摘要：目的 研究我院婦科門診拭子檢測人乳頭瘤病毒亞型感染的情況，探討 HPV DNA檢測在防治早期宮頸癌中的意義。方法 對587例婦科門診患者進行HPV基因分型檢測。結(jié)果 587例患者中，HPV感染者156例，感染率為26.58%?；颊咧懈呶Ｐ?HPV （ 52、16、33、18、58、39、51、59、35、56、68） 112例， 占感染總?cè)舜蔚?71.79%； 低危型 HPV （6、11） 35例， 占感染總?cè)舜蔚?2.44%； 中國人群常見型HPV （ 53、66 cp8304 ） 9例，占感染總?cè)舜蔚?.77 %。多重感染患者5例，占HPV感染者的 3.21%。結(jié)論 利用宮頸拭子進行HPV-DNA檢測HPV基因分型，有助于了解本地區(qū)HPV感染亞型的分布，有利于對 HPV感染的診斷和宮頸癌的防治，可作為宮頸癌篩查的手段。

關(guān)鍵詞：人乳頭瘤病毒；宮頸腫瘤；感染；防治

2002年全球?qū)m頸癌發(fā)患者數(shù)約有500000 人，死亡人數(shù)約280000人[1-2]，可見宮頸癌是威脅婦女生命健康的最常見的疾病之一，近幾年呈增高趨勢。在我國宮頸癌也是最常見的女性生殖道惡性腫瘤之一。大量流行病學、分子生物學研究表明95% 宮頸癌發(fā)生與人乳頭瘤病毒（human papillomavirus，HPV）感染有關(guān)，HPV 感染已被證明是引起宮頸癌及癌前病變的必要因素[3-4]。 目前已經(jīng)確定的HPV亞型大約有120余種，能夠感染婦女生殖道的有40種亞型，而與腫瘤相關(guān)的約20種，HPV感染可引起肛門癌、陰莖癌、宮頸癌等[5]。本文將對587例在我院婦科門診的女性進行宮頸拭子HPV篩查及分型檢測，了解本地區(qū)婦女HPV感染情況，為HPV感染的防治及宮頸癌的早期診斷提供依據(jù)?，F(xiàn)將我們的調(diào)查研究報道如下：

1 資料與方法

1.1一般資料 2012年3月～2013年9月587例在我院門診就診的年齡大于30歲以上進行宮頸拭子HPV-DNA及其亞型檢測的婦女，20～75歲，中位年齡39.2歲。

1.2 主要儀器 核酸擴增熒光分析儀（美國AB17000型）；醫(yī)用核酸分子快速雜交儀；試劑盒由潮州凱普生物化學有限公司提供。

1.3采集宮頸脫落細胞 將專用宮頸刷放置于宮頸口，輕輕搓動并使其順時針旋轉(zhuǎn)5圈，慢慢取出宮頸刷，將其放入專用取樣管內(nèi)管內(nèi)有細胞保存液，4℃保存待檢。

1.4 HPV-DNA提取及擴增 嚴格按照DNA提取試劑盒操作步驟提取，HPV-DNA擴增按照試劑盒說明書擴增程序進行PCR擴增反應。

1.5雜交顯色及結(jié)果判斷

PCR產(chǎn)物預熱至45℃后，取20μL 加入0.5ml已預熱至45℃的雜交液中，混勻后加在薄膜上，導流雜交在醫(yī)用核酸分子快速雜交儀中進行。雜交完成后，進行顯色，1h內(nèi)分析結(jié)果。陽性點為清晰可見的藍色園點，陽性點的HPV病毒的類型根據(jù)膜條HPV的分型判斷。

1.6統(tǒng)計學處理 采用SPASS 17.0 統(tǒng)計學軟件進行統(tǒng)計學分析處理，以α=0.05為檢驗水準。

2 結(jié)果

2.1一般情況 587例女性中，HPV感染陽性者為156例，總陽性率達26.58%，其中112例為HPV高危型感染（71.79%），35例HPV低危型感染（22.44%），9例為中國人群HPV常見型感染（5.77%），有5例（3.21%）為混合感染且均為高危型混合感染。

2.2 HPV 感染年齡分布 587例HPV篩查的女性中，在21～35，36～45，46～55，>56例年齡區(qū)間的陽性率分別為19.44%，26.29%，28.81%，32.65%；感染高峰在46～55，>56這兩個年齡段。但各年齡組間HPV感染無統(tǒng)計學差異（P>0.05），見表1。

2.3 HPV亞型分布 本次研究中HPV各亞型分布見表2。HPV52型（16.7%），HPV6型（16.7%），HPV16型（12.8%），HPV33型（10.9%）分別占據(jù)了HPV各亞型感染分布的前4位。

3 討論

HPV是一類具有相同結(jié)構(gòu)的異型病毒，主要侵犯皮膚及黏膜鱗狀上皮的小雙股環(huán)狀 DNA病毒。在分子生物學和流行病學不斷發(fā)展的時代，醫(yī)學界對人類乳頭瘤狀病毒 （ hum an papillo m au irus，H PV） 感染及下生殖道系列疾病的關(guān)系研究不斷深入，學者們發(fā)現(xiàn)人類乳頭瘤病毒感染和宮頸癌有著密切關(guān)聯(lián)性。國際癌癥研究中心 （ I ARC ） （ 1995） 年明確提出 H PV 感染是誘發(fā)宮頸癌的主要危險因素之一。潛伏感染期、亞臨床感染期、臨床癥狀期和相關(guān)的腫瘤期是HPV感染過程常見分期。 HPV陽性婦女是否進展到宮頸上皮內(nèi)高度病變和癌癥，與HPV的型別有很大聯(lián)系。大部分學者認為HPV高危型持續(xù)感染是子宮頸癌發(fā)生必要條件[6]。Cuz i ck等研究報道，在印度宮頸癌高發(fā)區(qū)，高危型 HPV感染率為 7%～13%%[7]。

本研究中選取婦科門診進行HPV篩查的女性作為研究對象，年齡均在20歲以上，并進行基因分型檢測。587位女性中，HPV感染陽性者為156例，總陽性率達26.58%，其中112例為HPV高危型感染（71.79%），35例HPV低危型感染（22.44%），9例為中國人群HPV常見型感染，有5例（3.21%）為混合感染且均為高危型混個感染，與常見報道相一致。 HPV52型（16.7%），HPV6型（16.7%），HPV16型（12.8%），HPV33型（10.9%）分別占據(jù)了HPV各亞型感染分布的前4位。從年齡組間構(gòu)成比看，感染高峰在46～55，>56這兩個年齡段。但各年齡組間HPV感染無統(tǒng)計學差異（P>0.05）。據(jù)文獻報道，全世界高危型感染主要以HPV-16，18亞型為主，其次為HPV45，31，33亞型[8]。但本次研究與此報道略有出入。本研究中，HPV高危型患者其亞型感染比例由高到低依次為 HPV：52、16、33、18、58、39、51、55、59、35、56、68，HPV52型成為第一亞型，而HPV16成為高危型的的第二亞型，HPV33型則為第三亞型，我們分析原因，這可能與地理分布差異及年齡段的選取有關(guān)。因此，筆者認為在本地區(qū)應著力開展HPV52、16、33亞型的普查研究，使其成為宮頸癌防治的早期預防措施。此外在我們的研究中，156例陽性感染者混合感染占3.21%，且均為高危亞型，但是未見四重以上感染。說明在本地區(qū)人群中婦女HPV多重感染所占比例較小。

本研究患者的年齡平均為39.5 歲，在21～35，36～45，46～55，>56各年齡區(qū)間的陽性率分別為19.44%，26.29%，28.81%，32.65%；感染高峰在46～55，>56這兩個年齡段。但各年齡組間HPV感染無統(tǒng)計學差異（P>0.05）。說明各年齡組間，感染HPV 病毒的概率沒有太大差別。研究認為，性活躍年輕婦女HPV感染率高，但目前認為這種感染是一過性的，這些HPV感染者大部分會自然消退， 僅 5.0%～10%發(fā)展為持續(xù)感染[9]。有前瞻性研究發(fā)現(xiàn)，宮頸HPV 感染者宮頸感染HPV1 6/18 型者在1 年時間內(nèi)有1/3 將會發(fā)展成為宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變（CIN），而其中約有15%將可能轉(zhuǎn)變?yōu)閷m頸癌[10]。

人乳頭狀瘤病毒感染與子宮頸病變發(fā)展有密切關(guān)系，對宮頸脫落細胞進行 HPV 檢測，了解其感染狀態(tài)和亞型，從而積極地治療宮頸高危型HPV 感染，對預防宮頸癌變具有重要的意義。

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編輯/王敏