王 昭

(武漢市中醫(yī)醫(yī)院，湖北 武漢 430040)

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芍藥苷微囊的測定及制備研究

王 昭

(武漢市中醫(yī)醫(yī)院，湖北 武漢 430040)

目的：研究芍藥苷微囊的測定及制備工藝。方法：通過采用HPLC 色譜峰面積歸一化法進行計算而得的自制芍藥苷，并進行微囊制備。結果：在24.5～490.0μg/mL范圍內芍藥苷溶液具有較好的線性關系；45～55℃的成囊溫度、3%～5%的膠液濃度所具有的影響不明顯； pH對成囊的影響不大，過高和過低的影響都不明顯，其值在3.5～4.5時最優(yōu)。結論：微囊對于藥效的吸收和釋放有著重要作用，在pH為 6.8的溶液中，微囊釋藥的速度比較緩慢，在人體環(huán)境下微囊的藥效是緩釋的。

芍藥苷微囊；測定；藥物制備

芍藥苷是中藥芍藥中一種非常普通的藥效成分，是一種典型的單萜類糖苷化合物。有關芍藥苷的藥理作用，國內外的醫(yī)學者對其進行了大量的研究。在自由基損傷抵抗、細胞鈣超載抑制等方面，芍藥苷的作用非常顯著。體內試驗結果顯示，芍藥苷還可以有效改善血液循環(huán)、降低血液黏度等，其具有非常小的毒副作用。在近幾年的醫(yī)學發(fā)展中，微囊化是一種新型制劑，能夠大大提高難溶藥物的利用度，通過微囊化后，藥物能夠進行高度分散，增大表面積，提高藥物的吸收效率，從而提高生物利用度。

1 儀器與材料

BP2110電子天平：德國賽多利斯公司；S-3000N 掃描電子顯微鏡：日本日立公司；SPD-20A 液相色譜儀：日本島津；DF-101S 恒溫加熱磁力攪拌器：鞏義市英嶼予華儀器廠；D-800LS 藥物智能溶出儀：天津大學無線電廠。

主要材料：通過采用HPLC 色譜峰面積歸一化法進行計算而得的自制芍藥苷；中國食品藥品檢定研究院所生產的芍藥苷對照品，明膠、阿拉伯膠、乙腈、戊二醛、重蒸水和其他分析類純劑。

2 方法與結果

2.1 HPLC 法測定芍藥苷

2.1.1 色譜條件 Agilent C18色譜柱(250mm×4.6 mm，5μm)；流動相：乙腈-水(16∶84)；體積容量：1.0 mL/min；柱溫：30℃。按照芍藥苷峰計算理論塔板數(shù)，其值為大于2 000。

2.1.2 對照品溶液配制 精密稱取芍藥苷對照品9.8mg，置于10mL量杯中，加入甲醇溶液進行稀釋，搖勻，即得。

2.1.3 供試品溶液配制 將一定量的芍藥苷微囊進行研磨，然后在其中加入25mL甲醇，超聲20min后，將其放置冷卻，再次進行質量稱取。通過甲醇補齊缺失的質量。對液體進行過濾，棄初濾液，將續(xù)濾液再次用0.45μm 微孔濾膜進行過濾，由此得空白溶液。

2.1.4 專屬性考察 對于空白溶液、供試品溶液和對照品溶液進行色譜條件的實驗，研究結果顯示所得出的方法較好，并且每個溶液和成分之間不存在干擾。具體見圖1。

圖1 空白樣品(A)、芍藥苷對照品(B)和樣品溶液(C)的HPLC色譜

2.1.5 線性關系考察 精密量取對照品，將其配置成24.5、49.0、147.0、245.0、343.0、490.0μg/mL的溶液，按照色譜條件對峰面積進行測定。實驗結果顯示，芍藥苷溶液在24.5～490.0μg/mL范圍內具有較好的線性關系。

2.2 載藥量和包封率測定

精密稱取經過真空干燥過的芍藥苷，按“2.1.3”方法配置溶液，測定峰面積，測算出具體的質量和濃度，然后根據(jù)相關公式對微囊所含的芍藥苷進行測量，計算出具體的載藥量和包封率。相關計算公式如下：

載藥量=微囊中芍藥苷的質量 / 微囊的質量

包封率=微囊中芍藥苷的質量 / 投入芍藥苷的總量

2.3 設計微囊制備工藝

2.3.1 制備微囊 稱取2g明膠和阿拉伯膠，加入50mL水進行相溶，配置成濃度為4%的溶液。精密稱取芍藥苷0.4g，稱取的藥粉是經過100目篩的，然后在其中加入阿拉伯膠進行研磨，制成混懸液。在其中加入相同量的阿拉伯膠和明膠，將其制成50mL，混勻，50℃的水溫中攪拌，轉速為300r/min。在溶液中加入5%醋酸溶液，將pH值調節(jié)至4左右，再次攪拌約15min。加入 2倍量蒸餾水(50℃溫水)，待體系自然冷卻至30℃以下后，冰浴迅速冷卻至10℃以下，用 4%戊二醛溶液約25mL固化15min，靜置使其充分沉降，傾去上清液，微囊濾過，然后用水進行清洗，直到無甲醛味為止，進行真空干燥，隨即得到芍藥苷微囊。在進行試驗的整個過程中，避光操作。

2.3.2 預試驗及其結果 對于芍藥苷微囊制備工藝的相關優(yōu)化，在參考相關文獻的基礎之上，本文對其進行了因素分析。共選取5個因素，分別是囊材和囊心的比例、pH 值、膠液濃度、成囊溫度、攪拌速率，通過對這些因素進行考察，結果顯示，成囊溫度為45～55℃、膠液濃度為3%～5%所具有的影響是不明顯的，因此將膠液的濃度設定為4%，成囊溫度設定為50℃。當囊材和囊心的比例小于1時，芍藥苷無法實現(xiàn)全部包裹，包封率在20%以下；當囊材和囊心的比例大于5時，芍藥苷能夠實現(xiàn)較好的高峰，但是承載藥量卻在10%以下，因此確定囊材和囊心的比例為1～5之間，這樣所得的載藥量和包封率都相對較好。攪拌速率太高，囊泡容易破，包封率明顯不高；攪拌速率太低則囊泡容易出現(xiàn)粘連，出現(xiàn)較為嚴重的結塊現(xiàn)象，因此確定攪拌速率為100～400 r/min。pH 值對成囊的影響不大，過高和過低的影響都不明顯，其值在3.5～4.5之間最優(yōu)。

2.4 實驗檢驗

通過對5個影響因素進行相應的調節(jié)，得出囊材和囊心的比例為4.3，pH 值為 4.0，攪拌速率為305 r/min。遵循優(yōu)化后的工藝條件對芍藥苷微囊進行測定，所得到的結果如表1所示，此時載藥量和包封率都較高，質量也較穩(wěn)定。

表1 最佳工藝驗證

3 討論

中藥芍藥的主要成分為芍藥苷，芍藥所具有的生物化學反應已經過多項研究得到證實。然而對于發(fā)生的生物學效應，具體是芍藥苷還是其產生的代謝物在發(fā)生作用，還不太明確。通過對芍藥苷的代謝進行研究，發(fā)現(xiàn)口服芍藥苷不能很好地被利用，即使是靜脈注射液其利用率也不高，代謝很快。

在神經保護方面，芍藥苷已經廣泛應用于細胞方面，能夠抑制細胞凋亡，阻斷鈉通道，從而實現(xiàn)減輕鈣損傷，抑制鈉內流，保護細胞的作用。在進行檢測時，由于所采取的手段具有一定的局限性，因此在神經細胞保護方面的具體作用還不是很明確。在今后的研究中，應注重對芍藥苷和其代謝物藥理作用的研究，明確藥物的具體藥理作用，從而有效指導藥物的配藥規(guī)律。

對于微囊的制備，主要選取具有相反電荷的兩種材料進行交聯(lián)、凝聚，因此對于微囊的性質，溫度、pH值所具有的影響是不可忽視的。在本實驗中，明膠和阿拉伯膠作為囊材凝聚成囊，兩者的質量分數(shù)宜在3%～5%，且比例為 1∶1，研究中首先考察了囊材的質量濃度，質量濃度過高，微囊不規(guī)則、易粘連；質量濃度過低則包封率低，影響產能。在對微囊進行制備時，經過攪拌之后，用2倍的水對溶液進行稀釋和攪拌，可以有效防止粘連。研究結果顯示，在pH為 6.8的溶液中，微囊釋藥的速度比較緩慢，由此可以得出在人體環(huán)境下微囊的藥效是緩釋的。

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(責任編輯：魏 曉)

2014-05-13

王昭(1987-)，湖北省武漢市中醫(yī)醫(yī)院中藥師，研究方向為中藥學。

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1673-2197(2014)17-0041-02