郭明衛(wèi),陳麗敏

(1、沙河市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，河北 沙河054100；2、邢臺(tái)縣中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，河北 邢臺(tái)054000)

生物參考區(qū)間是解釋分析檢驗(yàn)結(jié)果的依據(jù)和程度[1]，由于臨產(chǎn)孕婦體內(nèi)一系列的生理性變化，其凝血四項(xiàng)指標(biāo)凝血酶原時(shí)間(PT)、部分凝血酶原時(shí)間(KPTT)、凝血酶時(shí)間(TT)和纖維蛋白原測(cè)定(Fg)是否能沿用正常人生物參考區(qū)間有待驗(yàn)證。根據(jù)ISO15189：2003《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室-質(zhì)量和能力的專用要求》，實(shí)驗(yàn)室必須建立自己的生物參考區(qū)間并定期評(píng)審，以確保依據(jù)的生物參考區(qū)間的有效性。我們結(jié)合ISO15189條款要求和已有的推薦方法[2]，驗(yàn)證并探討該人群生物參考區(qū)間，以保證生物參考區(qū)間的可靠選用。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源 我院產(chǎn)科正常臨產(chǎn)孕婦，年齡23～37歲，平均為25歲，排除高血壓、血友病及其他能影響血凝指標(biāo)的疾病，且肝功能、腎功能無異常，尿蛋白陰性。

1.2 標(biāo)本采集 抽取臨產(chǎn)孕婦靜脈血1.8ml加入含0.2ml(0.109mmol/L)枸櫞酸鈉的真空采血管（湖南安信醫(yī)用高分子材料有限公司生產(chǎn)）中顛倒混勻8～10次，3000r/min離心10min，選擇無溶血、無脂血抗凝血漿檢測(cè)，2h內(nèi)完成測(cè)試。

1.3 儀器與試劑 北京普利生儀器有限公司生產(chǎn)的C2000-A全自動(dòng)血凝儀及配套試劑，方法為磁珠法，試劑在有效期內(nèi)使用，操作過程嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)室SOP文件的有關(guān)要求進(jìn)行。

1.4 方法

1.4.1 驗(yàn)證項(xiàng)目的確定 本文選擇臨產(chǎn)孕婦PT、KPTT、TT和Fg，參照NCCLSC28-42推薦方法進(jìn)行驗(yàn)證。

1.4.2 對(duì)生物參考區(qū)間的驗(yàn)證 收集40名臨產(chǎn)孕婦標(biāo)本，在經(jīng)過性能評(píng)價(jià)驗(yàn)證可靠的檢測(cè)系統(tǒng)上檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果95%（38名）內(nèi)落在現(xiàn)用的參考區(qū)間內(nèi)，判定現(xiàn)用生物參考區(qū)間有效。若試驗(yàn)數(shù)據(jù)有3名或3名以上的檢測(cè)結(jié)果落在參考現(xiàn)用的生物參考區(qū)間外，先檢查檢測(cè)系統(tǒng)性能、檢測(cè)程序是否正確，之后考慮該項(xiàng)目是否具有人群生物特性，再進(jìn)一步調(diào)查。重新收集120名健康參考個(gè)體，進(jìn)行測(cè)定，檢測(cè)結(jié)果先做離群點(diǎn)的判斷，數(shù)據(jù)中的疑似離群點(diǎn)的判斷：將疑似離群點(diǎn)和其相鄰點(diǎn)的差值（D）和全距（R）相除，D/R 應(yīng)≤1/3,＞1/3 考慮為離群點(diǎn)。若有2個(gè)或以上疑似離群點(diǎn)，將最小的疑似離群點(diǎn)如上處理，若＞1/3則所有點(diǎn)都刪去，若≦1/3則保留所有數(shù)據(jù)，若有離群點(diǎn)被刪除后應(yīng)立即將其他數(shù)據(jù)補(bǔ)上[2]。

1.4.3 檢測(cè)系統(tǒng)/方法準(zhǔn)備 參考區(qū)間驗(yàn)證前需掌握檢測(cè)系統(tǒng)的性能和使用的檢測(cè)方法，對(duì)檢測(cè)系統(tǒng)/方法分析性能進(jìn)行有效驗(yàn)證和評(píng)價(jià)，確保實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)系統(tǒng)性能的關(guān)鍵指標(biāo)如不精密度和不準(zhǔn)確度的評(píng)價(jià)方法和可接受標(biāo)準(zhǔn)，確保檢測(cè)系統(tǒng)/方法準(zhǔn)確穩(wěn)定。檢測(cè)系統(tǒng)采用配套的質(zhì)控，并且在檢測(cè)系統(tǒng)在控的狀態(tài)下檢測(cè)試驗(yàn)標(biāo)本，記錄試驗(yàn)數(shù)據(jù)，保證驗(yàn)證項(xiàng)目結(jié)果的可靠。

2 結(jié)果

2.1 臨產(chǎn)孕婦PT、KPTT和TT生物參考區(qū)間驗(yàn)證結(jié)果 40名臨產(chǎn)孕婦PT、KPTT和TT各測(cè)定值均落在現(xiàn)用的生物參考區(qū)間范圍內(nèi)，說明該三項(xiàng)生物參考區(qū)間均適用于臨產(chǎn)孕婦，均通過驗(yàn)證。

2.2 臨產(chǎn)孕婦Fg生物參考區(qū)間驗(yàn)證結(jié)果 40名臨產(chǎn)孕婦Fg測(cè)定結(jié)果有19名超出現(xiàn)用的生物參考區(qū)間范圍，提示現(xiàn)用的生物參考區(qū)間不適用于臨產(chǎn)孕婦。按上述驗(yàn)證方法，所得該組人群Fg的參考區(qū)間為2.44～5.32g/L，與周光泉等報(bào)道基本一致[3]。

3 討論

血凝四項(xiàng)檢驗(yàn)項(xiàng)目已成為產(chǎn)前檢查的常規(guī)檢驗(yàn)項(xiàng)目。本文顯示，現(xiàn)用PT、KPTT和TT生物參考區(qū)間也適用于臨產(chǎn)孕婦。

Fg生物參考區(qū)間不適用于臨產(chǎn)孕婦，重新確立該組人群的生物參考區(qū)間2.44～5.32g/L。其原因?yàn)椋?1)Fg概況：人血漿Fg是由于肝細(xì)胞合成分泌的一種糖蛋白，是血漿中分子量最大、含量最高的凝血因子。除了作為凝血因子直接參與凝血過程外，纖維蛋白還可介導(dǎo)血小板凝集反應(yīng)。近年來，大量研究證明，血漿Fg水平的變化與應(yīng)激、動(dòng)脈血栓形成及彌散性血管內(nèi)凝血（DIC）等病理關(guān)系密切。

(2)臨產(chǎn)孕婦血漿凝血因子均有不同程度的增高，而作為體內(nèi)分子量最大的一種凝血糖蛋白Fg含量顯著增高，導(dǎo)致該組人群體內(nèi)凝血過程處于動(dòng)態(tài)平衡的高凝狀態(tài)，一方面可以預(yù)防或緩解分娩時(shí)大量失血，另一方面伴隨妊娠高凝狀態(tài)的同時(shí)存在抗凝、纖溶功能降低，增加了孕婦發(fā)生DIC等病理情況發(fā)生的可能。妊娠是一個(gè)正常生理過程，妊娠期血漿Fg升高、于妊娠末期平均值可達(dá)4.5 g/L，是正常妊娠的特點(diǎn)[4]。

眾所周知，生物參考區(qū)間是判斷健康與否的標(biāo)準(zhǔn)，實(shí)驗(yàn)室必須保證給臨床提供一個(gè)正確的生物參考區(qū)間，否則會(huì)導(dǎo)致誤診。但限于一般實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)行條件，自行制定生物參考區(qū)間存在客觀難度，因而對(duì)實(shí)驗(yàn)室的生物參考區(qū)間進(jìn)行驗(yàn)證是必要的也是可行的。當(dāng)生物參考區(qū)間出現(xiàn)偏離時(shí)，應(yīng)當(dāng)重新確立，確保生物參考區(qū)間的準(zhǔn)確性。

本文驗(yàn)證表明，現(xiàn)用的PT、KPTT和TT的生物參考區(qū)間適用于臨產(chǎn)孕婦；由于臨產(chǎn)孕婦與正常人的差異，現(xiàn)用的Fg的生物參考區(qū)間不適用于臨產(chǎn)孕婦，經(jīng)過重新確立，臨產(chǎn)孕婦的生物參考區(qū)間為2.44～5.32g/L。

[1]陳桂山.臨床生化檢驗(yàn)項(xiàng)目生物參考區(qū)間適用性驗(yàn)證[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2008,31(2):170-174.

[2]陳桂山,楊有業(yè)，梁錦勝，等.臨床醫(yī)學(xué)生物實(shí)驗(yàn)室生物參考區(qū)間的建立[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2008,23（4）:421-424.

[3]周光泉,劉堂兵.晚期妊娠婦女纖維蛋白原水平觀察[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2011,29(12):657-658.

[4]樂杰.婦產(chǎn)科學(xué)[M].第7版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2008:36.