摘要：目的 調(diào)查本院近3年來分離的大腸埃希菌臨床分布及耐藥現(xiàn)狀，為臨床合理用藥提供依據(jù)。方法 對(duì)2011年～2013年我院臨床送檢各類標(biāo)本進(jìn)行分離培養(yǎng)鑒定，采用K-B紙片擴(kuò)散法檢測(cè)其對(duì)抗菌藥物的耐藥性。結(jié)果 共分離出大腸埃希菌589株，主要分離自尿液標(biāo)本，中占中占47%，傷口分泌物標(biāo)本中占50%，痰標(biāo)本中占7%。，超廣譜β-內(nèi)酰胺酶（ESBLs）大腸埃希菌143株，陽性率24.7%。藥敏試驗(yàn)結(jié)果顯示，產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌對(duì)頭孢菌素、β‐內(nèi)酰胺類抗菌藥物均表現(xiàn)出較高的耐藥性，對(duì)慶大霉素的耐藥率降低，對(duì)阿米卡星耐藥率保持在低水平，對(duì)環(huán)丙沙星、妥布霉素和復(fù)方新諾明的耐藥率無明顯變化，保持在較高水平，未檢出耐亞胺培南、美諾培南的大腸埃希菌。結(jié)論 碳青霉烯類藥物與酶抑制劑聯(lián)合制劑是目前治療產(chǎn)ESBLs 大腸埃希菌最有效的藥物。臨床應(yīng)根據(jù)藥敏結(jié)果制定合理的用藥方案。

關(guān)鍵詞：大腸埃希菌；超廣譜β-內(nèi)酰胺酶；耐藥性

大腸埃希菌是臨床最常見病原菌之一，可引起各種類型的感染，近年來，隨著廣譜抗菌藥物的大量使用，產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶（ESBLs）的菌株不斷增加，它是由質(zhì)粒編碼的能使細(xì)菌對(duì)頭孢菌素類、β-內(nèi)酰胺類等臨床常規(guī)抗菌藥物耐藥的一類酶，可在不同菌株間傳播[1]因其耐藥性強(qiáng)，耐藥譜廣，易傳播，已成為重要的監(jiān)測(cè)目標(biāo)菌之一[2]。定期監(jiān)測(cè)不僅為臨床合理使用抗菌藥物提供了可靠的實(shí)驗(yàn)依據(jù)，還可避免細(xì)菌產(chǎn)生新的更嚴(yán)重的耐藥。為此，對(duì)本院連續(xù)3年臨床送檢標(biāo)本分離的大腸埃希菌分布及耐藥性變遷進(jìn)行了分析。

1 資料與方法

1.1一般資料 菌株來源：收集2011年1月～2013年12月本院臨床送檢各類標(biāo)本分離出的580株大腸埃希菌，分離培養(yǎng)按《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》第三版要求進(jìn)行[3]，排除同一患者同一部位重復(fù)分離菌株。

1.2方法

1.2.1菌株鑒定與藥敏試驗(yàn) 利用全自動(dòng)微生物鑒定系統(tǒng)VITEK2_compact鑒定到種，藥敏試驗(yàn)采用K-B紙片擴(kuò)散法，判定標(biāo)準(zhǔn)按照美國(guó)臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化研究所（ CLSI）2011年的規(guī)定判定[4]。細(xì)菌分離用培養(yǎng)基及藥敏試驗(yàn)用培養(yǎng)基購自安圖公司，K-B法藥敏紙片購自O(shè)XOID公司。

1.2.2 ESBLs檢測(cè) 按照CLSI推薦的紙片擴(kuò)散表型初篩和確證法進(jìn)行檢測(cè)，質(zhì)控菌株為大腸埃希菌ATCC25922。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 藥敏檢測(cè)數(shù)據(jù)應(yīng)用WHONET5.4軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，以P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1連續(xù)3年分離的大腸埃希菌在臨床各類標(biāo)本的分布，為尿液標(biāo)本中占47%，傷口分泌物標(biāo)本中占50%，痰標(biāo)本中占7%。

2.2本研究580株大腸埃希菌中，產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌的檢出率24.7%。各年檢出率見表1。

2.3產(chǎn)ESBLs和非產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌對(duì)19種抗菌藥物的耐藥率 連續(xù)3年產(chǎn)ESBLs和非產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌對(duì)19種抗菌藥物的耐藥率結(jié)果顯示，阿米卡星、亞胺培南、美洛培南 、阿莫西林/克拉、氨芐西林/舒巴、哌拉西林/他唑?qū)Ξa(chǎn)ESBLs的大腸埃希菌具有較強(qiáng)的抗菌活性，產(chǎn)ESBLs菌株具有多耐藥性且顯著高于非產(chǎn)ESBLs菌株，慶大霉素、妥布霉素對(duì)產(chǎn)ESBLs和非產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌抗菌活性略有提高。見表2。

3 討論

本研究結(jié)果顯示，大腸埃希菌主要分離自尿液標(biāo)本中占47%，傷口分泌物標(biāo)本中占50%，其次痰標(biāo)本中占7%。與上述報(bào)道有不同之處。通過對(duì)580株臨床分離的大腸埃希菌分析發(fā)現(xiàn)，所引起的醫(yī)源性感染主要分布在內(nèi)分代謝泌科、內(nèi)分泌腎病科、普內(nèi)科及外科系統(tǒng)，多為老年患者并伴有嚴(yán)重的基礎(chǔ)性疾病，自身免疫水平低下，侵入性操作、傷口可能是引起大腸埃希菌院內(nèi)感染的主要因素之一。

連續(xù)3年共檢出大腸埃希菌580株，其中ESBLs菌株143株，平均檢出率為24.7%，連續(xù)3年的檢出率分別為12.2%、16.7和44.3%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。根據(jù)數(shù)據(jù)顯示，每年檢測(cè)出的大腸埃希菌總數(shù)沒有大的變化，但ESBLs大腸埃希菌不斷增多，據(jù)觀察社區(qū)感染病例增加明顯。

藥敏試驗(yàn)結(jié)果顯示，大腸埃希菌產(chǎn)ESBLs菌株具有多耐藥性顯著高于非產(chǎn)ESBLs菌株，大腸埃希菌產(chǎn)ESBLs菌株對(duì)氨芐西林、第一、二、三代頭孢菌素均為100%耐藥，對(duì)第四代頭孢菌素的頭孢噻肟為100%耐藥，對(duì)頭孢吡肟顯示出一定的抗菌活性。對(duì)酶抑制劑聯(lián)合制劑表現(xiàn)出好的抗菌活性，適合臨床治療經(jīng)驗(yàn)用藥。連續(xù)3年監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)顯示，阿莫西林/克拉維酸鉀耐藥率無明顯變化，保持在低水平，而哌拉西林/他唑巴坦、氨芐西林/舒巴坦耐藥率保持在低水平，但有上升趨勢(shì)，這可能與本院使用該兩種藥物的量增加有關(guān)。同時(shí)，大腸埃希菌產(chǎn)ESBLs菌株對(duì)慶大霉素的耐藥率降低，連續(xù)3年分別為86.3%、69.0%、33.6%，耐藥率差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），適合臨床應(yīng)用。對(duì)阿米卡星耐藥率保持在低水平，適合臨床應(yīng)用。對(duì)同屬于氨基糖苷類的妥布霉素耐藥率連續(xù)3年分別為64.5%、58、6%、51、8%，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。對(duì)環(huán)丙沙星、和復(fù)方新諾明的耐藥率無明顯變化，保持在較高水平，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），不適合臨床應(yīng)用。未檢出耐亞胺培南、美諾培南的大腸埃希菌，碳青霉烯類抗菌藥物對(duì)產(chǎn)ESBLs細(xì)菌敏感性很高，且臨床療效顯著，可作為嚴(yán)重感染或其他抗菌藥物治療療效不佳時(shí)首選。

綜上所述，產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌的檢出率和對(duì)抗菌藥物耐藥率上升，可能是與臨床醫(yī)生長(zhǎng)期經(jīng)驗(yàn)用藥和大劑量濫用密不可分。產(chǎn)ESBLs菌的嚴(yán)重危害性在于它的多重耐藥和可傳播性。因此，要求微生物室及時(shí)準(zhǔn)確地檢測(cè)并提供可靠的藥敏試驗(yàn)結(jié)果，掌握區(qū)域性細(xì)菌耐藥特點(diǎn)，特別是臨床常見目標(biāo)菌的監(jiān)測(cè)，為臨床醫(yī)生制定正確合理的抗菌藥物使用方案提供依據(jù)，避免盲目使用高效廣譜抗菌藥物，有效控制多重耐。

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編輯/哈濤