牛慶偉 蔣薇 孔秋生 黃遠(yuǎn) 別之龍

摘 要： 應(yīng)用HACCP的原理和方法，對西瓜嫁接育苗過程中的每個環(huán)節(jié)進(jìn)行危害分析，結(jié)合西瓜嫁接育苗場BFB的發(fā)生與防治經(jīng)驗，確定了西瓜嫁接苗BFB綜合防治中的7個關(guān)鍵控制點，提出了相應(yīng)的預(yù)防和控制措施，并制定出完善的HACCP計劃。經(jīng)實踐驗證，將HACCP應(yīng)用于西瓜嫁接苗生產(chǎn)，嫁接苗BFB的發(fā)病率大幅降低，嫁接育苗企業(yè)經(jīng)濟(jì)損失銳減，為西瓜嫁接苗健康種苗的生產(chǎn)提供了可靠保障。

關(guān)鍵詞： 西瓜嫁接苗； BFB； 綜合防控； HACCP

Application of HACCP System for Management of BFB in Production of Grafted Watermelon Seedling

NIU Qing-wei， JIANG Wei， KONG Qiu-sheng， HUANG Yuan， BIE Zhi-long

（Key Laboratory of Horticultural Plant Biology， College of Horticulture and Forestry， Huazhong Agricultural University， Wuhan， Hubei 430070， China）

Abstract： Hazard analyses were conducted for each step of grafted watermelon seedling production using the principle and method of Hazard Analysis and Critical Control Point（HACCP）. Based on Bacterial Fruit Blotch（BFB）occurrence and management measure adopted by the grafting nurseries，seven critical control points were determined for management of BFB in the production of grafted watermelon seedling. The measures of preventing BFB are proposed and the HACCP plans are developed. The practices of HACCP resulted in the decreasing of BFB incidence. HACCP plans help the reduction of economic losses of nurseries and warrant better quality of grafted watermelon seedling.

Key words： Grafted watermelon seedling； BFB； Comprehensive disease management； HACCP

危害分析和關(guān)鍵控制點（Hazard Analysis and Critical Control Point ，簡稱HACCP）作為一種有效的風(fēng)險管理工具，是經(jīng)過國際認(rèn)可、可以保證食品免受生物性、化學(xué)性及物理性危害的預(yù)防體系，HACCP是目前世界上最具權(quán)威的食品安全保護(hù)體系之一[1]。由于HACCP管理體系具有系統(tǒng)性強(qiáng)、結(jié)構(gòu)嚴(yán)謹(jǐn)和適應(yīng)性廣等特點，并且對風(fēng)險的管理和控制具有科學(xué)性和預(yù)防性，使得HACCP的應(yīng)用范圍越來越廣。HACCP的原理和方法已經(jīng)延伸到農(nóng)作物病蟲害防治體系。廈門出入境檢驗檢疫局工作人員運用HACCP的原理和方法，針對白菊鮮切花病蟲害和柑橘‘琯溪蜜柚黑斑病的管理及檢疫監(jiān)管，制定出相應(yīng)的HACCP計劃和各種控制措施，從而使病蟲害發(fā)生率大幅下降，同時產(chǎn)品檢疫合格率大幅提高，出口檢驗檢疫通關(guān)速度明顯加快，促進(jìn)了廈門外向出口白菊切花產(chǎn)業(yè)和出口‘琯溪蜜柚產(chǎn)業(yè)的發(fā)展[2-3]。胡清秀等[4]根據(jù)食用菌病蟲害的發(fā)生規(guī)律，利用HACCP的原理與方法，為食用菌病蟲害的綜合防治提出了相關(guān)建議，為食用菌的安全生產(chǎn)提供了技術(shù)支撐，對全面提高食用菌的產(chǎn)量和品質(zhì)具有重大意義。細(xì)菌性果斑?。˙FB）的病原菌為嗜酸菌屬西瓜亞種（Acidovorax avenae subsp. citrulli）[5]，最早于1969年由Crall和Schenck[6]在美國佛羅里達(dá)州發(fā)現(xiàn)，我國1985年發(fā)現(xiàn)并開始報道瓜類BFB的發(fā)生和為害[7-9]。該病是典型的由種子帶菌引起的傳染性病害，病瓜種子帶菌率較高[10]，病原菌從被感染的種子傳播到幼苗的幾率很高[11-12]。BFB病菌主要附著在種子和病株殘體上越冬，病菌隨風(fēng)、雨或灌溉水從植株氣孔或傷口侵入，病菌在病株上大量繁殖擴(kuò)展， 造成再次侵染[13]。我國的河南、內(nèi)蒙古、山東、陜西、甘肅、新疆、海南等省區(qū)均有發(fā)生[8]。近年來，越來越多的育苗場開始出現(xiàn)BFB的發(fā)生與流行，因西瓜種子帶菌造成的嫁接苗毀苗率高達(dá)30%～80%[14-15]。

在西瓜嫁接苗集約化生產(chǎn)過程中，育苗場所、育苗基質(zhì)和種子等均有可能是病蟲害的初侵染源；嫁接操作、人工管理和灌溉水均有可能成為病蟲害的傳播途徑；育苗溫室內(nèi)相對的高溫和高濕環(huán)境容易導(dǎo)致病蟲害的發(fā)生和流行。因此，在西瓜嫁接苗集約化生產(chǎn)和管理的過程中存在病蟲害擴(kuò)散的風(fēng)險。病蟲害一旦爆發(fā)，會給生產(chǎn)造成巨大損失[16]。由于西瓜嫁接育苗過程要歷經(jīng)從種子到嫁接苗出圃等多個環(huán)節(jié)，整個生產(chǎn)過程中BFB病菌可能潛伏在不同的場所而難以發(fā)現(xiàn)，而且BFB在嫁接育苗場出現(xiàn)后防治難度大，嚴(yán)重危害西瓜產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展，因此必須要引入相應(yīng)的質(zhì)量管理標(biāo)準(zhǔn)系統(tǒng)來保障嫁接苗的安全生產(chǎn)。本文通過分析西瓜嫁接育苗過程中各生產(chǎn)環(huán)節(jié)與BFB發(fā)生間的關(guān)系，并結(jié)合嫁接育苗場BFB的發(fā)生與防治，應(yīng)用HACCP的原理和方法，建立西瓜嫁接苗生產(chǎn)過程中BFB的綜合防控體系。

1 HACCP體系建立的原理與方法

HACCP的7個基本原理[17-19]：1）進(jìn)行危害分析并確定控制措施。2）確定關(guān)鍵控制點。3）確定關(guān)鍵控制點關(guān)鍵限值。4）對關(guān)鍵控制點進(jìn)行監(jiān)控。5）確定糾偏措施。6）確定有效的記錄保持程序。7）建立審核程序。

本研究中該體系的建立只考慮細(xì)菌性果斑病菌的潛在危害，不考慮其他病蟲害和物理、化學(xué)危害等影響的因素。依據(jù) HACCP 原理，針對西瓜嫁接育苗生產(chǎn)工藝流程[20]的潛在危害因素（HA）進(jìn)行危害分析，編制出危害分析工作表（表1），并確定嫁接苗BFB防控的關(guān)鍵控制點（CCP），在此基礎(chǔ)上制定HACCP計劃，在實施計劃時，監(jiān)控CCP，并在出現(xiàn)偏差時，采取相應(yīng)的糾偏措施，同時建立HACCP有效的記錄，保持程序持續(xù)有效運行。

2 西瓜嫁接育苗過程中BFB的危害分析及關(guān)鍵控制點的確定

顯著危害是從原理上講有可能發(fā)生，并會對產(chǎn)品帶來不能接受后果的危害。判斷顯著危害時要把握兩個原則：有可能發(fā)生；會造成不可接受的后果。

關(guān)鍵控制點（CCP）是指能夠?qū)ξ：σ蛩丶右钥刂频囊粋€點、步驟或者程序，通過對關(guān)鍵控制點進(jìn)行控制，能夠最大程度的預(yù)防危害或者降低、消除一個或幾個危害。通常將CCP分為兩類：一種是通過控制可以消除和預(yù)防的危害，一種是通過控制能最大程度減少或降低的危害[21]。

本研究以西瓜嫁接育苗生產(chǎn)工藝流程為基礎(chǔ)，根據(jù)嫁接育苗場的生產(chǎn)實際和試驗數(shù)據(jù)對技術(shù)流程進(jìn)行危害分析。在危害分析的基礎(chǔ)上，根據(jù)西瓜嫁接育苗過程中BFB的危害分析和識別結(jié)果，提出相應(yīng)的預(yù)防和防治措施，控制所有的潛在危害，并通過關(guān)鍵控制點判斷樹[22]來確認(rèn)關(guān)鍵控制點。

2.1 西瓜嫁接育苗過程中BFB危害分析與識別

根據(jù)本課題組和前人對西瓜嫁接育苗過程中BFB發(fā)生的情況，對西瓜嫁接育苗過程中BFB的發(fā)生進(jìn)行了危害分析[23-26]，結(jié)果見表2。在西瓜嫁接苗生產(chǎn)的工藝流程中，育苗設(shè)施配置、育苗設(shè)施消毒、種子處理、砧木和接穗育苗、嫁接無菌操作、嫁接愈合期管理、嫁接愈合后的管理7個環(huán)節(jié)都與嫁接苗BFB的發(fā)生密切相關(guān)。

2.2 西瓜嫁接育苗過程中BFB防治的關(guān)鍵控制點

根據(jù)對西瓜嫁接育苗工藝中BFB發(fā)生的危害分析，結(jié)合本課題組和前人在西瓜嫁接苗BFB防控上的研究結(jié)果，確定了西瓜嫁接育苗過程中BFB防治的關(guān)鍵控制點，并提出了相關(guān)的育苗和控制措施[27-29]，結(jié)果見表3。

3 西瓜嫁接育苗過程中BFB防治的監(jiān)管監(jiān)控計劃

圍繞西瓜嫁接育苗過程中的7個關(guān)鍵控制點，進(jìn)一步制定西瓜嫁接育苗過程中BFB防治的監(jiān)管監(jiān)控計劃工作表，結(jié)果見表4。

4 體系的實施與驗證

在西瓜嫁接苗BFB防控體系的運行和實施過程中，嫁接育苗公司必須采用先進(jìn)的經(jīng)營和管理理念，加強(qiáng)工作人員BFB防控知識的培訓(xùn)，并建立相應(yīng)的考核測評及獎勵體制，充分調(diào)動工作人員的主動性和積極性，使他們按照HACCP體系的要求，對各個關(guān)鍵控制點進(jìn)行科學(xué)記錄和控制。此外，嫁接育苗公司應(yīng)該加強(qiáng)同科研單位的合作，采用先進(jìn)的、科學(xué)的BFB防治技術(shù)充實HACCP體系，使HACCP體系更加完善。

經(jīng)驗證，采用HACCP計劃后嫁接育苗場中BFB的發(fā)病率大幅降低，經(jīng)濟(jì)損失控制在可接受范圍。以湖北省武漢洪北種苗有限公司為例來說明HACCP計劃的應(yīng)用效果，2010年底至2011年初，BFB在武漢洪北種苗有限公司的西瓜嫁接苗生產(chǎn)溫室中開始發(fā)生并流行，由于缺乏防治經(jīng)驗，造成該公司當(dāng)年30%～40%的經(jīng)濟(jì)損失。2011年底至2012年初該公司僅采用加收米和農(nóng)用硫酸鏈霉素對種子進(jìn)行消毒處理，對BFB具有一定的防治效果。2012年底至2013年初采用HACCP計劃后，西瓜嫁接苗BFB的發(fā)生得到了很好的控制，經(jīng)濟(jì)損失降低至5%以內(nèi)。

參考文獻(xiàn)

[1] 宮 霞. HACCP管理體系在我國食品企業(yè)應(yīng)用進(jìn)展[J].乳業(yè)科學(xué)與技術(shù)，2007（3）： 137-140.

[2] 王宏毅，陳麗玲，李自強(qiáng)，等. HACCP原理和方法在出口白菊鮮切花病蟲害管理及檢疫監(jiān)管中的應(yīng)用[J]. 檢驗檢疫科學(xué)，2006， 16（s1）： 41-45.

[3] 高泉準(zhǔn)，黃智輝，王宏毅，等. 基于HACCP的漳州平和出口“琯溪”柑橘蜜柚黑斑病檢疫監(jiān)管體系建立[J]. 植物檢疫，2012（1）：67-71.

[4] 胡清秀，宋金娣，管道平. 食用菌病蟲害危害分析與防治關(guān)鍵控制點[J]. 中國農(nóng)學(xué)通報，2008，24（12）： 401-406.

[5] Schaad N W，Postnikova E，Sechler A，et al. Reclassification of subspecies of Acidovorax avenae as A.Avenae （Manns 1905） emend.，A.cattleyae （Pavarino，1911） comb. Nov.，A.citrulli （ Schaad et al.，1978） comb. Nov.，and proposal of A. oryzae sp.Nov[J]. Systematic and Applied Microbiology，2008，31（6/8）： 434-446.

[6] Crall J M， Schenck N C. Bacterial fruit rot of watermelon in Florida[J]. Plant Disease Report，1969，53： 74-75.

[7] 王曉東.防治哈密瓜細(xì)菌性果斑病拮抗酵母菌的篩選及其生防機(jī)理研究[D]. 武漢：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)，2009.

[8] 許 勇，張興平，宮國義，等. 細(xì)菌性果腐病與瓜類作物健康種子生產(chǎn)及檢測技術(shù)[J]. 中國西瓜甜瓜，2003（6）： 36-37.

[9] 王葉筠. 西瓜甜瓜危險性病害——細(xì)菌性果腐病[J]. 中國西瓜甜瓜，2003（5）： 32-34.

[10] 任毓忠，李 暉，李國英，等. 哈密瓜種子帶細(xì)菌性果斑病菌檢測技術(shù)的研究[J]. 植物檢疫，2004，18（2）： 65-68.

[11] Hopkins D L，Thompson C M. Seed transmission of Acidovorax avenae subsp. citrulli in cucurbits[J]. HortScience，2002，37（6）： 924-926.

[12] Kucharek T，Perez Y，Hodge C. Transmission of watermelon fruit blotch bacterium from infested seed to seedlings.（Abstr.）[J]. Phytopathology，1993，83： 466.

[13] 趙仁君，周志成，馮孝立，等. 瓜類細(xì)菌性果腐病的防治與健康種子生產(chǎn)[J]. 中國瓜菜，2008，21（1）： 38-39.

[14] 韋志揚(yáng)，陸宇明，麻小燕，等. 幾種殺菌劑防治西瓜嫁接苗細(xì)菌性果斑病的藥效試驗[J]. 廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)，2005，36（4）： 362-363.

[15] 林德佩. 瓜類作物細(xì)菌性果實腐斑?。˙FB）防治研究概述[J]. 中國瓜菜，2005（4）： 35- 37.

[16] 別之龍. 我國西瓜甜瓜嫁接育苗產(chǎn)業(yè)發(fā)展現(xiàn)狀和對策[J]. 中國瓜菜，2011，24（2）： 68-71.

[17] 曾慶孝，許喜林. 食品生產(chǎn)的危害分析與關(guān)鍵控制（HACCP）原理與應(yīng)用[M]. 廣州：華南理工大學(xué)出版社，2001： 5-7.

[18] 徐建英. HACCP的原理程序以及應(yīng)用和發(fā)展[J]. 食品與發(fā)酵工業(yè)，1996，（5）： 77-79.

[19] 肖 肖. 危害分析及關(guān)鍵點控制系統(tǒng)（HACCP系統(tǒng)） [J]. 中國動物檢疫，2000，17（7）： 7-8.

[20] 別之龍. 西瓜甜瓜嫁接育苗安全生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程[J].中國瓜菜，2012，25（1）： 49-52.

[21] 裴建松. 日產(chǎn)800t利樂磚常溫奶HACCP體系構(gòu)建與實踐[D]. 陜西楊凌： 西北農(nóng)林科技大學(xué)，2012.

[22] 翟永華. HACCP在患者手術(shù)安全管理中的應(yīng)用研究[D]. 濟(jì)南：山東大學(xué)，2011.

[23] 韋志揚(yáng). 西瓜嫁接苗細(xì)菌性果斑病的發(fā)生與防治[J]. 廣西熱帶農(nóng)業(yè)，2007：12-13.

[24] 牛慶偉，孔秋生，黃 遠(yuǎn)，等. 帶菌嫁接工具對西瓜嫁接苗BFB發(fā)生的影響及防治方法[J]. 中國瓜菜，2012，25（6）： 1-4.

[25] 牛慶偉，孔秋生，黃 遠(yuǎn)，等. 帶菌育苗基質(zhì)對西瓜細(xì)菌性果斑病發(fā)生的影響和藥劑篩選研究[J]. 中國瓜菜，2012，25（6）： 5-8.

[26] 牛慶偉，孔秋生，黃 遠(yuǎn)，等. 不同藥劑處理對西瓜細(xì)菌性果斑病帶菌種子的影響[J]. 長江蔬菜，2012（22）： 79-82.

[27] 何 毅，韋志揚(yáng)，李文信，等. 藥物浸種處理防治西瓜嫁接苗細(xì)菌性果斑病試驗[J]. 南方農(nóng)業(yè)學(xué)報，2011（5）： 500-504.

[28] 何 毅，李文信，洪日新，等. 西瓜嫁接育苗細(xì)菌性果腐病綜合防治措施[J]. 長江蔬菜，2010（8）： 99-100.

[29] 黃金艷，何 毅，李文信，等. 春雷霉素和農(nóng)用硫酸鏈霉素對西瓜嫁接苗細(xì)菌性果斑病的防效[J]. 中國瓜菜， 2010，23（6）： 29-32.