麻志慧

（赤峰學院第二附屬醫(yī)院，內蒙古 赤峰 024000）

1 引言

化學發(fā)光免疫測定分析技術是指通過化學發(fā)光劑對抗體或抗原進行標記，并利用試劑的這種發(fā)光特性進行檢測的一種分析技術，可以進行有效定量或定性，現在已經被廣泛應用在了臨床診斷的許多領域.現綜述及展望如下.

2 化學發(fā)光免疫分析技術

2.1 起源

化學發(fā)光免疫測定分析技術最早應用在上世紀七十年代，當時只限于作為示蹤信號，而且儀器發(fā)展水平有限，其靈敏度差，且發(fā)光時長不足，依賴手工操作，無法實現試驗條件的即時控制，應用領域嚴重受限.后來發(fā)展到八十年代中期，辣根過氧化物酶標記技術的出現，使信號強度及發(fā)光時間明顯提高，解決了技術難題，從而得到迅猛發(fā)展和廣泛應用.

2.2 原理

2.2.1 發(fā)光原理

基于化學發(fā)光的免疫測定，首先是把化學發(fā)光物或酶標記物標記在抗體或抗原上，促使其相互之間發(fā)生免疫反應，即抗體與抗原進行特異性結合成復合物，之后把氧化劑或者化學發(fā)光劑加入生成的復合物，使其發(fā)光.之后再通過儀器檢測發(fā)光強度，進一步換算待測物的濃度.

能夠作為化學發(fā)光物的多為有機化合物，通過氧化反應出現發(fā)光現象，這是由于反應過程中的中間體能量釋放而發(fā)光.

2.2.2 檢測原理

處于激發(fā)態(tài)的分子在釋放的多余能量部分以光能釋放，從而發(fā)出波長一定的光子，而被檢測出，由于是否能夠的光子是微量的，在檢測的過程中往往加入微量倍增技術，從而提高顆粒磁粉的吸附量，加快反應速度，從而利于檢出.

2.3 分類

根據發(fā)光原理及試劑的不同，化學發(fā)光免疫技術被分為三種主要類型，發(fā)光物免疫測定、發(fā)光酶免疫測定及發(fā)光輔助因子免疫測定等.

3 臨床應用

3.1 對病毒的檢測

3.1.1 對梅毒螺旋體的檢測

對于梅毒的篩查，臨床常用的方法為檢測患者體內的非密螺旋體特異性抗體，然后進行確證檢測而確診.而常用的梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗、血凝試驗等人工檢測方法，操作繁瑣，耗時長但準確率低，無法滿足臨床，而廣州中醫(yī)藥大學第一附屬醫(yī)院檢驗科的何惠[1]等采用化學發(fā)光免疫測定法，可以利用全自動免疫化學發(fā)光分析儀，通過兩步法定性檢測，明顯降低了假陽性率，符合臨床需求.

3.1.2 對乙肝病毒標志物HBsAg的測定

乙型肝炎是一種傳染性強、流行廣泛且具有嚴重危害性的病毒性肝炎，傳統的檢測多采用ELISA法進行定性，但不能滿足臨床定量的要求.目前，多以HBsAg作為判斷病毒感染的標志，可以采用化學發(fā)光免疫測定法，對乙肝HBsAg抗原進行測定，既能定性，又可定量，靈敏度可以達到100%，特異性和符合率可分別高達96.15%及97.50%，各指標均能符合臨床診斷及治療的需求.焦梅[2]等通過化學發(fā)光免疫分析技術進行乙肝HBsAg的測定，發(fā)現其在較大范圍內線性較好.

3.1.3 艾滋病的預防

獲得性免疫缺陷綜合征，即艾滋?。ˋIDS），是由HIV病毒（人類免疫缺陷病毒）引起的，迄今為止沒有有效的治療手段，因此切斷感染途徑是重要措施.研究發(fā)現，可以通過化學發(fā)光免疫測定法進行對需要檢查的血清、儀器等樣本進行HIV抗原檢測，可不受黃疸、酯血及溶血的影響，降低了假陽性率，提高了檢測準確度.

3.2 對腫瘤標志物的檢測

在腫瘤患者細胞中，腫瘤標志物存在于其細胞及組織中，腫瘤標志物主要有蛋白質、癌基因產物、酶、激素等等.現在國內外許多學者通過化學發(fā)光免疫測定法對腫瘤標志物進行了檢測，對腫瘤的早期體外診斷及術后監(jiān)測均提供了重要而有效的方法.例如Mac等通過化學發(fā)光免疫測定法檢測了血清中鱗狀細胞癌抗原、癌胚抗原以及cy-fra21-1的濃度，從而進行了食管癌的診斷和病情監(jiān)測，效果顯著.

3.3 對心臟疾病的診斷

有學者通過試驗，進行了心臟疾病患者的心肌損傷標記物cTnT肌酸激酶同工酶CK-MB以及肌紅蛋白之間的相關系數分析，證實三者之間具有良好的相關性，因此可以利用化學發(fā)光免疫對這些指標進行臨床測定，用于臨床標本的檢測，有助于心臟類疾病的及時、有效、準確地診斷與病情監(jiān)測.而且臨床的檢測技術已經相對成熟.例如，戶雪冬[3]等通過電化學光免疫法對患者的血清心肌損傷標志物進行了分析，有效檢出和確診了心肌梗死病例，比傳統的診斷方法準確而方便.

3.4 自身免疫性疾病的診治

3.4.1 系統性紅斑狼瘡（SLE）的診治

SLE是一種累及全身的自身免疫亢進類疾病，臨床癥狀多樣化，容易造成誤診及延期診斷，造成疾病治療的延誤.但是傳統的診斷方法僅從臨床表現很難取得正確的結果，有效的實驗室檢查被迫切需求.有同仁對SLE患者進行了分析，發(fā)現其dsDNA抗體與補體C3、C4呈負相關，而與疾病活動指數、血沉等成正相關，說明dsDNA抗體水平對SLE的診斷及病情發(fā)展判斷有良好的指示價值，可以通過化學發(fā)光免疫測定法測定dsDNA抗體的水平，從而幫助進行SLE疾病的判斷.但需要指出的是，dsDNA抗體的濃度與SLE病情的危重程度沒有直接相關性.

3.4.2 類風濕性關節(jié)炎的診治

類風濕性關節(jié)炎也是一種自身免疫系統疾病，常累及多個關節(jié)，可以通過血清學標志物的檢測進行診斷及監(jiān)測.有學者采用化學發(fā)光免疫測定法檢測類風濕性關節(jié)炎患者的血清抗環(huán)瓜氨酸肽抗體，取得了較其他方法精密度更高，特異性更好的結果，而且整個檢測過程僅用了20分鐘，能夠較好地滿足臨床檢驗需求，對該疾病的治療具有良好的應用價值.

3.5 其他

化學發(fā)光免疫測定技術的應用領域還涵蓋了婦產科，如診斷早孕及滋養(yǎng)體細胞疾病；內分泌科，如甲狀腺疾??；血液科，如貧血等科別領域.

4 討論與展望

4.1 提高分析方法的靈敏度

能夠有效滿足疾病標記的抗原畢竟是少量的，因此，應該充分優(yōu)化檢測方法，有效實現分析結果的放大，提高放大倍數，延長檢測下限，提高分析方法的靈敏度，使化學發(fā)光免疫測定應用范圍更加廣范，發(fā)揮更大價值.

4.2 提高分析儀器的準確性

任何分析和檢測，以準確性為最終目的，而凡是使用儀器的分析以提高儀器的準確性為根本.化學發(fā)光的免疫測定方法越來越廣泛地被應用，但是也有其相應的局限，進一步的改進工作，應以提高分析儀器的準確性、使儀器向小型化及智能化方向轉變?yōu)槭滓蝿?

4.3 發(fā)掘新型發(fā)光物和高效催化劑

化學發(fā)光的免疫測定方法依賴于發(fā)光物的生成及高效催化劑的放大作用，為了擴大應用范圍、提高檢測的靈敏度，發(fā)掘新型發(fā)光物和高效催化劑是問題的重點.而且在這個基礎上和過程中，可以進一步研究新的分析方法.

4.4 修飾和增強化學發(fā)光反應效果

修飾和增強化學發(fā)光反應效果與發(fā)掘新型發(fā)光物及高效催化劑是相輔相成的，應該兩方面同時進行研究和改進.有利于擴大化學發(fā)光的免疫測定方法的應用領域和范圍，并且提高檢測靈敏度，提升檢測準確度.

5 結語

化學發(fā)光免疫分析技術靈敏度高、特異性好、分析方法簡單快速、能夠穩(wěn)定地與標志物結合而無污染，不受檢測樣本的破壞，如溶血等的影響，在對病毒的檢測、腫瘤標志物的檢測、心臟疾病的診治以及免疫系統疾病的診斷等各方面應用效果好、但是相比放射性分析方法，尚在儀器的準確性、檢測方法的靈敏性方面有一定差距，應充分發(fā)掘新型的發(fā)光物和高效催化劑、修飾和增強化學發(fā)光效果，提高其檢測準確度，擴大其臨床應用范圍.

〔1〕何惠,周迎春,劉基鐸,等.化學發(fā)光免疫測定在梅毒螺旋體抗體檢測中的臨床應用[J].國際檢驗醫(yī)學雜志,2011,32(13):1469-1471.

〔2〕焦梅,李明.化學發(fā)光免疫技術定量測定HBsAg的評價[J].實用醫(yī)技雜志,2003,10(6):598-599.

〔3〕戶雪冬,戶秋冬,劉陽貴.電化學發(fā)免疫法檢測血清心肌損傷標志物及心肌酶學在心肌梗死中的應用[J].中國誤診學雜志,2009,6(23)：4545-4546.

〔4〕施麗娟.化學發(fā)光免疫分析技術及在臨床檢驗中的應用[J].檢驗醫(yī)學與臨床，2012,9（4）：454-456.