摘要：目的 探討手工鏡檢血涂片在血液分析中的重要性。 方法 對(duì)經(jīng)血液分析儀分析結(jié)果顯示完全正常的標(biāo)本100例及570例血液分析儀檢測(cè)顯示白細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果正常而分類結(jié)果異常的標(biāo)本做血涂片進(jìn)行手工形態(tài)學(xué)觀察及鏡檢分類。 結(jié)果 經(jīng)手工鏡檢后發(fā)現(xiàn)100例結(jié)果正常標(biāo)本中有2例胞漿中顯示有中毒顆粒。570例白細(xì)胞計(jì)數(shù)正常標(biāo)本中有11.9%胞漿中含有中毒顆粒（68/570）， 嗜酸性粒細(xì)胞增高占1.40%（8/570），可見原始、幼稚細(xì)胞者占0.88%（5/570），異形淋巴細(xì)胞增高占8.25%（47/570）。結(jié)論 血液分析儀分類結(jié)果不能完全代替手工鏡檢。

關(guān)鍵詞：血涂片； 血液分析；手工鏡檢

血液分析是目前臨床上最為常用的檢驗(yàn)項(xiàng)目之一。隨著全自動(dòng)血液分析儀在臨床實(shí)驗(yàn)室的廣泛應(yīng)用，大大減輕了檢驗(yàn)人員的工作強(qiáng)度。但是這類儀器在鑒別血細(xì)胞的形態(tài)和內(nèi)部結(jié)構(gòu)等方面仍不夠完善，并存在一定的缺陷，它尚不具備識(shí)別紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板形態(tài)的能力，也不能完全替代顯微鏡對(duì)血細(xì)胞形態(tài)學(xué)的檢查。但在應(yīng)用過程中，檢驗(yàn)人員依賴血液分析儀來縮短檢驗(yàn)時(shí)間，提高檢驗(yàn)效率，而忽視了血涂片的重要性，造成較多漏診、漏報(bào)的現(xiàn)象，導(dǎo)致臨床漏診，為患者的健康造成不必要的負(fù)面影響[1]。我科在使用血液分析儀過程中，有些檢驗(yàn)人員對(duì)于白細(xì)胞總數(shù)正常但分類中性粒細(xì)胞增高及淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞增高的標(biāo)本往往忽略手工鏡檢，只把白細(xì)胞結(jié)果異?；騼x器未分類的標(biāo)本才進(jìn)行血涂片手工鏡檢檢查。本文對(duì)570例白細(xì)胞總數(shù)正常但白細(xì)胞分類顯示中性粒細(xì)胞增高、淋巴細(xì)胞增高及單核細(xì)胞增高的標(biāo)本進(jìn)行手工鏡檢，探討手工鏡檢血涂片在血液分析中的重要性，以便為臨床提供準(zhǔn)確無誤的報(bào)告結(jié)果。

1資料與方法

1.1儀器和試劑 采用Sysmes 公司生產(chǎn)的XT-1800i全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀，試劑與質(zhì)控品均為儀器配套的原裝進(jìn)口產(chǎn)品；日本生產(chǎn)的OLYMPUS生物顯微鏡；瑞氏-吉姆薩復(fù)合染液[2]。

1.2一般資料 收集本院2011年1月～2012年6月門診及住院患者血液分析儀分析結(jié)果顯示完全正常的標(biāo)本100例做為觀察組，白細(xì)胞總數(shù)正常但白細(xì)胞分類中性粒細(xì)胞增高、淋巴細(xì)胞增高及單核細(xì)胞增高的標(biāo)本570例，年齡從3歲～82歲，平均年齡40.5歲。其中男性300例，女性270例。

1.3方法 XT-1800i全自動(dòng)血液分析儀每日開機(jī)后只有在實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制范圍內(nèi)才能進(jìn)行標(biāo)本檢測(cè)。采取患者靜脈標(biāo)本2ml注入EDTA-K2真空抗凝管中，在25℃室溫下3h內(nèi)檢測(cè)完畢。再將經(jīng)過儀器檢測(cè)完畢的患者抗凝標(biāo)本制作成薄厚適宜的血片，依據(jù)全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[2]用瑞氏-姬姆薩染液染色后，選擇經(jīng)驗(yàn)豐富、技術(shù)熟練的檢驗(yàn)人員2名，在油鏡下選擇體尾交界處染色良好的區(qū)域計(jì)數(shù)分類200個(gè)白細(xì)胞，并求出各系所占比例的平均值，同時(shí)仔細(xì)觀察細(xì)胞核及胞漿等形態(tài)變化，并加以描述[2]。

2 結(jié)果

在觀察組的100份血涂片標(biāo)本中，發(fā)現(xiàn)2份中性粒細(xì)胞胞漿中出現(xiàn)中毒顆粒。570例白細(xì)胞檢測(cè)在參考區(qū)間的標(biāo)本中儀器分類顯示有300例為中性粒細(xì)胞增高，220例為淋巴細(xì)胞增高，50例單核細(xì)胞增高。經(jīng)手工鏡檢確認(rèn)，其中胞漿中可見中毒顆粒者68例，占11.9%（68/570）；嗜酸性粒細(xì)胞增高者8例，占1.40%（8/570）；可見原始、幼稚細(xì)胞者5例，占0.88%（5/570）；異形淋巴細(xì)胞增高者47例，占8.25%（47/570）。見表1。

3 討論

隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，全自動(dòng)血液分析儀正逐漸代替原有的手工操作，并且由三分群發(fā)展到今日的五分類血液分析儀。Sysmex XT-1800i全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀采用流式細(xì)胞術(shù)、激光技術(shù)和細(xì)胞化學(xué)染色技術(shù)相結(jié)合的原理，白細(xì)胞在DIFF通道采用激光和鞘流進(jìn)樣的方式運(yùn)用VCS，即體積（Volume）、傳導(dǎo)性（Conductivity）、激光散射（Scatter）技術(shù)，將在流式通道內(nèi)的每個(gè)細(xì)胞的V、C、S測(cè)量值分布于一個(gè)三維坐標(biāo)，并用特定公式計(jì)算出白細(xì)胞亞群分布區(qū)，從而進(jìn)行白細(xì)胞分類，患者的白細(xì)胞表面物質(zhì)及內(nèi)部結(jié)構(gòu)沒有大的改變時(shí)，可以進(jìn)行正確的白細(xì)胞分類，得出正確的結(jié)果[3]。但由于血液中各種細(xì)胞的多形態(tài)、多變化性，儀器識(shí)別能力有限。特別是以細(xì)胞結(jié)構(gòu)異常為主，而在細(xì)胞數(shù)量大小方面變化不大的病理細(xì)胞上顯得無能為力，如白血病、類白血病和傳染性單核細(xì)胞增多癥等的分析，因此儀器法不能完全取代顯微鏡檢查[4，5]，而只能起到篩選作用[6]。嚴(yán)重傳染病、化膿性感染、中毒、放射性腫瘤或造血系統(tǒng)性疾病等因素是導(dǎo)致白細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變的常見原因。然而在這些疾病中，異常的血細(xì)胞形態(tài)變化在血細(xì)胞分析儀檢測(cè)中往往難以體現(xiàn)，如急性感染時(shí)外周血中性粒細(xì)胞會(huì)顯著增多，出現(xiàn)明顯的核左移或核右移、血細(xì)胞體積大小不均、中毒顆粒、空泡及核變性等導(dǎo)致的血細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變；在傳染性單核細(xì)胞增多癥、某些病毒感染、過敏狀態(tài)，支原體肺炎等時(shí)會(huì)出現(xiàn)異形淋巴細(xì)胞；上述疾病中所導(dǎo)致的血細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變，僅僅依賴全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀檢測(cè)將難以獲取準(zhǔn)確有效的臨床參數(shù)[7，8]。本研究顯示即使是在血液分析結(jié)果完全正常的觀察組的血涂片標(biāo)本中也會(huì)出現(xiàn)中毒顆粒。白細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果正常而分類結(jié)果異常的570例標(biāo)本經(jīng)手工鏡檢結(jié)果顯示，即使儀器提供了分類結(jié)果，但是由于識(shí)別能力有限，對(duì)中毒顆粒、幼稚細(xì)胞及異形淋巴細(xì)胞不能識(shí)別。因此臨床檢驗(yàn)除了使用儀器外，顯微鏡手工復(fù)檢對(duì)于保證檢驗(yàn)質(zhì)量是不容忽視的。一旦忽略形態(tài)學(xué)觀察，會(huì)使許多疾病得不到正確的診斷治療，嚴(yán)重危害醫(yī)療質(zhì)量以致造成漏檢、漏診及誤診的現(xiàn)象[9]，甚至引發(fā)醫(yī)療糾紛。傳統(tǒng)的血細(xì)胞涂片鏡檢雖然操作繁瑣，但是它可以直觀的區(qū)分和鑒定各類細(xì)胞形態(tài)學(xué)上的改變，有效地彌補(bǔ)了血液分析儀自身的缺陷與不足，為臨床提供更為有效的血細(xì)胞參數(shù)。因此血細(xì)胞形態(tài)學(xué)分析在血液常規(guī)檢驗(yàn)中發(fā)揮著十分重要的作用。檢驗(yàn)界很多老前輩都講到\"準(zhǔn)確地白細(xì)胞分類不能完全脫離顯微鏡檢查\" [10]。同時(shí)呼吁檢驗(yàn)界重視形態(tài)學(xué)檢查，加強(qiáng)基本技能培訓(xùn)，不斷提高醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)人員的素質(zhì)和學(xué)術(shù)水平。因此無論儀器結(jié)果如何，均不能完全代替手工血涂片鏡檢。應(yīng)用全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀的多項(xiàng)檢測(cè)原理對(duì)各種血細(xì)胞參數(shù)進(jìn)行分析檢測(cè)，并與血涂片制備、染色以及顯微鏡檢查有效結(jié)合，將為臨床提供更加有效、精確的血細(xì)胞檢測(cè)參數(shù)，這對(duì)疾病的診斷與治療有著重要的臨床指導(dǎo)意義

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編輯/許言