摘要：中藥材的真?zhèn)螁栴}是困擾中藥材品種質(zhì)量的關(guān)鍵問題，本文闡述了近年來中藥鑒定技術(shù)的新進(jìn)展，并對(duì)中藥鑒定技術(shù)發(fā)展進(jìn)行展望。

關(guān)鍵詞：中藥；鑒定技術(shù)；進(jìn)展

中藥的應(yīng)用歷史悠久，萬余種中藥材存在著諸如品種混亂、真?zhèn)坞y辨等現(xiàn)狀，古代僅靠有經(jīng)驗(yàn)的老藥工眼觀、手摸、口嘗，一些新技術(shù)也逐漸應(yīng)用在中藥鑒定領(lǐng)域，包括較為傳統(tǒng)的基原鑒定、形態(tài)鑒定、顯微鑒定、理化鑒定的方法，近年來常用的光譜技術(shù)、同工酶分析技術(shù)以及隨著分子生物學(xué)迅速發(fā)展應(yīng)用于中藥鑒定的PCR技術(shù)等等，本文就近年來新發(fā)展應(yīng)用的中藥鑒定技術(shù)展開綜述，以利于新技術(shù)的推廣使用。

1 近紅外光譜技術(shù)

近紅外光譜技術(shù)是一種結(jié)合了光譜技術(shù)與化學(xué)技術(shù)的新技術(shù)，其原理主要是通過分子的振動(dòng)，測定相應(yīng)的光譜，利用相關(guān)數(shù)據(jù)庫，將未知樣本與建立的校正模型進(jìn)行對(duì)比，以達(dá)到定性及定量分析的目的[1]。近紅外光譜技術(shù)具有操作簡單，分析速度快，效率高，花費(fèi)少，結(jié)果重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)。本技術(shù)能夠應(yīng)用于鑒定多種中藥藥材，結(jié)果準(zhǔn)確迅速，從而為鑒別其質(zhì)量的優(yōu)劣提供基礎(chǔ)。另外，近紅外光譜技術(shù)還可以應(yīng)用于中成藥的定性鑒定，原理主要是通過不同組分的指紋圖譜之間的差異建立識(shí)別模型，以達(dá)到對(duì)于不同配伍比例的中藥復(fù)方的鑒別。盡管如此，近紅外光譜技術(shù)在應(yīng)用中仍存在一些缺陷，例如鑒定樣本的組分含量要再0.1%以上，檢測靈敏度相對(duì)較低，并且在藥材鑒定時(shí)，需要對(duì)原始圖譜進(jìn)行準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)處理[2]。

2 同工酶分析技術(shù)

同工酶是基因編碼的產(chǎn)物，可以反應(yīng)出編碼 DNA 的變化，因此能夠通過分析同工酶酶譜的變化獲得所需的遺傳信息。電泳法是同工酶技術(shù)中應(yīng)用最廣泛的方法。同工酶電泳的操作方法與蛋白質(zhì)電泳的原理基本一致。由于不同同工酶的電荷、分子大小以及形狀不同，在電泳作用和分子篩作用下，聚丙烯酰胺凝膠中的同工酶會(huì)產(chǎn)生不同的移動(dòng)速度，從而被分離。而同工酶的染色主要是通過酶催化特異性底物發(fā)生生化反應(yīng)形成有色產(chǎn)物而實(shí)現(xiàn)的。目前研究的同工酶有數(shù)百種，而主要用于中藥鑒定的包括過氧化物酶、過氧化氫酶、酯酶、淀粉酶、超氧化物歧化酶、乳酸脫氫酶等十幾種[3]。同工酶能夠在一定程度上顯示不同種源間遺傳的差異。因此，同工酶在真?zhèn)舞b別、遺傳種質(zhì)的分離與篩選、藥物品種鑒定和生物多樣性等研究中有廣闊應(yīng)用前景。

3 X射線衍射技術(shù)

X線衍射技術(shù)作為結(jié)構(gòu)和成分分析的現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)，具有操作簡便分析快速，所需樣品量少，所得圖譜信息量大等優(yōu)點(diǎn)，目前廣泛應(yīng)用于礦物類中藥的鑒別。主要分為單晶X衍射和多晶X衍射。單晶X衍射是晶體結(jié)構(gòu)測定的方法。能夠得到樣本的鍵長、鍵角、配位數(shù)等晶體化學(xué)數(shù)據(jù)，還可以通過高分辨電子密度分辨圖進(jìn)一步得到價(jià)電子分布、原子及離子的大小、鍵型等數(shù)據(jù)；多晶X射線衍射又叫粉末X射線衍射，其得到的衍射圖是各組分衍射效應(yīng)疊加而成的，在混合物組成恒定的情況下，所得衍射圖譜就可作為該混合物的特征性圖譜。不同礦物藥的成分各不相同，因此X射線衍射圖譜也有差異，也就實(shí)現(xiàn)了通過X衍射對(duì)礦物藥的鑒別。但是，礦物藥材往往來源復(fù)雜，同一種礦物的化學(xué)成分在環(huán)境、采集時(shí)間、儲(chǔ)存方法等影響下也會(huì)發(fā)生差異，所以同一種礦物藥的X衍射圖譜可能不同。在實(shí)際運(yùn)用中，往往需首先采集大量不同樣品，建立其X衍射譜的變化范圍和幅度，才能進(jìn)行準(zhǔn)確的鑒定。X衍射技術(shù)主要研究和應(yīng)用的方向是礦物藥的鑒定，如雄黃、白礬、滑石等，在鑒別礦物藥炮制品鑒定方面具有明顯優(yōu)勢(shì)，能夠通過觀察一些礦物藥生品與其炮制品圖譜清晰的區(qū)別其生品與煅品[4]。X射線衍射技術(shù)還能夠應(yīng)用于確定礦物藥成分及其定量，在礦物藥鑒定的應(yīng)用中具有廣闊的前景。

4 基于 PCR 技術(shù)的現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)

隨著分子生物學(xué)技術(shù)的迅速發(fā)展，尤其是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）技術(shù)的問世，基于PCR 技術(shù)的現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)在中藥鑒定中也得到很多應(yīng)用[5]，由于其準(zhǔn)確性和可靠性較高，因此具有其他方法難以比擬的優(yōu)勢(shì)在PCR 技術(shù)的基礎(chǔ)上，現(xiàn)代分子生物學(xué)的許多操作技術(shù)廣泛應(yīng)用于中藥的鑒定，如：RAPD技術(shù)主要用于藥用植物的鑒定和遺傳多樣性研究，具有多態(tài)性高和重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)；ISSR-PCR技術(shù)利用放射性標(biāo)記的探針，能夠構(gòu)建出多態(tài)性DNA圖譜；PCR-RFLP 技術(shù)用特異性的引物對(duì)模板DNA擴(kuò)增，獲得特異性產(chǎn)物，并進(jìn)行酶解，構(gòu)建物理圖譜，在鑒定中具有準(zhǔn)確可靠，重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)；還有尚處于起步階段mRNA 差異顯示技術(shù)，能夠鑒定栽培品種與野生種、道地藥材與普通藥材之間的差異。

5 結(jié)論

除了上述方法外，尚有中藥指紋圖譜技術(shù)、DNA條形碼技術(shù)[6]等新技術(shù)在不斷研究發(fā)展，這些新技術(shù)的發(fā)展與應(yīng)用對(duì)于中藥的真?zhèn)舞b別和質(zhì)量控制有非常重大的意義，為中醫(yī)藥在安全性、療效性和科學(xué)性方面提高打下基礎(chǔ)，更好的應(yīng)用于臨床治療之中。

參考文獻(xiàn)：

[1]王緒新.近紅外光譜技術(shù)在中藥鑒定中的應(yīng)用研究[J].中國實(shí)用醫(yī)藥，2013，10（8）：254.

[2]王星，白雁，陳志紅，等.近紅外光譜法測定連翹中連翹酯苷含量[J].中國中藥雜志，2009，34（16）：2071-2075.

[3]牛紅軍，姜明，楊官娥.同工酶分析技術(shù)在中藥鑒定中的應(yīng)用進(jìn)展[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥，2013，12（6）：2976-2978.

[4]黃必勝，袁明洋，陳科力. X射線衍射技術(shù)在礦物類中藥鑒定中的研究進(jìn)展[J].中國現(xiàn)代中藥，2013，11（4）：917-921.

[5]詹立平，趙鑫，劉志梅.基于PCR技術(shù)的現(xiàn)代分子生物學(xué)操作在中藥鑒定中的應(yīng)用[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2013，10（7）：25-26+29.

[6]中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所所長：陳士林.中藥鑒定領(lǐng)域新突破：DNA條形碼[N].健康報(bào)，2013-10-16005.編輯/王敏