董琦鑫朱家俊郁韻秋△唐 超隋 強(qiáng)

(1復(fù)旦大學(xué)藥學(xué)院藥物分析教研室 上海 201203；2上海市醫(yī)藥工業(yè)研究院化學(xué)部 上海 200083)

Hp LC法測(cè)定原料藥中埃索美拉唑的含量

董琦鑫1朱家俊1郁韻秋1△唐 超2隋 強(qiáng)2

(1復(fù)旦大學(xué)藥學(xué)院藥物分析教研室 上海 201203；2上海市醫(yī)藥工業(yè)研究院化學(xué)部 上海 200083)

目的建立用于測(cè)定原料藥中埃索美拉唑含量的HPLC法。方法采用HPLC法測(cè)定,色譜柱：Waters XTerra?MS C8反相柱(150 mm×4.6 mm,3.5μm),流動(dòng)相：V(乙腈)：V(20 mmol/L醋酸銨緩沖液, p H 7.6)=28：72,檢測(cè)波長(zhǎng)280 nm,柱溫25℃,流速1 mL/min。結(jié)果埃索美拉唑濃度在0.01～0.07 mg/mL范圍內(nèi)與峰面積之間呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系(r=0.9996),方法回收率為98.49%～101.72%,RSD為0.15%～0.58%。結(jié)論本方法簡(jiǎn)便快速,能準(zhǔn)確檢測(cè)原料藥中埃索美拉唑的含量,可作為原料藥質(zhì)量控制的分析方法?！娟P(guān)鍵詞】 埃索美拉唑； 原料藥； 高效液相色譜(HPLC)； 含量測(cè)定

埃索美拉唑是奧美拉唑的純左旋異構(gòu)體［1］,化學(xué)名為5-甲氧基-2-{(S)-［(4-甲氧基-3,5-二甲基-2-吡啶基)甲基］亞硫?；鶀-1 H-苯并咪唑。它是第一種被發(fā)現(xiàn)的光學(xué)異構(gòu)體質(zhì)子泵抑制劑,與其他質(zhì)子泵抑制劑一樣,埃索美拉唑通過(guò)抑制胃壁細(xì)胞的H+/K+-ATP酶來(lái)降低胃酸分泌,防止胃酸形成［2］。由于代謝方面的優(yōu)勢(shì),埃索美拉唑有良好的臨床療效和可預(yù)測(cè)性,其在AUC值、生物利用度及藥代動(dòng)力學(xué)個(gè)體一致性方面均有一定優(yōu)勢(shì),使藥物到質(zhì)子泵的傳遞增強(qiáng)并能提供更好的酸控制效果［3］。對(duì)于胃食道反流性疾病的患者而言,埃索美拉唑在糜爛性食管炎的維持治療方面有很好的效果和耐受性［4］；同時(shí),它能減少夜間胃灼熱和睡眠障礙,改善患者睡眠質(zhì)量和工作效率［5］。

目前,基于色譜法的埃索美拉唑分析報(bào)道主要是制劑中的藥物測(cè)定。?nal等［6］采用高效液相色譜(HPLC)技術(shù)對(duì)埃索美拉唑片劑進(jìn)行了檢測(cè)；Reddy等［7］以反相HPLC法同時(shí)檢測(cè)藥物制劑中的埃索美拉唑和萘普生。對(duì)于原料藥的測(cè)定方法鮮有報(bào)道。為此,我們建立了測(cè)定原料藥中埃索美拉唑含量的HPLC法,并用于不同批次原料藥的測(cè)定。結(jié)果表明,該方法快速準(zhǔn)確,可用于原料藥中埃索美拉唑的含量測(cè)定,為其質(zhì)量控制提供了手段和依據(jù)。

材料和方法

儀器和試劑Hitachi L-2000型高效液相色譜儀。乙腈為色譜純,水為純水(Millipore),其他化學(xué)試劑均為分析純。埃索美拉唑?qū)φ掌?上海醫(yī)藥工業(yè)研究院),埃索美拉唑原料藥(上海醫(yī)藥工業(yè)研究院,批號(hào)20120906、20121008c、20121121c)。

色譜條件色譜柱：Waters XTerra?MS C8反相柱(150 mm×4.6 mm,3.5μm),流動(dòng)相：V(乙腈)：V (20 mmol/L醋酸銨緩沖液,p H 7.6)=28：72,流速1.0 mL/min,檢測(cè)波長(zhǎng)280 nm,柱溫25℃,進(jìn)樣體積20μL。

緩沖溶液配制20 mmol/L醋酸銨緩沖液,用氨水調(diào)至p H 11.0。

對(duì)照品儲(chǔ)備液精密稱取105℃干燥至恒重的埃索美拉唑?qū)φ掌?0 mg,置于10 m L容量瓶中,用甲醇溶解并定容至刻度,搖勻,即得埃索美拉唑?qū)φ掌穬?chǔ)備液(1 mg/m L)。

空白對(duì)照品溶液量取2.5 m L緩沖溶液(p H 11.0)置于50 m L容量瓶中,用純水定容至刻度,搖勻,即得空白對(duì)照品溶液。

供試品溶液精密稱取樣品2.5 mg置于50 m L容量瓶中,加入2.5 mL緩沖溶液(p H 11.0),用純水定容至刻度,搖勻,即得供試品溶液。

混標(biāo)溶液稱取各有關(guān)物質(zhì)約1 mg及樣品約10 mg置于200 m L容量瓶中,加入10 m L緩沖溶液(p H 11.0),用純水定容至刻度,搖勻,即得混標(biāo)溶液。

結(jié) 果

線性關(guān)系考察精密量取對(duì)照品儲(chǔ)備液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5 m L分別置于50 m L容量瓶中,加入2.5 m L緩沖溶液(p H 11.0),用純水稀釋至刻度,分別取20μL注入色譜儀,記錄色譜峰面積。以峰面積對(duì)進(jìn)樣濃度作線性回歸,得到線性方程：Y=28319X-42.043(r=0.9996)。結(jié)果顯示,埃索美拉唑質(zhì)量濃度在0.01～0.07 mg/m L范圍內(nèi)與峰面積之間呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。

精密度試驗(yàn)精密量取對(duì)照品儲(chǔ)備液1、2、3 m L分別置于50 m L容量瓶中,加入2.5 m L緩沖溶液(p H 11.0),用純水定容至刻度,制得低(0.02 mg/m L)、中(0.04 mg/m L)、高(0.06 mg/m L)濃度的溶液,分別重復(fù)進(jìn)樣5次,每次進(jìn)樣20μL,記錄峰面積,計(jì)算RSD分別為0.30%、0.078%、0.23%,結(jié)果表明精密度良好。

穩(wěn)定性試驗(yàn)精密稱取樣品配成溶液,室溫下分別在0、2、6、10、24 h時(shí)進(jìn)樣20μL,紀(jì)錄峰面積,計(jì)算RSD為0.22%。結(jié)果表明樣品溶液在24 h內(nèi)基本穩(wěn)定。

重復(fù)性試驗(yàn)取同一批次樣品,精密稱取5份,配制成供試品溶液并測(cè)定原料藥中埃索美拉唑的含量,重復(fù)進(jìn)樣5次,埃索美拉唑平均含量為99.18%, RSD為0.20%(n=5)。

準(zhǔn)確度試驗(yàn)精密量取對(duì)照品儲(chǔ)備液1.5、2.5、3.5m L分別置于50 m L容量瓶中,加入2.5 m L緩沖溶液(p H 11.0),用純水定容至刻度,制得低(0.03 mg/m L)、中(0.05 mg/m L)、高(0.07 mg/ m L)濃度樣品各3份,按上述色譜條件測(cè)定,得到方法回收率(表1)。

樣品含量精密稱取3批原料藥樣品,配制成供試品溶液,分別取20μL注入液相色譜儀,記錄埃索美拉唑峰面積,外標(biāo)法計(jì)算含量。3批樣品中埃索美拉唑含量分別是98.49%、98.54%和99.18%。

討 論

檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇取對(duì)照品及有關(guān)物質(zhì)適量,分別加甲醇使其溶解,并稀釋成適當(dāng)濃度,經(jīng)紫外光譜掃描測(cè)定,所有物質(zhì)在280 nm處均有最大吸收,因此本研究中選擇280 nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)。

流動(dòng)相的選擇和優(yōu)化埃索美拉唑在酸性條件下容易降解［8］,而在堿性條件下很穩(wěn)定,因此我們選擇將流動(dòng)相的水相調(diào)為堿性。然而流動(dòng)相過(guò)堿性會(huì)對(duì)色譜柱壽命產(chǎn)生較大影響,經(jīng)過(guò)數(shù)次試驗(yàn)后,最終將流動(dòng)相水相醋酸銨緩沖液的p H值確定為7.6。為了使埃索美拉唑和有關(guān)物質(zhì)達(dá)到基線分離,我們考察了不同流動(dòng)相比例下的色譜分離度。當(dāng)乙腈與醋酸銨緩沖液比例為28∶72時(shí),主峰與最近的雜質(zhì)峰的分離度為2.3(圖1),而保留時(shí)間僅為6.62 min,分離效果好,分析時(shí)間短,因此我們將流動(dòng)相比例確定為V(乙腈)∶V(20 mmol/L醋酸銨緩沖液,p H 7.6)=28∶72。在此色譜條件下得到埃索美拉唑?qū)φ掌?、空白?duì)照品、埃索美拉唑原料藥樣品溶液的色譜圖(圖2)。理論塔板數(shù)＞3000,與相鄰峰的分離度＞1.5。

配樣溶劑和峰形優(yōu)化由于埃索美拉唑?yàn)槿鯄A性化合物,所以在當(dāng)前色譜條件下,埃索美拉唑的色譜峰明顯拖尾,對(duì)稱因子差。提高流動(dòng)相堿性可以使堿性化合物的解離完全被抑制,從而使峰形得到改善,但是堿性條件下色譜柱的耐用性降低,使用壽命受到顯著影響。為了解決這一問(wèn)題,我們?cè)谂渲茦悠啡芤簳r(shí)加入少量p H為11的強(qiáng)堿性醋酸銨緩沖液,加強(qiáng)了局部堿性。結(jié)果證明進(jìn)樣后峰形得到了明顯改善,對(duì)稱性良好。

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Content determination of esomeprazole in bulk drug by Hp LC

DONG Qi-xin1,ZHU Jia-jun1,YU Yun-qiu1△,TANG Chao2,SUI Qiang2
(1Department of Pharmaceutical Analysis,School of Pharmacy,Fudan University,Shanghai 201203,China；
2Department of Chemistry,Shanghai Institute of Pharmaceutical Industry,Shanghai 200083,China)

Objective To establish an HPLC method for the determination of esomeprazole in bulk drug.MethodsHPLC was applied to determine the test drug with Waters XTerra?MS C8column (150 mm×4.6 mm,3.5μm).The mobile phase was V(acetonitrile)：V(20 mmol/L,ammonium acetate,p H 7.6)=28：72,the measurement wavelength was 280 nm,the column temperature was 25℃and flow rate was 1 m L/min.ResultsThe linear range was 0.01-0.07 mg/m L(r= 0.9996).The method recovery rate and RSD was 98.49%-101.72%and 0.15%-0.58%, respectively.ConclusionsThis method is simple,fast,and can be accurately used for the determination of esomeprazole in bulk drug.Therefore,it can be used as an effective quality control method for esomeprazole bulk drug.

esomeprazole； bulk drug； HPLC； content determination

R 917

A

10.3969/j.issn.1672-8467.2014.01.021

2013-01-31；編輯：王蔚)

△Corresponding author E-mail：yqyu@shmu.edu.cn