陶鴿如 劉賢勇 索 勛

(中國農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，北京 100193)

兔球蟲病是由艾美耳屬Eimeria球蟲引起的、嚴(yán)重危害養(yǎng)兔業(yè)的寄生蟲病。各品種兔均易感，斷奶后至16周齡的幼兔尤為敏感(Sherkovetal., 1986)?；疾∽型脴O易繼發(fā)感染兔瘟病毒、產(chǎn)氣莢膜梭菌、大腸桿菌、巴氏桿菌等，使幼兔發(fā)育受阻，甚至大批死亡；而耐過仔兔常出現(xiàn)生長停滯，并成為污染源，致使兔場持續(xù)感染，造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失(Jingetal., 2012)。

兔球蟲病的藥物防治始于1942年，有學(xué)者利用磺胺類藥物(sulfonamides)、氯苯胍(robenidine)等對自然感染球蟲的家兔進(jìn)行治療。雖然抗兔球蟲藥物的選擇可一定程度上參考雞球蟲病藥物(其病原均為艾美耳屬球蟲)，但經(jīng)多年的研究發(fā)現(xiàn)，一些藥物雖可以有效防治雞球蟲病，但對兔球蟲病的防治效果卻不容樂觀，如砒啶類(Peetersetal., 1980；Joyneretal., 1983)；或者對家兔的安全使用范圍較窄，容易造成家兔中毒甚至死亡，如馬杜拉霉素(maduramicin) (Martinoetal., 2009)。因此，針對兔球蟲病的藥效試驗(yàn)對臨床用藥更具有指導(dǎo)意義。

本文介紹了國內(nèi)外兔球蟲病藥物防治的研究方法與成果，綜合論述了不同藥物臨床使用的優(yōu)缺點(diǎn)，旨在對實(shí)踐中合理選擇藥物、制定給藥程序提供建議。

1 國內(nèi)外常用抗兔球蟲藥物

1.1 化學(xué)合成藥物

1.1.1 磺胺類：磺胺類藥物具有水溶性好、廣譜、高效等特點(diǎn)。其化學(xué)結(jié)構(gòu)與對氨基苯甲酸(PABA)類似，可競爭性與二氫葉酸合成酶結(jié)合，影響二氫葉酸的合成，從而抑制細(xì)菌、原蟲生長繁殖。常用的磺胺類藥物包括磺胺嘧啶(sulfadiazine)、磺胺二甲嘧啶(sulfamethazine)、磺胺氯吡嗪鈉(sulfachloropyrazin sodium )、磺胺噁喹啉(sulfaquinoxaline)(Attaetal., 1999)、磺胺六甲氧嘧啶等(sulfamonomethoxine)。Horton等(1947)利用磺胺類藥物治療斯氏艾美耳球蟲Eimeriastiedae引起的兔肝球蟲病得到了良好的效果。蔣金書等(1981)驗(yàn)證了1 g/kg磺胺六甲氧嘧啶與200 mg/kg磺胺二甲嘧啶對混合型兔球蟲病的良好治療效果。盡管磺胺類藥物廣譜、高效，但由于其毒性較大，長期高濃度服用會導(dǎo)致畜禽中毒(邢蘭君, 2005；王天有等, 2014)，因此，建議磺胺類藥物只作為治療用藥。另外，磺胺類藥物的代謝產(chǎn)物會隨尿液排出污染環(huán)境，存在生態(tài)安全隱患。

1.1.2 三嗪類：三嗪類藥物是一類新型、高效、廣譜的抗球蟲藥物，主要包括地克珠利(diclazuril)、妥曲珠利(toltrazuril)、帕托珠利(ponazuril)等，廣泛應(yīng)用于雞球蟲病的防治。

1989年，地克珠利作為抗雞球蟲病藥物開始投入使用(Vanparijsetal., 1989)。同年，Peeters等(1989)報(bào)道了地克珠利抗兔球蟲感染的良好效果：飼料中添加1 mg/kg地克珠利即可治療感染了腸艾美耳球蟲E.intestinalis、大型艾美耳球蟲E.magna、穿孔艾美耳球蟲E.perforans的家兔，其增重和飼料轉(zhuǎn)化都與未感染組相當(dāng)；即便是0.5 mg/kg的低濃度添加，也可一定程度地預(yù)防和治療兔球蟲病(Peetersetal., 1989)。在斯氏艾美耳球蟲潛隱期內(nèi)，以1 mg/kg的濃度連續(xù)給藥7 d即可有效降低卵囊排出量，同時(shí)家兔的肝臟功能及生長性狀呈良好趨勢(周文江等, 1998)。近年來國內(nèi)的研究成果顯示，地克珠利的抗兔球蟲效果良好，1～3 mg/kg的添加濃度即可有效預(yù)防和治療兔球蟲病(艾必燕等, 2005; 吳昌標(biāo), 2006；劉以民等, 2008;林青等, 2012;陳賽娟等, 2014)。此外，地克珠利還可通過皮下給藥的方式，以0.5、1或2 mg/kg體重的預(yù)防性給藥劑量，4 mg/kg體重的治療性給藥劑量防治肝球蟲病(Panetal., 2008)，一定程度避免長期給藥產(chǎn)生的耐藥性。

妥曲珠利是德國拜耳公司研發(fā)的抗球蟲藥物，商品名百球清(Baycox?)，具有廣譜、高效、不易產(chǎn)生耐藥性等優(yōu)點(diǎn)，但是價(jià)格昂貴，使用并不廣泛(馮秀娟, 2005)。研究表示，在飲水中添加15～25 mg/kg妥曲珠利，可預(yù)防和治療腸、肝球蟲病，基本消除兔球蟲病對家兔生產(chǎn)性能的影響(Singlaetal., 2000; 宋宏曉等, 2014)；即便是僅在兔球蟲裂殖生殖末期給藥，也對兔球蟲病具有一定的治療效果(Peetersetal., 1986)。

帕托珠利于2001年在美國上市，由拜耳公司開發(fā)，商品名為Marquis，主要用于治療原蟲引起的哺乳動(dòng)物中樞系統(tǒng)疾病。帕托珠利是妥曲珠利在生物體內(nèi)的代謝產(chǎn)物，也是妥曲珠利的藥效形式(張?jiān)骑w等, 2011)。國內(nèi)對帕托珠利抗兔球蟲效果的研究較少。根據(jù)李媛(2013)的報(bào)道，20 mg/kg的預(yù)防性給藥劑量、30 mg/kg的治療性給藥劑量可治療人工感染腸艾美耳球蟲引起的兔球蟲病。

1.1.3 胍類: 氯苯胍是一種預(yù)防性廣譜抗球蟲藥，可通過干擾球蟲蛋白質(zhì)代謝，抑制其在宿主體內(nèi)生長繁殖(才鳳峰, 2005)。一項(xiàng)研究顯示，自然感染腸艾美耳球蟲、大型艾美耳球蟲、中型艾美耳球蟲E.media、穿孔艾美耳球蟲的家兔，飼喂氯苯胍16 d之后停止排出卵囊；利用33 mg/kg的氯苯胍可大幅度降低患病兔的死亡率和卵囊排出量，體重增加和飼料轉(zhuǎn)化率都有所保證(Peetersetal., 1980)。然而，在國內(nèi)的一些藥效對比實(shí)驗(yàn)中，氯苯胍的抗兔球蟲效果卻表現(xiàn)平平，不能夠?yàn)榧彝锰峁┳銐虻谋Ｗo(hù)(吳昌標(biāo), 2006;艾必燕等, 2005; 劉以民等, 2008;林青等, 2012;陳賽娟等, 2014) ，可能是因?yàn)槁缺诫逸^易形成耐藥性，現(xiàn)階段使用劑量已不足以抵抗兔球蟲的感染。

1.1.4 吡啶類: 氯羥吡啶(clopidol)是一種廣譜的抗球蟲藥物，于1969年開始被用于預(yù)防和治療雞球蟲病，但其容易產(chǎn)生耐藥，且對艾美耳屬球蟲各蟲種抑制效果不同(Siegmannetal., 1969; 才鳳峰, 2005)。國內(nèi)對氯羥吡啶治療兔球蟲病的效果褒貶不一，有學(xué)者認(rèn)為其高效、低毒(俞海等, 1985)，也有學(xué)者認(rèn)為抗兔球蟲效果劣于其他藥物(Peetersetal., 1980; 顏潔邦等, 1987; 周文江等, 1998; 林青等, 2012)。因此氯羥吡啶常與其他抗球蟲藥物混合使用，如樂百克(Lerbek)、可愛丹。

1.2 聚醚離子載體類抗生素

聚醚離子載體類抗生素是一類高效、低毒、廣譜的抗球蟲藥，通過破壞細(xì)胞內(nèi)離子平衡從而達(dá)到殺滅病原的效果，可持續(xù)作用于球蟲的無性生殖和有性生殖階段。常見的聚醚離子類抗生素包括莫能菌素(monensin)、鹽霉素(salinomycin)、馬杜拉霉素等。

莫能菌素是第一個(gè)投放市場的抗生素類抗球蟲藥，從肉桂地鏈霉菌Streptomycescinnamonesis的培養(yǎng)物中獲得。蔣金書等(1991)利用40 mg/kg即達(dá)到了上述效果，但當(dāng)劑量增加時(shí)，飼料的適口性差，對家兔的體增重有一定的影響。

鹽霉素來源于白色鏈霉菌Streptomycesalbus，由日本Agribio公司生產(chǎn)，商品名Biocox?。一項(xiàng)研究稱，利用50 mg/kg的鹽霉素、莫能菌素、沙拉里菌素(lasalocid)，均可治療兔球蟲?。黄渲?，鹽霉素對卵囊排出的抑制作用最強(qiáng)(Pakandl, 1986)。甲基鹽霉素(narasin)來源于金色鏈霉菌S.aureofaciens的發(fā)酵產(chǎn)物，結(jié)構(gòu)上比鹽霉素多一個(gè)甲基，商品名Monteban?。給家兔飼喂8～12 mg/kg的甲基鹽霉素可獲得最佳的增重和飼料轉(zhuǎn)化率；飼喂12～24 mg/kg 可達(dá)到最佳除蟲效果；劑量過高會影響家兔的生長(Peetersetal., 1981)。

馬杜拉霉素是來源于紅足分枝菌Actinomadurarubra的四苯醌類，商品有抗球王、杜球等。5～6 mg/kg的添加劑量可很好的預(yù)防和治療雞球蟲病，但家兔對該藥較為敏感，超過安全用藥范圍可致家兔中毒甚至死亡。國內(nèi)外已有多次馬杜拉霉素致家兔中毒的報(bào)道(石傳林, 1999; 王春和和孟紅, 2000; Martinoetal., 2009)，要謹(jǐn)慎使用。

1.3 混合制劑

依據(jù)聯(lián)合用藥的策略，將多種抗球蟲藥物組合形成的復(fù)方制劑比單一成分抗球蟲效果更佳。利用各組分在抗球蟲譜、對球蟲作用峰期的互補(bǔ)，商品化混合制劑有更強(qiáng)的抗球蟲效力。目前，混合制劑確切的配伍協(xié)同機(jī)理尚不明確，需經(jīng)大量的臨床試驗(yàn)才能確定各組分最佳配伍比例。目前較成功的混合制劑有：加強(qiáng)安保樂(Amprol Plus?)，主要成分為氨丙啉(amprolium)、乙氧酰胺苯甲酯(ethopabate)；樂百克，主要成分為氯羥吡啶、芐氧喹甲酯(methyl benzoquate)；猛安(Maxiban?)，主要成分為甲基鹽霉素、尼卡巴嗪(nicarbazin)；球菌凈，主要成分為鹽酸氨丙啉(amprolium hydrochloride)、磺胺喹惡啉 (才鳳峰, 2005)。一項(xiàng)研究對比了磺胺喹惡磷、氯苯胍、芐氧喹甲酯、氯羥吡啶和樂百克治療家兔肝球蟲病的療效，結(jié)果表明樂百克效果突出(Joyneretal., 1983)。然而，目前國內(nèi)很多廠家并沒有完成足夠的臨床試驗(yàn)證明復(fù)方制劑的藥效及副作用，僅僅將兩種甚至幾種藥物按推薦劑量混合在一起，其安全性、穩(wěn)定性、有效性沒有保證?；旌现苿┑拈_發(fā)和試制仍任重道遠(yuǎn)。

1.4 中草藥

近年來，利用傳統(tǒng)中草藥預(yù)防和治療兔球蟲病的研究愈來愈多。常用的抗兔球蟲中藥成分包括常山Dichroafebrifuga、青蒿Artemisiaannua、葫蘆茶Tadehagiohashi、白頭翁Anemonechinensis等(杜紹范等, 1997; 吳昌標(biāo), 2006; 晉愛蘭等, 2009)。雖然利用中藥防控兔球蟲病的報(bào)道頻頻出現(xiàn)，但僅僅是經(jīng)驗(yàn)性使用，研究方法還停留在治療效果的描述階段，其藥物作用機(jī)理、有效成分的提取等針對性研究尚未開展，存在大量未知因素。鑒于此，中藥防控的方法應(yīng)謹(jǐn)慎采用。

2 兔球蟲病藥物防治現(xiàn)存的問題

隨著抗兔球蟲藥物的廣泛使用，及我國兔業(yè)養(yǎng)殖水平的不斷提高，兔球蟲病對養(yǎng)兔業(yè)造成的危害有所減輕(Panetal., 2008; Jingetal., 2012)。但由于諸多因素的存在，并沒有完全消除其對生產(chǎn)造成的損失，隱患仍舊存在。

2.1 缺乏正確的藥物評估

縱觀國內(nèi)外有關(guān)抗兔球蟲藥物防治的研究，我們發(fā)現(xiàn)，很多研究中由于種種人為因素，導(dǎo)致其實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的真實(shí)性無法保證，因而各研究小組所得結(jié)果不盡相同。這些不確定因素包括:(1)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：未對實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的用藥背景做詳細(xì)調(diào)查，例如，在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的購買、使用之前若已長期飼喂了某種抗球蟲藥，且形成了耐藥性，則該種藥物的藥效評價(jià)必然不可信。(2)球蟲病是自限性疾病(Levine, 1963)，感染一段時(shí)間后，即可完全排出卵囊，而一些研究者將這種卵囊排出的減少歸結(jié)為藥物作用。在藥效實(shí)驗(yàn)中，排除相關(guān)因素，獲得真實(shí)準(zhǔn)確的一手資料，才能對抗兔球蟲藥物進(jìn)行可靠的評價(jià)。

2.2 藥物殘留問題備受關(guān)注

藥物及其代謝產(chǎn)物在食用動(dòng)物體內(nèi)的殘存，一直是養(yǎng)殖業(yè)關(guān)注的焦點(diǎn)(Pakandl, 2009)。發(fā)達(dá)國家對食品動(dòng)物的藥物使用有著嚴(yán)格的規(guī)定，對于抗球蟲藥物，歐盟禁用喹乙醇(olaquindox)、二硝托胺(dinitolmide)、氯羥吡啶、氨丙啉和尼卡巴嗪，日本禁用氯羥吡啶、磺胺類、尼卡巴嗪和乙胺嘧啶(pyrimethamine)。加強(qiáng)獸藥管理、控制藥物殘留，是提高我國食品衛(wèi)生安全水平的有效手段。根據(jù)我國農(nóng)業(yè)部公告第278號規(guī)定，使用部分藥物必須在畜禽許可屠宰或其產(chǎn)品(蛋、乳)上市之前間隔一定的時(shí)間。其中，對常用抗球蟲藥如地克珠利預(yù)混劑、鹽霉素鈉預(yù)混劑、磺胺二甲嘧啶等都有明確的休藥期規(guī)定。在利用藥物防治兔球蟲病時(shí)，藥物的選擇和使用必須注意以下幾點(diǎn)原則：(1)嚴(yán)格使用獸藥管理機(jī)構(gòu)認(rèn)定的抗球蟲藥物；(2)提高獸藥安全意識，積極關(guān)注獸藥安全評價(jià)；(3)遵循正確的藥物使用策略，嚴(yán)格實(shí)行休藥期規(guī)定。

2.3 耐藥蟲株在生產(chǎn)中不斷出現(xiàn)

抗球蟲藥物的耐藥性一直是養(yǎng)殖人員面臨的最嚴(yán)峻的問題。早在1989年，Peeters等(1989)的報(bào)道中就出現(xiàn)了對氯苯胍耐受的大型艾美耳球蟲蟲株。長期低劑量使用單種藥物，是耐藥蟲株出現(xiàn)的直接原因。由于養(yǎng)殖人員無法及時(shí)、準(zhǔn)確地辨別球蟲何時(shí)對何種藥物產(chǎn)生何種程度的耐藥性，導(dǎo)致有些已產(chǎn)生耐藥性的藥物仍在使用；同時(shí)與該藥結(jié)構(gòu)相似或作用機(jī)理相同的藥物產(chǎn)生交叉耐藥性，成為兔球蟲病爆發(fā)的隱患。一項(xiàng)調(diào)查顯示，在使用抗球蟲藥物的兔場中，感染率仍然高達(dá)80%(閆文朝等, 2010)。據(jù)吳昌標(biāo)的報(bào)道，就抗兔球蟲藥耐藥性形成的速度而言，喹諾酮類產(chǎn)生耐藥性的速度最快，其次是氯羥吡啶，中等速度的有氯苯胍、磺胺類，較慢的有氨丙啉、尼卡巴嗪，離子載體類藥物的耐藥性形成最慢(吳昌標(biāo), 2007)。2012年的一項(xiàng)報(bào)道顯示了國內(nèi)抗兔球蟲藥物使用與感染率的關(guān)系(Jingetal., 2012)，根據(jù)調(diào)查結(jié)果可以看出，雖然各兔場所處地理環(huán)境不同，衛(wèi)生條件亦有所差異，但聯(lián)合用藥的效果優(yōu)于單獨(dú)用藥。因此，臨床用藥時(shí)，必須遵循短時(shí)間內(nèi)有計(jì)劃地輪換或穿梭使用不同種類抗球蟲藥的原則(張海芬等, 2009)，最大限度地控制耐藥蟲株的出現(xiàn)，消除兔球蟲病爆發(fā)隱患。

2.4 新藥開發(fā)困難

耐藥性的產(chǎn)生促使人們探求非傳統(tǒng)藥物抗球蟲的療效，并研發(fā)新的藥物品種。但由于對球蟲藥物靶點(diǎn)的研究尚不深入，對藥物殘留和環(huán)境衛(wèi)生的要求愈來愈高，加之新藥研發(fā)成本巨大，而使得新藥開發(fā)相當(dāng)困難(吳昌標(biāo), 2007)。例如，一項(xiàng)報(bào)道稱，將5 g/kg的二氟甲基鳥氨酸(difluoromethylornithine)——一種最初用來治療布氏岡比亞錐蟲Trypanosomabruceigambiense藥物添加于飲水中，可使家兔的卵囊排出總量、腸道病變明顯降低，從而治療腸、肝兔球蟲病(Sanetal., 1988)。將適量的大蒜素添加至飼料中，可預(yù)防肝球蟲病(Toulahetal., 2007)。沒藥Commiphoramyrrha，一種橄欖科植物的干燥樹脂及其商品化提取物Mirazid亦具有抗球蟲效果(Baghdadietal., 2010)。然而，這些新型藥物的抗兔球蟲效果有限，并沒有真正投入到生產(chǎn)實(shí)踐中。

3 總結(jié)與展望

兔球蟲病是感染率最高的兔病之一，依賴藥物的防治手段并未徹底消除其對養(yǎng)兔業(yè)的影響，藥物殘留問題、耐藥蟲株的不斷出現(xiàn)給我們帶來了巨大的挑戰(zhàn)。我們必須規(guī)范抗兔球蟲藥物的使用，總結(jié)藥效試驗(yàn)、生產(chǎn)實(shí)踐中的問題與經(jīng)驗(yàn)，更加合理地、安全地利用抗兔球蟲藥物；同時(shí)，積極開發(fā)以弱毒蟲株為基礎(chǔ)的兔球蟲病活卵囊疫苗，最大限度地控制兔球蟲病帶來的經(jīng)濟(jì)損失，推動(dòng)我國養(yǎng)兔業(yè)的迅速發(fā)展。