多凱等

摘要：目的：利用近紅外漫反射光譜技術(shù)快速測(cè)定鹽酸維拉帕米片的含量。方法：采集鹽酸維拉帕米片NIR光譜，采用偏最小二乘法（（PLS）進(jìn)行回歸，通過建立NIR光譜與理論測(cè)定值之間的多元校正模型，測(cè)定定鹽酸維拉帕米片的含量。結(jié)果：定量分析模型濃度范圍為32.8-48.0%（mg/mg）；內(nèi)部交叉驗(yàn)證均方差（RMSECV）為0.668，決定系數(shù)（R2）為0.9860；外部驗(yàn)證均方差（RMSEP）為0.553，決定系數(shù)（R2）為0.9902。結(jié)論：該方法準(zhǔn)確可靠、快速簡(jiǎn)便，可以滿足快速檢測(cè)的需要。

關(guān)鍵詞：近紅外光譜 鹽酸維拉帕米片 定量分析

中圖分類號(hào)：R927 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1672-5336（2014）06-0036-02

Abstract：Objective：To rapidly determine verapamil hydrochloride in verapamil hydrochloride tablets.Methods： NIR spectra of verapamil hydrochloride tablets were collected.On the basis of partial least squares（PLS） regression，the multivariant corrected model between the NIR spectra and theoretial values was established to evaluate the content of verapamil hydrochloride tablets.Results ：The concentration range of the quantitative analysis model was between 32.8-48.0%（mg/mg）.The mean square error of cross validation （RMSECV） was 0.668.the coefficient of determination （R2）was 0.9860.The mean square error of cross prediction （RMSEP） was 0.553.The average absolute deviation was 0.9902.Conclusion ：The method determining verapamil hydrochloride by NIR is accurate，rapid and simple.

Key Words：NIR （Near Infrared Spectrum Verapamil Hydrochloride Teblets quantitative analysis

維拉帕米（Verapamil）又名異搏定，是德國(guó)Knoll公司1963年研制成功的一種鈣通道阻滯劑，在1962年被當(dāng)作冠脈擴(kuò)張劑?，F(xiàn)今仍是治療高血壓的基礎(chǔ)藥品被國(guó)家基本藥物目錄收錄。還有抑制心肌及房室傳導(dǎo)、減慢心率、降低心肌耗氧量和逆轉(zhuǎn)腫瘤對(duì)某些藥物的抗藥性等藥理作用[1]。國(guó)內(nèi)生產(chǎn)企業(yè)鹽酸維拉帕米片的含量測(cè)定方法常為高效液相色譜法，該方法前處理繁瑣，時(shí)間長(zhǎng)，不適用于現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)，而近紅外光譜分析技術(shù)具有無(wú)破壞、分析快、用量少等特點(diǎn)，在藥物現(xiàn)場(chǎng)檢查領(lǐng)域的得到廣泛的應(yīng)用[2-3]。本文利用近紅外漫反射技術(shù)結(jié)合化學(xué)計(jì)量法建立鹽酸維拉帕米片的定量分析模型，大大提高了分析效率，節(jié)約了分析成本，為鹽酸維拉帕米片的質(zhì)量控制提供了簡(jiǎn)便、快速、可靠的分析方法。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器和試劑

安捷倫公司Agilent1100液相色譜儀（配有4元梯度泵、紫外、自動(dòng)進(jìn)樣）；Dikama Diamonsil C18色譜柱（4.6mm×250mm，5μm）；紫外檢測(cè)器。Matrix—F型傅立葉變換近紅外分光光度計(jì)（布魯克公司）。分析軟件為OPUS 5.0。所用試劑均為分析純。

1.2 樣品制備

取三個(gè)廠家生產(chǎn)的鹽酸維拉帕米片（天津中央藥業(yè)有限公司；上海信誼制藥有效公司；廣東華南制藥有限公司；該三個(gè)廠家生產(chǎn)的片劑為薄膜衣片）100批次（每批的含量使用HPLC方法測(cè)得），將上述100批樣品隨機(jī)分成兩組，一組為校正集75批，另一組為驗(yàn)證集25批。樣品的質(zhì)量百分比濃度在32.8%～48.0%之間。

1.3 鹽酸維拉帕米片的NIR法測(cè)定

用光纖探頭直接抵住樣品，掃描范圍在4000～12000cm-1，測(cè)其近紅外光譜。采用儀器內(nèi)置背景做為參比，掃描次數(shù)32，次默認(rèn)分辨率為8cm-1。每批樣品選取6片進(jìn)行掃描，并通過軟件計(jì)算平均光譜后用來建模。

2 結(jié)果與討論

2.1 光譜預(yù)處理的方法選擇[4]

使用OPUS 5.0自帶的自動(dòng)優(yōu)化功能，對(duì)校正集的75批樣品進(jìn)行外部驗(yàn)證法，以校正樣品集的交互驗(yàn)證均方根誤差（RMSECV）選擇最佳主成分?jǐn)?shù)，考察主成分?jǐn)?shù)對(duì)RMSECV值的影響，當(dāng)RMSECV值最小時(shí)，所選主成分?jǐn)?shù)為最佳。每個(gè)模型有最小的RMSECV值，當(dāng)主成分?jǐn)?shù)繼續(xù)增加時(shí)，該值呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，之后減小，由此選出的最佳維數(shù)為4。

2.2 定量分析模型的建立

樣品通過使用HPLC法測(cè)定含量，再采用偏最小二乘回歸法建立質(zhì)量百分比濃度與吸收強(qiáng)度之間的線性關(guān)系，使用儀器軟件進(jìn)行內(nèi)部交叉驗(yàn)證均方差（RMSECV）和驗(yàn)證集樣品的預(yù)測(cè)均方差（RMSEP）及其相關(guān)系數(shù)（R2）值之間的比較，優(yōu)化掃描區(qū)間，比較處理后，選擇最佳的掃描區(qū)間和光譜預(yù)處理方法為“一階導(dǎo)數(shù)+矢量歸一化”，相關(guān)數(shù)據(jù)見表1。

2.3 近紅外定量分析模型的驗(yàn)證

為評(píng)價(jià)建立的定量模型的適用性，對(duì)收集的數(shù)據(jù)分別進(jìn)行內(nèi)部交叉驗(yàn)證和外部交叉驗(yàn)證，并對(duì)驗(yàn)證集樣品用優(yōu)化后的模型進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果見表2。25批驗(yàn)證集樣品的平均預(yù)測(cè)偏差值為0.19，最大值為1.23（折算為真實(shí)值的百分率為2.26%），驗(yàn)證結(jié)果表明本模型的具有良好的準(zhǔn)確度。

3 結(jié)語(yǔ)

由于不同廠家之間輔料純?cè)谳^大的差異，最初設(shè)定的全波長(zhǎng)范圍掃描所制定的模型無(wú)法得到較好的線性關(guān)系，故此，確定掃描范圍在12000～8000 cm-1鹽酸維拉帕米吸收較強(qiáng)的區(qū)間，通過使用儀器在進(jìn)行驗(yàn)證優(yōu)化確定最終的樣品掃描區(qū)間范圍。

本模型的建立，顯著提高了鹽酸維拉帕片含量的檢測(cè)速度，也為藥品的近紅外快速檢驗(yàn)工作提供了一個(gè)方便快捷的分析模型，該模型的內(nèi)部驗(yàn)證和外部驗(yàn)證都得到了較好的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可滿足對(duì)鹽酸維拉帕米片進(jìn)行快速定量分析的目的。

參考文獻(xiàn)

[1]Pepine CJ，et al. Verapamil use in patients with cardiovascular disease： an overview of randomized trials. Clin Cardiol 1988，21（9）：663.

[2]鄧芳.HPLC法測(cè)定鹽酸維拉帕米片的溶出度[J].臨床合理用藥雜志，2013，20.

[3]張振杰，王曉宇.高效液相色譜法測(cè)定注射用鹽酸維拉帕米的含量[J].中國(guó)藥業(yè)，2007，16（9）：18-19.

[4]黃海，武洋.近紅外光譜法快速測(cè)定卡托普利片的含量[J].中國(guó)藥事，2011，25（7）：695-697.