摘要：目的：以SN/T 1948-2007 標準為參考，建立了準確快速測定白酒中甜蜜素的超高速液相色譜-質(zhì)譜/.質(zhì)譜分析方法。方法：以甲醇和0.1%的乙酸為流動相，樣品經(jīng)揮發(fā)酒精后用水定容，采用C18柱分離，在ESI負離子模式下定量測定，并在ESI正離子模式下定性確認。結(jié)果：甜蜜素含量在 5.00～100 μg/L的范圍內(nèi)與峰面積有良好的線性關(guān)系，檢出限可達5 μg/L；在三個添加水平下，樣品平均加標回收率分別為106.0%，102.8%、102.0%，重復性RSD≦2.1%；完成一個樣品的檢測時間少于10 min。結(jié)論：該方法用于白酒中甜蜜素測定快速、準確。

關(guān)鍵詞：甜蜜素 白酒 超高速液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜 測定

中圖分類號：TS261.7 文獻標識碼：A 文章編號：1672-5336（2014）24-0000-00

1 引言

甜蜜素（sodium cyclamate，molasses），化學名為環(huán)己基氨基磺酸鈉，是食品生產(chǎn)中常用的合成甜味劑，被廣泛應(yīng)用于各類食品[1]。GB 2760-2011《食品添加劑使用標準》明確規(guī)定，在蒸餾酒和發(fā)酵酒中不得使用甜蜜素[2]。

本實驗采用超高速液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法測定白酒中的甜蜜素，在負離子模式下定量測定，在正離子模式下定性確證，定性、定量準確可靠，測定快速，檢出限低，可用于白酒中甜蜜素的準確測定。

2 材料與方法

2.1 藥品、試劑與儀器

甜蜜素標樣：Sodium Cyclamate，C6H12NNaO3S，批號（Lot）：LB90988V 47827； 甲醇：色譜純（進口），冰乙酸：分析純（成都市科龍化工試劑廠）。

儀器：超高效液相色譜：Waters Acquity UPLC；色譜柱：ACQUITY UPLC BEH C18 1.7μm 2.1 mm×50 mm；質(zhì)譜/質(zhì)譜儀：ABSCIEX API 4000+；水浴氮吹儀：天津奧特賽恩斯儀器有限公司。

2.2 實驗方法

2.2.1 標準儲備溶液和使用溶液的配制

甜蜜素標準儲備液：準確稱取適量甜蜜素標準品，用水配置成濃度為100 μg/mL的標準儲備液。該溶液在0 ℃～4 ℃冰箱中保存。標準中間液：準確量取一定體積的標準儲備液，用水稀釋成濃度為1 000 μg/L的中間液。標準工作液：準確移取一定體積的標準中間液，稀釋成濃度為5.00 μg/L，10.0 μg/L，20.0 μg/L，40.0 μg/L，60.0 μg/L，80.0 μg/L，100 μg/L的標準工作液。

2.2.2 樣品前處理

在10 mL刻度比色管中準確移取5 mL酒樣，水浴加熱氮吹揮發(fā)酒精至盡干，準確加入純水5 mL，超聲溶解20 min，混勻，用0.22 μm濾膜過濾，濾液供超高速液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜儀測定。

2.2.3 儀器條件

（1）超高速液相色譜條件。進樣量5 μL；柱溫：25 ℃；流動相組成、流速及梯度洗脫程序如表1。

表1 超高速分析梯度洗脫程序

時間min流速mL/min0.1%乙酸水溶液%甲醇%

0-0.50.3955

0.50.3955

2.50.31090

5.00.31090

5.10.3955

100.3955

（2）定量、定性測定質(zhì)譜條件。定量條測定條件：使用電噴霧離子源；掃描方式：ESI-；檢測方式：多反應(yīng)監(jiān)測 MRM；電噴霧電壓：-4 500 V；霧化器電壓：10 Psi；氣簾氣壓力：10 Psi；輔助器壓力）：10 Psi；離子源溫度：500 ℃；碰撞器：10 mL/min；定量離子對Q1/Q3：178.1/80.1；解簇電壓-60V；碰撞器能量-30V；碰撞池出口電壓-9V、碰撞池入口電壓-8V。定性確證條件：掃描方式：ESI+；電噴霧電壓：5000 V；霧化器電壓：40 Psi；氣簾氣壓力：20 Psi；輔助器壓力：45 Psi；離子源溫度：500 ℃；碰撞器：7 mL/min；定量離子對Q1/Q3：202.2/122.0；解簇電壓50 V；、碰撞器能量13 V；碰撞池入口電壓10 V；碰撞池出口電壓12 V。

3 結(jié)果與討論

3.1 標準曲線及標樣相對離子豐度

分別在負、正離子模式下，取濃度為5.00 μg/L，10.0 μg/L，20.0 μg/L，40.0 μg/L，60.0 μg/L，80.0 μg/L，100 μg/L的標準工作液超高效液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜分析后，以濃度x和峰面積y繪制標準曲線，。其線性方程為：y = 5.23e+003 x -1.5e+003（r = 0.999 9）；標樣平均相對離子豐度9.15%，

3.2方法回收率及重復性

分別添加濃度為10.0 μg/L，50.0 μg/L，100 μg/L的酒樣，按上述樣品步驟測定。每個濃度四次平行試驗，在三個添加水平下，樣品平均加標回收率分別為106.0%，102.8%、102.0%，重復性RSD分別為：2.1%、1.5%、1.7%。并通過相對離子豐度確證為甜蜜素。

3.3 方法檢出限（確證限）和定量限

正離子模式下，添加濃度為5.00 μg/L時，信噪比S/N約為3，因此將此濃度作為方法的檢出限（確證限），而此時在在負離子模式下信噪比S/N>10，能夠達到準確定量要求，可作為定量限。

4 結(jié)語

實驗表明，此方法定量、定性準確，回收率高、重復性好，檢出限低。

參考文獻

[1]肖晶，方從容，楊大進 等.高效液相色譜-質(zhì)譜法測定酒中甜蜜素含量的研究[J].中國食品衛(wèi)生雜志2013.25（3）254～256.

[2]中華人民共和國衛(wèi)生部.GB2760-2011食品安全國家標準 食品添加劑使用衛(wèi)生標準[S].北京：中華人民共和國衛(wèi)生部，2011.

收稿日期：2015-11-08

作者簡介：楊敏敏（1987—）女，漢族，四川宜賓人，本科，助理工程師，研究方向：食品檢測。