【摘要】糖尿病腎?。╠iabetic nephropathy DN）是糖尿病的常見并發(fā)癥和主要死亡原因之一，是影響人類健康的重大問題。近年來其發(fā)病率不斷上升，在西方國家它己成為導(dǎo)致終末期腎臟病的最主要病因，在我國其發(fā)病率也逐年升高。為糖尿病的微血管并發(fā)癥之一，和血管等幾乎所有腎臟結(jié)構(gòu)。其引起的腎臟損害累及腎小球、腎小管、DN作腎間質(zhì)其臨床表現(xiàn)和疾病進(jìn)程亦有別于原發(fā)性腎小球腎炎，一旦出現(xiàn)腎功能損害，其進(jìn)展速度遠(yuǎn)快于非糖尿病腎病患者，且發(fā)展至終末期腎功能衰竭時，無論給予透析還是腎移植，患者遠(yuǎn)期預(yù)后仍差于其他腎臟疾病。因此早期診斷和干預(yù)具有重要臨床意義。

【關(guān)鍵詞】糖尿病腎?。荒蛞?；檢驗

前言

尿微量白蛋白是目前公認(rèn)的DN早期篩查指標(biāo)，但臨床上一旦檢測到微量白蛋白尿，而部分尿白蛋白正?；颊撸淠I小球濾過率已出現(xiàn)下降，腎臟病理也表現(xiàn)出糖尿病腎病的特征性改變。隨著飲食和生活方式的改變，我國2型糖尿病的發(fā)生率逐漸升高。糖尿病腎病在腎活檢患者中的檢出率也逐年上升，成為終末期腎功能衰竭的重要原因之一。DN患者臨床上一旦出現(xiàn)腎功能不全，其病情進(jìn)展迅速，預(yù)后差，因此早期診斷有著重要意義。

一、對象與方法

（一）病例選擇

選取某院腎臟病研究所臨床確診的男性2型糖尿病患者，依據(jù)尿蛋白水平分為3組：尿白蛋白正常組：尿白蛋白排泄率<17mg/24h；微量白蛋白尿組：100mg/24h < UAER < 300mg/24h：蛋白尿組：尿蛋白1-3 g/24h。每組患者2例，并滿足以下條件：年齡30-65歲，無肉眼血尿，尿沉渣紅細(xì)胞<100/ul；排除合并心臟、肝膽、甲狀腺病及腎功能不全，排除近3月體重改變>10%的患者，可伴或不伴高血一壓、血脂代謝異常。以年齡匹配的健康成年男性25例為對照，均無肥胖、高血壓、糖脂代謝紊亂等病史。入組者禁食12小時，記錄尿液體積，留取清晨空腹血清、中段尿標(biāo)木，-80℃保存待測。

（二）臨床資料收集

一般狀況：年齡、身高、體重、體重指數(shù)、糖尿病病程、收縮壓、舒張壓：

代謝水平：空腹及餐后血糖、糖化血紅蛋白（HbAlc）、總膽固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、尿酸；

腎臟損傷指標(biāo)：24小時尿微量白蛋白或尿蛋白水平、鏡下血尿、血清肌配；糖尿病并發(fā)癥：視網(wǎng)膜病變、神經(jīng)病變等微血管并發(fā)癥及冠心病、腦血管疾病、周圍血管病變等大血管并發(fā)癥；

藥物使用：磺脈類、雙皿類、胰島素及血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑/血管緊張素II受體拮抗劑使用情況。

（三）試劑和儀器

試劑：系列烷烴標(biāo)準(zhǔn)溶液（C8-C40）及毗嚨購于Fluka公司；甲基肉豆栽酸、鹽酸甲氧胺及甲基硬脂酸購于Sigma-Aldrich公司；MSTFA+1 % TMCS購于Pierce公司；正庚烷（Merck）；甲醇（Tedia）。

儀器：島津GC/MS聯(lián)用儀（GCMS-QP2010）；島津液相色譜儀（ProminenceUFLCXR）；AB SCIEX TripleTOFTM 5600質(zhì)譜儀；減壓濃縮裝置購于Thermo公司；高速冷凍離心機(jī)（SORVALL.Biofuge stratos）氣相色譜質(zhì)譜（GCIMS）標(biāo)本處理及衍生化測定時，血清經(jīng)37 °C解凍15 min，取50 u1血清加甲醇（含內(nèi)標(biāo)甲基肉豆范酸12.S ug/ml），渦旋提取5 min后4°C靜置1 h，20 OOOg離心10 min，取上清100 ml于GC小瓶，減壓揮干溶劑。加入甲氧胺毗咤溶液（l0mg/ml），渦旋4 min后肪化反應(yīng)向GC小瓶中17h。加MSTFA（含1 % TMCS作為催化劑），渦旋1 min后三甲硅烷基化反應(yīng)1h。最后加入外標(biāo)甲基硬脂酸庚烷液（30 ug/ml），渦旋4 min后即可作為待測樣品。尿標(biāo)本，1600g離心1 Omin，在SOuI尿中加入50 IU尿素酶（溶解于SOuI生理鹽水中），置37 °C水浴保溫2小時，充分反應(yīng)以去除過量尿素。20000g離心10分鐘分離沉淀后取上清液50 u1置于GC小瓶中，同上法處理和分析。

（四）液相色譜/質(zhì)譜

標(biāo)本處理尿液經(jīng)37°C解凍20 min。50 u1標(biāo)本中加入甲醇200u1沉淀蛋白，渦旋1 min后，12000g離心lSmin。取上清200u1，0.22um微孔過濾，加入自動取樣小瓶，待測。

樣品采集色譜條件：色譜柱為C18柱（2.1 * 100 mm，1.7um），進(jìn)樣量5ul，流速為500ul/min；流動相由1%的甲酸水溶液（A）和1%的甲酸乙睛溶液組成；流動相B開始比例為10%，維持3min：在3u1Omin濃度線性升高至55%；第10min升高至95%，并維持至第SSmin；第65min降至初始比例10%，平衡3min。

（五）數(shù)據(jù)處理

計量資料以均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差或中位數(shù)表示，計數(shù)資料以百分率表示。多組間計量資料的比較采用One-Way ANOVA或Kruskal-Wallis H檢驗，兩組間計量資料的比較采用Tukey HSD或Mann-Whitney U檢驗。計數(shù)資料比較采用擴(kuò)檢驗。數(shù)據(jù)分析采用SPSS 13.0軟件，結(jié)果以P < 0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義，P < 0.01為差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義。

二、結(jié)果

（一）患者臨床特征

通過結(jié)果得知3組患者的年齡及糖尿病病程等一般情況未見顯著差異，但蛋白尿組患者，其空腹、餐后血糖、HbAI。及甘油三酷水平均高于單純糖尿病組及微量白蛋白尿組，并有統(tǒng)計學(xué)意義。隨腎臟病變進(jìn)展，患者合并高血壓、視網(wǎng)膜病變和大血管并發(fā)癥的比例逐漸升高。治療方而，3組患者均使用了不同種類的口服降糖藥及胰島素治療，后兩組患者的ACEI/ARB使用率較高。

*P<0.05 vs尿白蛋白正常組，P<0.05 vs微量白蛋白尿組；UA：尿酸；ACEI/ARB：血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑/血管緊張素II受體拮抗劑尿液中檢測到的化合物

GC/MS：尿液中檢測到119個峰，其中59種化合物被鑒定。如所示，各組間的總離子流圖存在差異。

LC/MS檢測到到的化合物很多，但僅少數(shù)得到鑒定，其中尿液正離子模式65種，負(fù)離子模式50種。

（二）多元數(shù)據(jù)分析結(jié)果

下圖為不同組別患者尿液GC/MS檢測到的化合物經(jīng)均嚴(yán)格執(zhí)行消毒隔離制度及無菌操作規(guī)程。進(jìn)行可能接觸患者體液的操作時，必須戴手套。污染的手套及時脫去。由于全體護(hù)理人員防護(hù)意識較強(qiáng)，病房內(nèi)無職業(yè)暴露發(fā)生，無交叉感染發(fā)生。

3 小結(jié)

HIV感染合并腸梗阻的護(hù)理對于護(hù)理人員來說是一個嚴(yán)峻的挑戰(zhàn)。由于護(hù)士要進(jìn)行多種有創(chuàng)操作，接觸醫(yī)療廢棄物、污染物及病人體液的機(jī)會較多，所以職業(yè)危險性較高。這要求護(hù)理人員具備較高的職業(yè)素質(zhì)，豐富的專業(yè)理論知識和嫻熟的操作技能，嚴(yán)格遵守消毒隔離制度和無菌操作規(guī)程，在做好護(hù)理的同時，加強(qiáng)職業(yè)防護(hù)，防止醫(yī)源性感染的發(fā)生。

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