蔣巧雅，黃 震，肖 慶

糖尿病腎病(diabetic nephropathy，DN)是糖尿病(diabetesmellitus，DM)最常見(jiàn)和最嚴(yán)重的慢性并發(fā)癥，也是影響糖尿病預(yù)后的主要因素之一。DN 的病理特點(diǎn)是腎基底膜增厚和以腎小球系膜區(qū)為主的細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)的積聚［1］，DN 是一個(gè)較長(zhǎng)期的進(jìn)程，從微量白蛋白尿開(kāi)始，經(jīng)過(guò)10～20年，可致終末期腎衰，成為糖尿病患者的一個(gè)重要死因。為探討hsCRP、VEGF 及Cys C 在2 型糖尿病腎病發(fā)病中的作用，我們對(duì)132 例2 型糖尿病患者外周血hsCRP、VEGF 及Cys C 的水平進(jìn)行了檢測(cè)，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 資料 選擇我院住院患者132 例，男62 例，女58 例，年齡31～66 歲，平均年齡50.6 歲，均符合2001年WHO 診斷標(biāo)準(zhǔn)［2］，經(jīng)24 h 尿白蛋白檢測(cè)，分為臨床糖尿病腎病為(CDN)組(尿蛋白:≥300 mg/24h)61 例，早期糖尿病腎病(EDN)組(尿蛋白:30～300 mg/24 h)42 例和單純糖尿病腎病(SDM)組(尿蛋白:＜30 mg/24 h)29 例。均排除高血壓、心血管疾病、腎臟疾病和惡性腫瘤等。選擇36 例健康體檢者作為對(duì)照組，男20 例，女36 例，年齡30～68 歲。空腹血糖及糖耐量實(shí)驗(yàn)均正常，無(wú)心腦腎及內(nèi)分泌代謝病。

1.2 方法 儀器和試劑:hsCRP 由德靈BNProSpec 特定蛋白分析儀及配套試劑進(jìn)行檢測(cè)，操作過(guò)程嚴(yán)格按照儀器及試劑使用說(shuō)明書;血清VEGF:EL ISA 法，試劑由深圳晶美公司提供;血清Cys C 試劑盒由羅氏公司提供。以上操作過(guò)程嚴(yán)格按照儀器及試劑使用說(shuō)明書。實(shí)驗(yàn)方法:標(biāo)本收集:患者入院時(shí)取靜脈采血用肝素抗凝，分離血漿放－70℃保存待檢。每份標(biāo)本做兩個(gè)平行孔，且所有標(biāo)本均在同一批內(nèi)檢測(cè)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS10.0 統(tǒng)計(jì)軟件處理，數(shù)據(jù)用±s表示，2 組間比較采用t 檢驗(yàn)，多組間先進(jìn)行確實(shí)數(shù)據(jù)的方差分析，再用D 檢驗(yàn)進(jìn)行組間比較。

2 結(jié)果

2.1 2 型糖尿病腎病患者血液hsCRP、VEGF 及Cys C水平的變化 2 型糖尿病腎病組患者血清hsCRP、VEGF 及Cys C 水平均顯著高于糖尿病無(wú)腎病組患者和正常人對(duì)照組，差異有非常顯著意義(P＜0.01);而且糖尿病無(wú)腎病組患者者血清hsCRP、VEGF 及Cys C 水平均顯著高于正常人對(duì)照組，差異有非常顯著意義(P＜0.01)。見(jiàn)表1。

2.2 2 型糖尿病腎功能異常患者血清胱抑素C 和超敏C 反應(yīng)蛋白陽(yáng)性率 Cys C 與hs-CRP 聯(lián)合檢測(cè)陽(yáng)性率與單檢hs-CRP 比較差異有顯著性(χ2=12.24，P＜0.01)，與單檢Cys C比較差異有顯著性(χ2=9.99，P＜0.01)。結(jié)果見(jiàn)表2。

表1 2 型糖尿病腎病患者血清hsCRP、VEGF 和Cys C 水平的變化(±s)

表1 2 型糖尿病腎病患者血清hsCRP、VEGF 和Cys C 水平的變化(±s)

組別例數(shù) hsCRP(mg/L)VEGF(pg/L)Cys C(mg/L)CDN 組617.74 ±2.68 402.43 ±45.04 7.02 ±1.18 DN 組425.27 ±2.10 345.49 ±33.70 3.95 ±0.78 SDM 組292.01 ±0.41 253.72 ±27.34 1.98 ±0.22對(duì)照組360.98 ±0.21 162.96 ±18.52 0.78 ±0.13

表2 早期腎損害組Cys C 與hs－CRP 單項(xiàng)和聯(lián)檢的陽(yáng)性率比較

2.3 2 型糖尿病腎病患者治療前后血液hsCRP、VEGF 及Cys C 水平的變化 2 型糖尿病患者經(jīng)內(nèi)科系統(tǒng)治療好轉(zhuǎn)后血清hsCRP、VEGF 及Cys C 水平顯著低于前，治療前后比較差異有顯著性(P＜0.01)。見(jiàn)表3。

表3 2 型糖尿病腎病患者治療前后血清hsCRP、VEGF 及Cys C 水平的比較(±s)

表3 2 型糖尿病腎病患者治療前后血清hsCRP、VEGF 及Cys C 水平的比較(±s)

時(shí)間例數(shù) hsCRP(mg/L)VEGF(pg/L)Cys C(mg/L)治療前617.74 ±2.68 402.43 ±45.04 7.02 ±1.18治療后582.42 ±1.05 269.55 ±19.27 2.14 ±0.19

3 討論

CRP 是肝臟合成的一種球蛋白，也是機(jī)體受到損傷或發(fā)生各種急慢性炎癥后的一種敏感反應(yīng)蛋白［3］，近年發(fā)現(xiàn)DM患者血清中CRP 水平明顯升高，且與糖尿病血管病變密切相關(guān)。DN 同樣為DM 微血管病變之一，也可能與炎癥反應(yīng)有關(guān)，CRP 作為血管炎癥反應(yīng)的更敏感的指標(biāo)，是全身炎癥反應(yīng)的非特異性標(biāo)志物［4］。有研究顯示CRP 與內(nèi)皮細(xì)胞激活及血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)、組織纖維蛋白溶酶原活化物、細(xì)胞連接蛋白相關(guān)，提示CRP 升高反映內(nèi)皮細(xì)胞功能受損。本研究發(fā)現(xiàn)，糖尿病腎病組CRP 的水平顯著高于糖尿病無(wú)腎病組和正常人組，且糖尿病無(wú)腎病組CRP 的水平高于正常人對(duì)照組，說(shuō)明炎癥因素在糖尿病及糖尿病腎病中均存在，且在糖尿病腎病患者體內(nèi)有更明顯的炎癥反應(yīng)。

胱抑素C 是一種小分子量的非糖基化堿性蛋白，分子量為13 kDa，是半胱氨酸抑制素家族成員之一。由于胱抑素基因?qū)佟翱醇一颉保梭w內(nèi)所有有核細(xì)胞均能產(chǎn)生，其合成不受肌肉量、年齡、性別、炎癥等因素影響，產(chǎn)生率多處于相對(duì)恒定狀態(tài)。其完全經(jīng)腎小球?yàn)V過(guò)并幾乎全部被近曲小管重吸收和分解，腎臟是清除循環(huán)中Cys-C 的唯一器官，故血清Cys-C濃度主要由GFR 決定，可以認(rèn)為Cys-C 是一種可反映腎小球?yàn)V過(guò)功能的較為理想內(nèi)源性物質(zhì)［5］。因此Cys-C 升高可以較好地反映DN 腎功能損害的程度。

VEGF 是1989年從培養(yǎng)的牛垂體濾泡星狀細(xì)胞分離出的一種分子量為35 000-45 000 二聚體糖蛋白，是近年來(lái)已得到公認(rèn)的促進(jìn)血管生長(zhǎng)最強(qiáng)有力的生長(zhǎng)因子，可特異性作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞，并能誘導(dǎo)血管形成，對(duì)維持內(nèi)皮細(xì)胞存活發(fā)揮著重要的作用［6］。正常情況下成人血清中的VEGF 表達(dá)水平較低，僅在病理情況下顯著升高，如炎癥等［7］。在DM 大鼠實(shí)驗(yàn)中，早期甚至在出現(xiàn)視網(wǎng)膜改變之前可發(fā)現(xiàn)VEGF 水平升高。劉志紅等對(duì)DN 患者腎組織中VEGF 及VEGF 受體表達(dá)進(jìn)行研究，其強(qiáng)度與患者腎小球結(jié)節(jié)樣病變的形成以及DM視網(wǎng)膜病變的發(fā)生顯著相關(guān)［8］。因此早期對(duì)VEGF 進(jìn)行干預(yù)，如使用單克隆抗VEGF 抗體，小分子VEGF 受體抑制劑及抗黏附分子治療，可降低血管高滲透性，減輕蛋白尿及腎小球肥大，可以為早期治療DN 開(kāi)創(chuàng)一條新途徑。

本研究結(jié)果顯示，DN 患者血清hsCRP、VEGF 及Cys C 水平顯著高于糖尿病無(wú)腎病組和正常人對(duì)照組，且糖尿病無(wú)腎病組hsCRP、VEGF 及Cys C 高于正常人對(duì)照組，提示長(zhǎng)期的高血糖刺激，血管內(nèi)皮細(xì)胞hsCRP 和VEGF 的表達(dá)增加，其結(jié)果導(dǎo)致白細(xì)胞黏附增加、血管內(nèi)皮細(xì)胞慢性炎癥，進(jìn)而促進(jìn)DN 的形成。另外，本研究還發(fā)現(xiàn)，在診斷2 型糖尿病患者早期腎損害中，血清CysC、hs-CRP 水平是從不同方面反映腎功能狀況。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，CysC 水平與hs-CRP 水平呈正相關(guān)，hs-CRP 水平升高，CysC 水平也升高，提示DN 可能為慢性炎癥，慢性炎癥使腎血管內(nèi)皮細(xì)胞受損，進(jìn)而使腎臟受損［9］。

綜上所述，糖尿病腎病是由于長(zhǎng)期低度炎癥反應(yīng)的結(jié)果，hsCRP、VEGF 及Cys C 參與了DN 的發(fā)生發(fā)展過(guò)程，尤其VEGF 是DN 發(fā)病的元兇，血清中hsCRP、VEGF 及Cys C 表達(dá)紊亂和炎癥反應(yīng)密切相關(guān)，檢測(cè)血清中hsCRP、VEGF 及Cys C水平有利于觀察DN 患者病情的演變過(guò)程。對(duì)2 型糖尿病腎病的診斷和療效觀察具有非常重要價(jià)值。從而為我們?cè)谂R床上早期發(fā)現(xiàn)糖尿病腎病、為糖尿病的監(jiān)測(cè)、預(yù)防和治療提供了一種新思路和理論依據(jù)。

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