摘要：目的 探究直接藥敏試驗(yàn)與常規(guī)藥敏試驗(yàn)在臨床血液細(xì)菌鑒定與檢驗(yàn)中的臨床應(yīng)用價(jià)值，并對(duì)二者進(jìn)行比較。方法 回顧性分析本院2010年10月～2013年10月診斷陽(yáng)性的血液樣品資料，對(duì)陽(yáng)性樣品進(jìn)行培養(yǎng)后，進(jìn)行直接藥敏試驗(yàn)與常規(guī)藥敏試驗(yàn)，比較兩種檢測(cè)結(jié)果。結(jié)果 共培養(yǎng)485例陽(yáng)性樣品，其中直接藥敏試驗(yàn)檢出410例，常規(guī)藥敏試驗(yàn)檢出485例，符合率為84.54%。485例樣品中，革蘭氏陽(yáng)性菌（G+）87株，占總數(shù)的17.94%；革蘭氏陰性菌（G-）398株，占總數(shù)的82.06%，兩種方法檢測(cè)G-菌結(jié)果差異不顯著（P>0.05）。結(jié)論 臨床上采用直接藥敏試驗(yàn)和常規(guī)藥敏試驗(yàn)進(jìn)行血液細(xì)菌鑒定與檢驗(yàn)，能達(dá)到快速確定病原菌的藥敏特性的目的，從而減少了盲目用藥。

關(guān)鍵詞：直接藥敏試驗(yàn)；常規(guī)藥敏試驗(yàn)；血液細(xì)菌；鑒定與檢驗(yàn)；價(jià)值比較

近年來(lái)，由于臨床上抗生素的濫用現(xiàn)象嚴(yán)重，導(dǎo)致耐藥菌的出現(xiàn)進(jìn)而引起抗生素的治療失效[1]。臨床上，做好細(xì)菌的臨床檢驗(yàn)，確定各種細(xì)菌的藥物敏感性具有重要的意義，它是臨床用藥的前提和依據(jù)[2]。隨著現(xiàn)代醫(yī)療技術(shù)的進(jìn)步，越來(lái)越多智能化、自動(dòng)化的醫(yī)療儀器已經(jīng)在臨床治療的各個(gè)環(huán)節(jié)中得到廣泛應(yīng)用，為臨床上各種疾病的診斷和治療提供了極大的幫助[3]。先進(jìn)的醫(yī)療儀器具有其檢測(cè)特異性和靈敏性的優(yōu)勢(shì)，但是通常自動(dòng)化的醫(yī)療機(jī)器往往價(jià)格均較為昂貴，難以在基層醫(yī)院推廣應(yīng)用。藥敏試驗(yàn)法和生化微管法細(xì)菌鑒定目前在基層醫(yī)院的檢測(cè)中仍占有重要地位，尤其是對(duì)菌血癥及敗血癥患者及時(shí)的獲取有效的抗生素的藥敏結(jié)果具有著重要的臨床治療意義[4-5]。本研究回顧性分析本院2010年10月～2013年10月診斷陽(yáng)性的血液樣品資料，對(duì)陽(yáng)性樣品進(jìn)行培養(yǎng)后，進(jìn)行直接藥敏試驗(yàn)與常規(guī)藥敏試驗(yàn)，比較兩種檢測(cè)結(jié)果，探究直接藥敏試驗(yàn)與常規(guī)藥敏試驗(yàn)在臨床血液細(xì)菌鑒定與檢驗(yàn)中的臨床應(yīng)用價(jià)值。

1 資料與方法

1.1一般資料 本研究中485例均為我院2010年10月～2013年10月診斷陽(yáng)性的血液樣品，全自動(dòng)血培養(yǎng)儀培養(yǎng)（北京伯盛泰科技有限公司，京藥監(jiān)械（準(zhǔn)）字2012第2400316號(hào)），細(xì)菌鑒定時(shí)所使用的API鑒定板條（Remel Inc.國(guó)食藥監(jiān)械（進(jìn)）字2012第2401104號(hào)）。其他儀器及試劑包括： 細(xì)菌鑒定、藥敏綜合板、藥敏紙片（Becton Dickinson and Company，國(guó)食藥監(jiān)械（進(jìn)）字2012第2403040號(hào)）、MH干粉、血平板（濟(jì)南賽爾生物科技有限公司，魯濟(jì)食藥監(jiān)械（準(zhǔn)）字2012第1400066號(hào)）、巧克力平板（烏魯木齊宏信科創(chuàng)生物科技有限公司，新烏食藥監(jiān)械（準(zhǔn)）字2011第1400089號(hào)）、麥康凱平板（成都瑞琦科技實(shí)業(yè)有限責(zé)任公司，川食藥監(jiān)械（準(zhǔn)）字2011第2400016號(hào)）、無(wú)菌拭子及一次性無(wú)菌注射器。

1.2 方法

1.2.1 直接藥敏試驗(yàn) 從全自動(dòng)血培養(yǎng)儀取出陽(yáng)性樣本后用無(wú)菌注射器抽取部分樣品并加入無(wú)菌離心管中，置入離心機(jī)內(nèi)進(jìn)行離心1500rpm，離心5min。然后吸取離心管上層清液置入另一離心管中，3000rpm離心15min，棄去上清后，對(duì)沉淀物進(jìn)行0.9%氯化鈉溶液洗滌3次，收集均細(xì)胞黏液行涂片革蘭染色，顯微鏡下觀察細(xì)菌形態(tài)。結(jié)果為常規(guī)菌則接種到MH-平板上，無(wú)菌拭子涂抹均勻并貼上藥敏紙片。革蘭氏染色結(jié)果為革蘭陽(yáng)性球菌（G+）呈鏈狀，則以MH+羊血平板并進(jìn)行初步藥敏試驗(yàn)，根據(jù)結(jié)果選擇適當(dāng)酶試驗(yàn)，最后調(diào)整菌液濃度到6.2×102cfu/L涂到綜合板上行藥敏試驗(yàn)和細(xì)菌鑒定。

1.2.2 常規(guī)藥敏試驗(yàn) 同樣無(wú)菌環(huán)境中取陽(yáng)性樣本接種于各種不同平板，放置于溫度為35℃，5% CO2的孵箱中孵育18～24h后，之后進(jìn)行革蘭染色。同樣根據(jù)染色檢測(cè)結(jié)果選擇相應(yīng)的酶試驗(yàn)。

1.3藥敏紙片選擇 一般情況下，革蘭陰性桿菌（G-）多選擇頭孢類抗生素，革蘭氏陽(yáng)性菌（G+）多選擇β-內(nèi)酰胺類、部分萬(wàn)古霉素及大環(huán)內(nèi)酯類。

1.4數(shù)據(jù)處理 本研究中所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用SPSS20.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)，表示方法采用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示；計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，結(jié)果以P<0.05為差異顯著。

2 結(jié)果

共培養(yǎng)485例陽(yáng)性樣品，其中直接藥敏試驗(yàn)檢出410例，常規(guī)藥敏試驗(yàn)檢出485例，符合率為84.54%。485例樣品中，革蘭氏陽(yáng)性菌（G+）87株，占總數(shù)的17.94%；革蘭氏陰性菌（G-）398株，占總數(shù)的82.06%，兩種方法檢測(cè)G-菌結(jié)果差異不顯著（P>0.05），見(jiàn)表1。

3 討論

隨著臨床上抗生素使用的增多，不合理的抗生素使用率逐年增高，多重耐藥細(xì)菌感染的患者比例也明顯增高，這往往誘發(fā)患者全身感染性疾病，敗血癥和菌血癥是臨床嚴(yán)重危及患者生命的疾病，因此快速準(zhǔn)確的藥敏試驗(yàn)與細(xì)菌鑒定是臨床診斷和治療的關(guān)鍵。故高效、快速耐藥性試驗(yàn)和細(xì)菌鑒定在臨床治療方面顯得極為重要，從而能快速控制感染，提高患者的治愈率[6]。

目前，臨床血液細(xì)菌鑒定與檢驗(yàn)以常規(guī)藥敏試驗(yàn)最為常用。其基本原理為臨床定性試驗(yàn)，往往通過(guò)測(cè)量抑菌環(huán)直徑與抗生素的抑菌濃度來(lái)設(shè)計(jì)相關(guān)試驗(yàn)。由于該方法對(duì)環(huán)境和設(shè)備等條件要求較高，在臨床推廣方面造成了許多不便；其次常規(guī)藥敏試驗(yàn)檢測(cè)所需時(shí)間一般較長(zhǎng)，通常在2～3d后才能獲得試驗(yàn)結(jié)果，沒(méi)有得到藥敏結(jié)果前，往往只能依靠醫(yī)生臨床經(jīng)驗(yàn)去判斷，選擇相應(yīng)的抗生素進(jìn)行治療，此時(shí)，對(duì)于感染多重耐藥性細(xì)菌的患者臨床療效往往較差，并且導(dǎo)錯(cuò)過(guò)誤最佳治療時(shí)間，從而加重病情[7]；該方法還存在誤差率偏高，相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道，在測(cè)量抑菌直徑時(shí)誤差約在±2mm左右[8]，忽略誤差后準(zhǔn)確率約>95%。種種條件均限制常規(guī)藥敏試驗(yàn)快速、高效檢驗(yàn)。

直接藥敏試驗(yàn)最早是1973年提出后便逐漸引起各界學(xué)者的廣泛關(guān)注，1986年美國(guó)Fincgold等人再次提出這一說(shuō)法，他們認(rèn)為直接對(duì)臨床患者血液標(biāo)本進(jìn)行藥敏檢驗(yàn)，可達(dá)到快速、高效檢驗(yàn)?zāi)康腫9]。

本研究結(jié)果表明，臨床上采用直接藥敏試驗(yàn)和常規(guī)藥敏試驗(yàn)進(jìn)行血液細(xì)菌鑒定與檢驗(yàn)，能達(dá)到快速確定病原菌的藥敏特性的目的，從而減少了盲目用藥，提高臨床治愈率和治療效果。

參考文獻(xiàn)：

[1]葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].3版.東南大學(xué)出版社，2006，11（3）：739-740.

[2]王亞霞，蘇振杰，任鳳秋.K-B紙片瓊脂擴(kuò)散法檢測(cè)細(xì)菌藥物敏感試驗(yàn)的影響因素分析[J].中國(guó)醫(yī)藥指南，2009，7（5）：41-42.

[3]鑫海.Microscan AS-4自動(dòng)微生物分析儀在細(xì)菌室間質(zhì)控中的評(píng)價(jià)[J].上海醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志，2000，15（1）：22-23.

[4]吳紹蓮，胡辛蘭，池春燕.血培養(yǎng)常見(jiàn)病原菌的變遷和耐藥性分析[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2013，31（2）：138-140.

[5]漆堅(jiān).全自動(dòng)細(xì)菌鑒定儀對(duì)血培養(yǎng)陽(yáng)性標(biāo)本直接鑒定及藥敏試驗(yàn)比較[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2006，27（5）：397-398.

[6]Clinical and Laboratory Standards Institute.Performance standards for antimicrobial susceptibility[J].Tweenty-first informational supplement，2012，M100-S2232（3）：62-78.

[7]李慧.兩種細(xì)菌鑒定法在臨床血液檢驗(yàn)中的應(yīng)用[J].現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2011，38（9）：1705-1706.

[8]陳歡歡，文怡，劉根，等.焰血培養(yǎng)陽(yáng)性標(biāo)本直接細(xì)菌鑒定和藥敏中應(yīng)用分離膠試管的方法探討[J].實(shí)用臨床醫(yī)藥雜志，2011，15（15）：156-157.

[9]田月如，阮斐怡，劉紅，等.革蘭陰性菌引起的血培養(yǎng)陽(yáng)性標(biāo)本的直接鑒定藥敏試驗(yàn)[J].中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志，2011，（3）：220-224.編輯/蘇小梅