陳琴男 趙翚 麻健豐

載藥殼聚糖膜在誘導(dǎo)牙周組織再生中的應(yīng)用

陳琴男 趙翚 麻健豐

目的 探討載入奧硝唑的殼聚糖膜對(duì)牙周炎患牙的牙周組織再生的臨床療效。方法選取慢性牙周炎患者65例（76顆患牙）。其中采用載藥殼聚糖膜治療33例（38顆患牙，觀察組），采用常規(guī)奧硝唑藥膜治療32例（38顆患牙，對(duì)照組）。記錄并比較兩組患者在牙周基礎(chǔ)治療后的第0、2、4、6、8、12、24、48周的齦溝出血指數(shù)（SBI）、牙周探診深度（PD）、牙周附著水平（AL）。結(jié)果載藥殼聚糖膜組患牙的SBI、PD、AL在牙周基礎(chǔ)治療后的第2、4、6、8、12、24、48周均較治療后第0周明顯降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0．05）。與對(duì)照組比較，觀察組患牙的SBI、PD、AL在牙周基礎(chǔ)治療后的第2、4、6、8、12、24、48周均顯著下降，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0．05）。結(jié)論載藥殼聚糖膜誘導(dǎo)牙周組織再生的臨床療效強(qiáng)于奧硝唑藥膜。

牙周組織再生 殼聚糖 臨床療效

慢性牙周炎不僅是成年人失牙的主要原因，也對(duì)身體各系統(tǒng)疾病有著一定的影響。殼聚糖是從自然界蝦蟹等甲殼類(lèi)動(dòng)物外殼中的甲殼素脫乙?；频?，通過(guò)溶菌酶代謝后成為無(wú)毒的D-氨基葡萄糖，作為一種抗菌酶存在于人類(lèi)唾液中。文獻(xiàn)報(bào)道，殼聚糖具有良好的生物安全性[1-2]。本研究旨在初步探討載入奧硝唑的殼聚糖膜對(duì)牙周炎患牙的牙周組織再生的臨床療效。

1 資料和方法

1.1 一般資料 選擇2011-12—2012-12溫州醫(yī)科大學(xué)溫州市第三臨床學(xué)院口腔科收治的慢性牙周炎患者65例（76顆患牙），納入標(biāo)準(zhǔn)：選取排除用藥禁忌及全身系統(tǒng)性疾病后的中重度慢性牙周病患者?；佳涝\斷標(biāo)準(zhǔn)：患牙牙周袋4mm以上，附著喪失3～4mm以上；X線(xiàn)片顯示牙槽骨水平型或角型吸收超過(guò)根長(zhǎng)的1/3；牙齒可能有松動(dòng)，多根牙可能有根分叉病變；可能有牙齦炎癥伴探診出血，或伴牙周膿腫[4]。其中觀察組33例（38顆患牙），男12例（19顆患牙），女11例（19顆患牙），年齡32～81（49.3±5.7）歲。對(duì)照組32例（38顆患牙），男12例（19顆患牙），女11例（19顆患牙），年齡34～78（49.7± 5.5）歲。兩組患者性別、年齡的比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05）。

1.2 方法

1.2.1 載藥殼聚糖膜的制備[3]處方：奧硝唑2.52g，殼聚糖1.2g，明膠2.2g，甘油3ml，純化水加至100ml。按處方量稱(chēng)取殼聚糖于玻璃研缽中，加2%醋酸14ml，不斷研磨，使殼聚糖溶解成透明膠體混合液。稱(chēng)取奧硝唑，用少量無(wú)水乙醇溶解，等量加液研磨法研入殼聚糖明膠膠體混合液中，2%醋酸調(diào)pH至6.5，純化水調(diào)至100ml，靜置消泡后均勻涂鋪于玻璃板上。40℃恒溫干燥成膜，切成1cm×1cm的小膜片共250片。在紫外燈下照射15min滅菌，密封包裝。

1.2.2 奧硝唑藥膜的制備 取羧甲基纖維素鈉，明膠海綿混勻后加蒸餾水并置水浴鍋內(nèi)加熱，溶解后得到復(fù)方膠液，將適量的奧硝唑研細(xì)過(guò)200目篩，分別加入甘油、復(fù)方膠液和著色劑，攪勻后制成厚度約為0.2mm的薄膜，放棕色瓶備用，每片藥膜含藥物0.8mg。

1.2.3 治療方法 所有患牙均一次性給予齦上潔治、齦下刮治術(shù)及根面平整術(shù)。觀察組患牙每次給予3%的過(guò)氧化氫和0.9%氯化鈉溶液交替沖洗并且于牙周袋內(nèi)應(yīng)用載藥殼聚糖膜；對(duì)照組患牙每次僅給予3%的過(guò)氧化氫和0.9%氯化鈉溶液交替沖洗并在牙周袋內(nèi)置入奧硝唑藥膜。載藥殼聚糖膜與奧硝唑藥膜根據(jù)牙周袋的情況由醫(yī)師自行剪切，以恰好放置于牙周袋內(nèi)為準(zhǔn)。

1.3 觀察指標(biāo) 兩組患者均在牙周基礎(chǔ)治療后的第0、2、4、6、8、12、24、48周就診并記錄齦溝出血指數(shù)（SBI）、牙周探診深度（PD）、牙周附著水平（AL）。并選取典型病例進(jìn)行治療前和治療后第4、48周的X線(xiàn)牙片對(duì)比。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料以表示，組間比較采用方差分析。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者治療前后SBI的比較 見(jiàn)表1。

表1 兩組患者治療前后SBI的比較

由表1可見(jiàn)，與治療后第0周比較，兩組患者治療后SBI均明顯降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）；與對(duì)照組比較，觀察組治療后第2、4、6、8、12、 24、48周SBI均顯著下降，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.01）。

2.2 兩組患者治療前后PD的比較 見(jiàn)表2。

由表2可見(jiàn)，與治療后第0周比較，觀察組患者治療后PD均明顯降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）；與對(duì)照組比較，觀察組治療后第2、4、6、8、12、 24、48周PD均顯著下降，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.01）。

2.3 兩組患者治療前后AL的比較 見(jiàn)表3。

表3 兩組患者治療前后AL的比較（mm）

由表3可見(jiàn)，與治療后第0周比較，觀察組患者治療后AL均明顯降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）；與對(duì)照組比較，觀察組治療后第2、4、6、8、12、24、 48周AL均顯著下降，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.01）。

2.4 典型病例治療前后的X線(xiàn)牙片對(duì)比 見(jiàn)圖1。

圖1 典型病例治療前后的X線(xiàn)牙片對(duì)比（a：觀察組患牙左下7治療前PD=11.5，可見(jiàn)近中牙槽骨垂直吸收明顯；b：治療后第48周PD=7.0，可見(jiàn)近中牙槽骨較治療前骨質(zhì)生長(zhǎng)明顯。c：對(duì)照組患牙左下6治療前PD=11.5，近中骨質(zhì)垂直吸收明顯；d：治療第48周PD=10.0，可見(jiàn)牙槽骨骨質(zhì)生長(zhǎng)較觀察組不明顯）

3 討論

殼寡糖化學(xué)名聚葡萄糖胺（1-4）-2-氨基-B-D葡萄糖，具有提高免疫、活化細(xì)胞、預(yù)防癌癥、降血脂、降血壓、抗衰老、調(diào)節(jié)血糖及排除體內(nèi)有害重金屬和調(diào)節(jié)機(jī)體環(huán)境等作用，目前已廣泛用于醫(yī)藥、保健、食品領(lǐng)域。盡管其在牙周學(xué)臨床治療方面也有應(yīng)用，但國(guó)內(nèi)相關(guān)研究及報(bào)道較少[5]。奧硝唑化學(xué)名為1-（3-氯-2-羥丙基）-2-甲基-5-硝基咪唑，對(duì)于牙周炎的治療有確切療效。殼聚糖其在自然界中來(lái)源豐富、價(jià)格低廉，且具有較好的生物活性、生物相容性、生物降解性，并易于制成溶液、膜、膠體等各種劑型的優(yōu)點(diǎn)[6]。細(xì)菌感染是引起牙周炎的根本原因。有學(xué)者報(bào)道，殼聚糖對(duì)大部分口腔病原體（包括牙齦卟啉單胞菌、變形鏈球菌、放線(xiàn)伴放線(xiàn)桿菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、銅綠假單胞菌 、綠膿桿菌）具有抗菌作用[7-8]。Yeo等[9]的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)提示，殼聚糖膜可以使牙骨質(zhì)和牙槽骨再生。Bernardo等[10]及Shen等[11]的體外實(shí)驗(yàn)研究表明，殼聚糖可以作為緩釋抗菌藥物的載體，并且增強(qiáng)抗菌藥物的抗菌作用。國(guó)內(nèi)其他研究也同樣表明，殼聚糖具有誘導(dǎo)牙周組織再生的功能。姜凌云等[12]的研究表明，經(jīng)過(guò)殼聚糖修飾的羥基磷灰石-磷酸三鈣修復(fù)犬牙槽骨缺損的效果優(yōu)于單純羥基磷灰石-磷酸三鈣修復(fù)犬牙槽骨缺損。賈洪誠(chéng)等[13]的研究表明，在大鼠模型上殼聚糖-抗壞血酸鹽不但能消除局部菌斑刺激因素，而且可以阻斷牙槽骨繼續(xù)破壞。吳勇等[14]的觀察表明，在體外培養(yǎng)時(shí)，殼聚糖膜可以促進(jìn)人牙周膜細(xì)胞增殖，有引導(dǎo)牙周組織再生的功能。而目前國(guó)內(nèi)外尚無(wú)奧硝唑有促進(jìn)牙周組織再生功能的報(bào)道。

本研究結(jié)果顯示，觀察組SBI、PD、AL均在治療后較治療前有明顯差異，而對(duì)照組則SBI在治療后較治療前有明顯差異，PD和AL均在治療前后無(wú)明顯差異，說(shuō)明載藥殼聚糖膜不僅能控制牙周的炎癥，而且在誘導(dǎo)牙周組織再生方面也有確切療效。由此可見(jiàn)，載藥殼聚糖膜作為牙周局部用藥是安全的，對(duì)誘導(dǎo)牙周組織再生方面具有一定療效，具有廣闊的臨床應(yīng)用前景。

[1]王訓(xùn)霞,張廣耘．羥甲基殼聚糖促進(jìn)牙周組織再生的安全性[J]．青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2009,45(4)：384-388．

[2] 孔晴宇,遲立群,張健群,等．醫(yī)用防粘連改性殼聚糖膜在心臟外科手術(shù)應(yīng)用中的安全性分析[J]．中華醫(yī)學(xué)雜志,2013,93(26)：2068-2070．

[3] 肖華,于西全,范尚坦．生物可吸收性甲硝唑牙周炎藥膜的制備及其質(zhì)量控制[J]．醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2007,26(6)：658-659．

[4]孟煥新．牙周病學(xué)[M]．3版．北京：人民衛(wèi)生出版社,2011：156-157．

[5] 陳琴男,趙翚．殼聚糖及其衍生物在牙周學(xué)中的應(yīng)用進(jìn)展[J]．浙江醫(yī)學(xué), 2013,35(9)：838-840．

[6]Manoj K S,Sunil K P,Alok M,et al．Chitosan：a novel excopient in pharmaceutical formulation：a revien[J]．Pharm Sci and Dru Res, 2011,2(9)：2266-2278．

[7]Chung Y C,Chen C Y．Antibacterial characteristics and activity of acid-solublechitosan[J]．BioresourTechnol,2008,99(8)：2806-2814．

[8]Sarasam A R,Brown P,Khajotia S S,et al．Antibacterial activity of chitosan-based matrices on oral pathogens[J]．Mater Sci Mater Med,2008,19(3)：1083-1090．

[9]Yeo Y J,Jeon D W,Kim C S,et al．Effects of chitosan nonwoven membrane on periodontal healing of surgically created one-wall intrabony defects in beagle dogs[J]．Biomed Mater Res B Appl Biomater,2005,72(1)：86-93．

[10]Bernardo M V,Blanco M D,Sastre R L,et al．Sustained release of bupivacainefromdevicesbased on chitosan[J]．Farmaco,2003,58 (11)：1187-1191．

[11]ShenEC,WangC,Fu E,et al．Tetracyclinereleasefromtripolyphosphate-chitosan cross-linked sponge：a preliminary in vitro study[J]．Periodont Res,2008,43(6)：642-648．

[12] 姜凌云,王爽,李艷萍,等．殼聚糖修飾的羥基磷灰石-磷酸三鈣修復(fù)犬牙槽骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究[J]．口腔醫(yī)學(xué)研究,2010,26(4)：479-481．

[13] 賈洪誠(chéng),王璇,馮延民,等．殼聚糖-抗壞血酸鹽治療大鼠牙周炎的實(shí)驗(yàn)研究[J]．北京口腔醫(yī)學(xué),2011,19(1)：20-23．

[14] 吳勇,王勤濤，吳織芬,等．殼聚糖膜對(duì)人牙周膜細(xì)胞體外增殖的影響[J]．口腔醫(yī)學(xué),2004,24(4)：206-208．

Efficacy of ornidazole-loaded chitosan membrane in treatment of chronic periodontitis

ObjectiveTo evaluate the efficacy of ornidazole-loaded chitosan membrane in treatment of chronic periodontitis．MethodsSixty five patients with chronic periodontitis (76 teeth)were randomly assigned to be treated with ornidazole-loaded chitosan membrane (observation group：33 patients with 38 teeth)or conventional ornidazole membrane(control group：32 patients with 38 teeth)．Sulcus bleeding index(SBI),probing depth(PD),periodontal attachment level(AL)were measured at 0,2,4,6,8,12,24 and 48weeks of treatment in both groups．The dental films were reviewed and compared at 0 and 48th week of treatment between two groups．ResultsThe SBI,PD,AL of the teeth in observation group were significantly improved at 2,4,6,8,12,24 and 48 weeks of treatment compared to those before treatment(P＜0．05)．The SBI,PD,AL of the teeth in observation group were also significantly lower than those in control group at all time points after treatment(P＜0．05)．ConclusionDrug-loaded chitosan membrane is more effective than conventional ornidazole membrane in treatment of chronic periodontitis．

Periodontal tissue regeneration Chitosan Clinical efficacy

2014-04-25）

（本文編輯：歐陽(yáng)卿）

溫州市醫(yī)藥衛(wèi)生科學(xué)研究項(xiàng)目（2011B018）

325000 溫州醫(yī)科大學(xué)溫州市第三臨床學(xué)院（溫州市人民醫(yī)院）口腔科（陳琴男、趙翚），溫州醫(yī)科大學(xué)附屬口腔醫(yī)院（麻健豐）

趙翚，E-mail：wzzh009@163.com；麻健豐，E-mail：Dentismacn@aliyan.com