卵磷脂小體分泌減少,加之巨噬細(xì)胞的吞噬作用,造成前列腺液中卵磷脂小體數(shù)量減 少[4],實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明CDXT可使前列腺液中卵磷脂小體密度增加,前列腺上皮細(xì)胞損傷減輕,分泌功能有所恢復(fù)。因此,我們得出結(jié)論,CDXT能抑制前列腺炎的炎癥反應(yīng),對(duì)非細(xì)菌性前列腺炎具有較好的防治作用,而白細(xì)胞計(jì)數(shù)和卵磷脂小體的水平可作為前列腺炎療效判定的標(biāo)準(zhǔn)之一。
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編輯/張燕