摘要：目的 考察在反相色譜系統(tǒng)中，陰離子對試劑對有機(jī)弱堿鹽保留時間的影響。方法 選擇了三種陰離子對試劑，分析了它們對三種有機(jī)弱堿鹽保留時間的影響。結(jié)果 陰離子對試劑碳鏈長度越長，弱堿鹽的保留時間越長。合適的流動相pH值對于弱堿鹽的峰形有很好的改善作用。結(jié)論 實際工作中，應(yīng)根據(jù)樣品的類型，選擇合適的離子對試劑及流動相pH值。

關(guān)鍵詞：反相色譜；陰離子對試劑；有機(jī)弱堿鹽；保留時間；pH值

在反相色譜系統(tǒng)中，有機(jī)弱堿鹽通常在固定相上的保留值很小，保留時間很短，為了改善有機(jī)弱堿鹽色譜峰的柱效，增加其在固定相上的保留值，通常會使用反相離子對色譜法分析有機(jī)弱堿鹽類化合物。

反相離子對色譜法是把離子對試劑添加到極性流動相中，被分析的樣品離子在流動相中與離子對試劑（反離子）生成不帶電的中性離子對，從而增加了樣品離子在非極性固定相中的溶解度，使分離系數(shù)增加，改善分離效果。

本文選擇了三種有機(jī)弱堿鹽：馬來酸氯苯那敏、馬來酸氨氯地平、氫溴酸東莨菪堿，分別用陰離子對試劑：庚烷磺酸鈉、辛烷磺酸鈉、十二烷基硫酸鈉對三種有機(jī)弱堿鹽在反相系統(tǒng)中固定相上保留時間的影響進(jìn)行了考察。

1儀器與試藥

Waters高效液相色譜儀、Waters1525泵、Waters2487紫外可變波長檢測器；Waters Breeze工作站。AG135電子天平，奧立龍868型酸度計。

乙睛為色譜純，庚烷磺酸鈉、辛烷磺酸鈉、十二烷基硫酸鈉（賽智科技（杭州）有限公司 色譜純）為離子對試劑，磷酸為分析純，水為純化水。

馬來酸氯苯那敏對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號100047-200305），馬來酸氨氯地平對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號100712-200401），氫溴酸東莨菪堿對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號100049-200308）。

2方法與結(jié)果

2.1色譜條件 色譜柱：Dikxna Cl8 （150mm×4.6 mm，5μm），流速：1.0ml/min；柱溫：30℃；進(jìn)樣量20μl。

2.2溶液的配制 稱取適量的馬來酸氯苯那敏、馬來酸氨氯地平、氫溴酸東莨菪堿對照品，分別用實驗用水配置成10ug/ml的對照品溶液。

2.3結(jié)果 馬來酸氯苯那敏、馬來酸氨氯地平、氫溴酸東莨菪堿均為弱堿鹽，在C18柱上幾乎不被保留，所以采用一般的HPLC對它們進(jìn)行分析有一定的難度，采用離子對色譜法增強它們在固定相上的保留，將大大優(yōu)化色譜條件。我們參考有關(guān)文獻(xiàn)[1-3]選擇合適的檢測波長及pH值條件，用三種不同的陰離子對試劑對以上三種弱堿鹽在反相色譜系統(tǒng)中保留值的影響進(jìn)行了考察，見圖1～圖10，表1。

由以上色譜圖及表1可以看出，陰離子對試劑對三種弱堿鹽在反相色譜系統(tǒng)中的保留均是有貢獻(xiàn)的，離子對試劑的碳鏈長度不同，疏水性也不同，離子對試劑的碳鏈越長，與弱堿鹽所形成的離子對越易在固定相上保留；反之，碳鏈越短，離子對的保留值越小。

合適的流動相pH 值也是離子對色譜的重要條件，它將決定離子化合物的解離度。使化合物有最大程度的解離，獲得合適的保留與響應(yīng)，但又不能超出硅膠基質(zhì)的色譜柱所能承受的范圍。

3討論

流動相pH值、離子對試劑的碳鏈長度等因素對弱堿鹽在反相色譜系統(tǒng)中的保留值影響明顯，對弱堿類這些在水溶性溶液中易發(fā)生部分離子化的樣品進(jìn)行分離時，最簡便的方法就是調(diào)節(jié)流動相的pH值，亦即對離子化過程進(jìn)行促進(jìn)，使得樣品離子化完全，樣品離子化完全后與流動相中的離子對試劑結(jié)合，從而增強樣品在反相色譜系統(tǒng)中的保留值。在實際工作中，我們應(yīng)根據(jù)弱酸、弱堿鹽樣品的不同來選擇合適的離子對試劑與流動相pH值來改善樣品的峰形，增加它們在固定相上的保留值。

參考文獻(xiàn)：

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編輯/申磊