摘要：目的 探討Her-2蛋白在胃腺癌組織中的表達(dá)及其與胃腺癌各臨床病理參數(shù)之間的相關(guān)性。方法 應(yīng)用免疫組化法檢測(cè)88例胃腺癌組織中Her-2表達(dá)狀態(tài)，并采用χ2檢驗(yàn)進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。結(jié)果 胃腺癌組織中Her-2蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為43.18% （38/88） ，Her-2蛋白表達(dá)與胃腺癌患者的性別、年齡、腫瘤部位、浸潤(rùn)深度無相關(guān)性（P>0.05），而與腫瘤分化程度及區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有相關(guān)性 （P<0.05）。結(jié)論 Her-2可以作為評(píng)估胃癌發(fā)展及預(yù)后的指標(biāo)，并為曲妥珠單抗在Her-2過表達(dá)的胃腺癌中的臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。

關(guān)鍵詞：Her-2；胃癌；免疫組化；曲妥珠單抗

胃癌占惡性腫瘤死亡率第2位，嚴(yán)重威脅人類健康。手術(shù)治療是已知的可完全治愈的療法，但仍有多數(shù)患者在病灶完全切除后出現(xiàn)復(fù)發(fā)，即使再聯(lián)合放化療，5年生存率仍低至20%～30%。更不幸的是，有約65%的胃癌患者在發(fā)現(xiàn)時(shí)就已達(dá)到中晚期[1]，預(yù)后差。近年來，隨著腫瘤分子生物學(xué)的發(fā)展，開展胃癌的靶向治療已勢(shì)在必行，人類表皮生長(zhǎng)因子受體2（human epidermal growth factor receptor-2，Her-2）正是近來的研究熱點(diǎn)之一。本文通過免疫組化法檢測(cè)88例胃腺癌組織中的Her-2蛋白表達(dá)，探討其與患者各臨床參數(shù)間的相關(guān)性，為胃癌的發(fā)展、預(yù)后及治療提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 病例材料收集2013年1月～2014年2月重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院胃癌手術(shù)病例88例，男性61例，女性27例，比例約為2.26：1，年齡28～86歲，中位年齡60.5歲，其中60歲以下41例，60歲及以上47例。因納入研究的病例數(shù)不大，將病例中腫瘤分化程度分為低分化（42例）、中高分化（46例）兩組。將腫瘤浸潤(rùn)深度分為浸潤(rùn)深度未及漿膜層組（31例）、浸潤(rùn)深度至漿膜及以外組（57例）。有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移53例， 無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移35例。Her-2（-及1+）為50例，Her-2（2+及3+）為38例。所有病例臨床病歷資料完整，術(shù)后病理證實(shí)均為胃腺癌。所有患者術(shù)前均未接受過放化療及免疫治療，無嚴(yán)重基礎(chǔ)疾病或合并其他腫瘤。

1.2方法

1.2.1免疫組化方法 采用免疫組化法對(duì)胃癌組織進(jìn)行染色處理，染色所用的一抗、染色試劑盒、底物顯色劑等均購(gòu)自同一公司，操作過程均按公司給出的說明書進(jìn)行。

1.2.2 Her-2免疫組化結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn) 參照Hoffmann等[2]針對(duì)胃癌Her-2表達(dá)的評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：對(duì)于中等到高強(qiáng)度的\"U\"型（基底側(cè)膜、側(cè)膜）不完全腫瘤細(xì)胞著色仍可判定為陽(yáng)性，具體判定標(biāo)準(zhǔn)如下：①無反應(yīng)或<10%的腫瘤細(xì)胞膜著色（-）；②≥10%腫瘤細(xì)胞出現(xiàn)微弱的、部分膜染色（1+）；③≥10%腫瘤細(xì)胞有弱到中度的\"U\"型或完全性膜染色（2+）；④≥10%腫瘤細(xì)胞\"U\"型或完全性膜強(qiáng)染色（3+）。本研究視-及1+為陰性，2+及3+為陽(yáng)性[3]。

1.2.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 16.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，采用兩個(gè)（或多個(gè)）樣本率比較的χ2檢驗(yàn)，以P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1胃腺癌組織中Her-2的表達(dá) Her-2在胃腺癌組織中的陽(yáng)性信號(hào)為細(xì)胞膜棕黃色或棕褐色染色（圖1）。88例胃腺癌組織中Her-2陽(yáng)性表達(dá)率為43.18%（38/88）。

a） Her-2（-） b） Her-2（1+）

c） Her-2（2+） d） Her-2（3+）

圖1 胃癌組織中Her-2的表達(dá)（免疫組化法×20）

2.2 Her-2蛋白表達(dá)與胃腺癌臨床參數(shù)間的關(guān)系（表1）：所有病例中，男、女患者Her-2表達(dá)陽(yáng)性分別為25例、13例，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。年齡≥60歲者Her-2陽(yáng)性24例，<60歲者Her-2陽(yáng)性14例，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。腫瘤部位分為賁門胃底、胃體、胃角、胃竇四組，Her-2表達(dá)陽(yáng)性的例數(shù)分別為13例、6例、9例、10例，四者差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。中、高分化Her-2表達(dá)陽(yáng)性26例（高分化0例）（陽(yáng)性表達(dá)率56.52%），低分化Her-2表達(dá)陽(yáng)性12例（陽(yáng)性表達(dá)率28. 57%），兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。浸潤(rùn)深度未及漿膜層組Her-2表達(dá)陽(yáng)性13例，漿膜及以外組Her-2表達(dá)陽(yáng)性25例，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。有區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者Her-2表達(dá)陽(yáng)性28例（陽(yáng)性表達(dá)率52.83%），無區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者Her-2表達(dá)陽(yáng)性10例（陽(yáng)性表達(dá)率28.57%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。因此，結(jié)果表明：胃腺癌組織中Her-2過表達(dá)與年齡、性別、腫瘤部位、浸潤(rùn)深度無關(guān)，而與腫瘤分化程度及區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。提示Her-2的高表達(dá)對(duì)胃腺癌的分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有一定的參考意義。

3 討論

Her-2基因，定位于17q21，是表皮生長(zhǎng)因子家族的第二個(gè)成員，編碼相對(duì)分子質(zhì)量為185KD的跨膜受體樣蛋白，具有酪氨酸激酶活性，Her-2通過自身形成同源二聚體或與家族其他成員形成異源二聚體后，在胞外配體區(qū)與其配體相互作用，開啟一系列細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖與凋亡。Her-2基因是一種原癌基因，正常情況下編碼的蛋白僅在極少數(shù)組織內(nèi)低水平表達(dá)，但可以在某些刺激因素作用下被激活，而過度表達(dá)，可見于多種人類惡性腫瘤組織中，并可能對(duì)這些腫瘤的發(fā)生、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移等起著重要作用。

文獻(xiàn)報(bào)道胃癌中Her-2基因的過表達(dá)率為7%～53.4%[4-6]，本研究結(jié)果顯示胃癌Her-2過表達(dá)率為43.18%，在文獻(xiàn)報(bào)道范圍內(nèi)。He C等[6]研究發(fā)現(xiàn)，Her-2陽(yáng)性表達(dá)與患者性別、年齡及腫瘤部位無關(guān)，而腸型胃癌和分化良好的胃癌的Her-2陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于彌漫型/混合型和分化差的胃癌（28.57%vs13.43%，P<0.05；37.25%vs11.64%，P<0.001），本研究顯示Her-2蛋白過表達(dá)與患者性別、年齡及腫瘤部位、浸潤(rùn)深度無關(guān)（P>0.05），但與胃腺癌的分化程度相關(guān)，低分化腺癌陽(yáng)性表達(dá)率（ 28.57%）明顯低于高、中分化腺癌陽(yáng)性表達(dá)率（ 56.52%）（P<0.05），兩研究結(jié)果基本一致。本研究還顯示有區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的陽(yáng)性表達(dá)率（ 52.83%） 明顯高于無區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者的陽(yáng)性表達(dá)率（ 28.57%）（P<0.05），這提示Her-2與區(qū)域淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移有密切關(guān)系，但轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中Her-2表達(dá)的情況與對(duì)應(yīng)病例的胃癌組織中的Her-2表達(dá)是否一致呢？有研究[7]發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中的Her-2陽(yáng)性表達(dá)與原發(fā)灶并不一致，排除免疫組化法檢測(cè)使用的抗體批次不同等人為因素后，這一結(jié)論可以通過胃癌的高度異質(zhì)性這一論點(diǎn)來支持。那么，對(duì)于原發(fā)灶和轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中Her-2表達(dá)不一致的患者來說，原發(fā)灶Her-2陰性，而轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)Her-2表達(dá)陽(yáng)性的患者是否適用于分子靶向治療呢？而又有研究顯示，原發(fā)灶和轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中Her-2表達(dá)一致，既然這樣，針對(duì)那些獲取原發(fā)灶有困難的情況下，我們是不是就可以用轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)替代原發(fā)灶來檢測(cè)Her-2狀態(tài)呢？看來，我們的探索仍然任重而道遠(yuǎn)。

曲妥珠單抗（trastuzumab），是一種選擇性作用于Her-2蛋白的人源化單抗，通過封閉Her-2信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路而抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)。2009年美國(guó)臨床腫瘤協(xié)會(huì)（ASCO）公布了Bang等國(guó)際多中心的前瞻性、隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)即ToGA 臨床研究結(jié)果，即在標(biāo)準(zhǔn)化療方案中添加曲妥珠單抗，可以顯著延長(zhǎng)Her-2 陽(yáng)性的晚期胃癌患者的中位生存時(shí)間及無進(jìn)展生存期。因此，隨著對(duì)Her-2靶向藥物的進(jìn)一步研究，曲妥珠單抗等靶向藥物聯(lián)合手術(shù)及放化療可能成為胃癌患者的一種新選擇。

由于研究條件有限，我們并未針對(duì)Her-2（2+）病例進(jìn)一步行熒光原位雜交法檢測(cè)，未探討Her-2與腫瘤的大小、TNM分期、Lauren分型等其他臨床參數(shù)的相關(guān)性，造成研究結(jié)果的局限性，期待更精細(xì)、更大樣本的研究。

參考文獻(xiàn)：

[1]Meza-Junco J，Sawyer MB.Metastatic gastric cancer-focus on targeted therapies[J].Biologics，2012，6：137-146.

[2]Hofmann M，Stoss O，Shi D，et al.Assessment of a HER2 scoring system for gastric cancer：results from a validation study[J].Histopathology，2008，52（7）：797-805.

[3]Fan XS，Chen JY，Li CF，et al.Differences in HER2 over-expression between proximal and distal gastric cancers in the Chinese population[J].World journal of gastroenterology：WJG，2013，19（21）：3316-3323.

[4]Tanner M，Hollmen M，Junttila TT，et al.Amplification of HER-2 in gastric carcinoma： association with Topoisomerase IIα gene amplification，intestinal type，poor prognosis and sensitivity to trastuzumab[J].Annals of Oncology，2005，16（2）：273-278.

[5]Marx AH，Tharun L，Muth J，et al.HER amplification is highly homogenous in gastric cancer [J].Human pathology，2009，40（6）：769-777.

[6]He C，Bian XY，Ni XZ，et al.Correlation of human epidermal growth factor receptor 2 expression with clinicopathological characteristics and prognosis in gastric cancer[J].World journal of gastroenterology：WJG，2013，19（14）：2171-2178.

[7]Kim MA，Lee HJ，Yang HK，et al.Heterogeneous amplification of ERBB2 in primary lesions is responsible for the discordant ERBB2 status of primary and metastatic lesions in gastric carcinoma[J].Histopathology，2011，59（5）：822-831編輯/哈濤