崔尚金 陳建飛/ 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所

豬病毒性腹瀉的綜合防制

崔尚金 陳建飛/ 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所

合理的返飼是目前控制豬病毒性腹瀉最有效的措施之一。其原理是將感染仔豬的病毒通過口服的方法感染懷孕母豬，使其產(chǎn)生免疫抗體（類似于接種口服弱毒苗），從而使新生仔豬可以通過母乳獲得高滴度的母源抗體，以抵抗病毒的感染。

一、流行病學(xué)

病豬是本病的主要傳染源，通過病豬排泄的糞便散播病毒，污染飼料、飲水和環(huán)境，健康豬經(jīng)口接觸了含豬病毒性腹瀉病毒（PEDV）的糞便即可發(fā)生自然感染，糞一口途徑可能是傳播的主要方式。各年齡的豬均可感染，仔豬和育成豬的發(fā)病率通常為100%,母豬為15%～90%。病毒傳入豬群的途徑主要是通過運輸病豬或是被污染的飼料、車輛，以及被病毒污染的靴、鞋或其它攜帶病毒的污染物。本病多發(fā)生在寒冷季節(jié)，但也可發(fā)生于夏季。豬病毒性腹瀉（PED）雖然是世界范圍內(nèi)發(fā)生的豬病，但是其在亞洲與歐洲的發(fā)生情況有所差別，在歐洲PED引起仔豬的死亡率較低而在亞洲PED引起仔豬的死亡率較高。在2005～2007年間，陳建飛等（2007)對國內(nèi)部分省、市豬場腹瀉病例的RT-PCR檢測結(jié)果顯示，PED病例占46%、豬輪狀病毒（PoRV)病例占8 %、豬傳染性胃腸炎（TGE)病例占15 %,而PED、PoRV和TGE相互混感病例占31%。2011年陳建飛等對來自11個省市的28豬場的139份樣品（糞便或小腸內(nèi)容物）進(jìn)行了檢測，結(jié)果表明PEDV的陽性率為54.7% (76/139)，TGEV的陽性率為38.1% (53/139)，二者混合感染率為25.9%，PoRV的陽性率為5.04% (7/139),而豬kobuvirus的陽性率只有1.44% （2/139）。綜合仔豬的臨床發(fā)病癥狀（嘔吐、腹瀉和脫水）和病料的檢測結(jié)果等方面，我們認(rèn)為該次腹瀉病的主要病原為PEDV。劉孝珍等對2011年的17株地方流行毒株的S1基因進(jìn)行序列測定分析表明我國各地豬群中有新基因型的毒株在流行。這些調(diào)查結(jié)果說明，在我國豬病毒性腹瀉疾病中，PEDV的感染占主導(dǎo)地位。

二、我國豬流行性腹瀉流行新特征

我國自20世紀(jì)80年代開始報道有PED的流行，呈地方性和季節(jié)性流行，未見類似日韓的大流行。自2010年秋以來，我國華南、華東和華北部分省份出現(xiàn)了嚴(yán)重的仔豬腹瀉流行，造成仔豬的死亡率急劇增加。

本次腹瀉呈現(xiàn)出的流行特點與以往明顯不同，主要表現(xiàn)在以下方面：（1）主要感染哺乳仔豬，2～7日齡仔豬感染率高，對妊娠母豬和其他生長階段的豬沒有明顯影響。（2）10日齡內(nèi)仔豬感染出現(xiàn)腹瀉2～4 d后，大量死亡，死亡率在50%以上。（3）在產(chǎn)房內(nèi)呈跳躍式傳播。（4）死胎和低胎齡母豬所產(chǎn)仔豬發(fā)病率相對較高。（5）在部分豬場呈時間上的間歇性發(fā)病。（6）在部分豬場，用PEDV確診病料返飼后（1頭仔豬病料返飼10頭母豬)，母豬和仔豬仍還出現(xiàn)腹瀉，只是時間提前。（7）在大型集約化豬場，科學(xué)的返飼可有效控制PED。

目前，己經(jīng)有多家研究單位介入本次疾病大流行的調(diào)查和研究，但是對于本次流行病毒的病原學(xué)特性還有待于深入研究。回顧過去20年我國養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展和疾病控制策略，特別是流行性腹瀉和傳染性胃腸炎的控制策略，不難發(fā)現(xiàn)以下與本次腹瀉大流行相關(guān)的可能因素：

（1）本次流行的PED，與以往日韓流行的亞洲病毒十分相似，以感染哺乳仔豬、造成嚴(yán)重?fù)p失為特征。

（2）2009年以來，國內(nèi)出現(xiàn)大量的母豬擴(kuò)群（特別是大型牧場）。從國外（如澳大利亞）的經(jīng)驗看，PED的流行與大量新母豬的擴(kuò)群有密切關(guān)系。

（3）國內(nèi)外研究顯示，PEDV弱毒苗口服免疫效果顯著優(yōu)于肌肉途徑免疫的弱毒苗和滅活苗，而我國僅有PEDV滅活疫苗上市。

（4）自2000年左右韓國發(fā)生PED大流行以來，周邊地區(qū)均有暴發(fā)，我國一直處于地方性流行狀態(tài)。

（5）中國的PEDV野毒與韓國分離株極為相似，而與歐洲疫苗株距離較遠(yuǎn)。

（6）PED在局部地區(qū)首先暴發(fā)后，未能及時有效控制，逐漸蔓延后出現(xiàn)大流行。

三、臨床癥狀

PED最明顯的癥狀是水樣腹瀉，在PED廣泛流行和母豬群大多有免疫力的國家或地區(qū)的種豬場中，新生仔豬很少暴發(fā)PED。易感種豬群暴發(fā)本病時，發(fā)病率和死亡率差異很大，在有的種豬場，所有年齡的豬只均感染發(fā)病，發(fā)病率高達(dá)100%,此時該病與豬傳染性胃腸炎（TGE）極為相似，只是傳播速度較慢和哺乳仔豬病死率稍低。1周齡內(nèi)仔豬常常腹瀉3～4 d后因脫水而死，病死率平均為50%,但有時高達(dá)80%，日齡較大的仔豬約1周后康復(fù)。

暴發(fā)過急性腹瀉的豬場，在斷奶后2～3周可能出現(xiàn)持續(xù)性腹瀉，新引進(jìn)的豬只也可能相繼發(fā)病。近幾年來，在日本和韓國均有新生仔豬急性PED的暴發(fā)并出現(xiàn)高的致死率。在歐洲一些豬場，斷奶豬和成年豬經(jīng)常發(fā)生嚴(yán)重的腹瀉，而哺乳仔豬，尤其是無母源抗體的哺乳仔豬不發(fā)生或僅發(fā)生輕微腹瀉，發(fā)病率很低，對于這種現(xiàn)象至今仍未能做出很好的解釋。

多渠道來源的混養(yǎng)架子豬或育肥期間豬只暴發(fā)急性PED時，臨床表現(xiàn)幾乎一樣，所有的豬只在1 周內(nèi)均表現(xiàn)腹瀉，食欲稍減退，精神沉郁，糞便呈現(xiàn)水樣。在育肥后期，PEDV感染引起的腹瀉比豬傳染性胃腸炎病毒（TGEV)引起的腹瀉豬只的腹瀉要嚴(yán)重，但大多數(shù)豬只在7～10 d后康復(fù)，病死率僅為1%～3%，且這種死亡常見于腹瀉早期或發(fā)生腹瀉之前，剖檢病死豬常見背部肌肉壞死。應(yīng)激敏感的豬只發(fā)生PED時死亡率很高。一般來說，PEDV在架子豬和育肥豬的腸道內(nèi)比在新生仔豬的腸道內(nèi)更易增殖，因此，育肥豬對該病毒易感性更高，一旦發(fā)病，發(fā)病率常高達(dá)100%。

四、病理變化

PEDV在自然感染和實驗感染的仔豬中均能引起肉眼可見的病變，主要表現(xiàn)為：小腸膨脹，內(nèi)充滿大量黃色液體。在接毒后24 h，仔豬的小腸絨毛出現(xiàn)組織學(xué)變化，主要表現(xiàn)為：小腸絨毛上皮細(xì)胞空泡化、脫落，絨毛變短，這個組織學(xué)變化恰恰與仔豬腹瀉發(fā)生的時間相吻合。超微結(jié)構(gòu)變化主要發(fā)生于小腸細(xì)胞細(xì)胞漿中，可見細(xì)胞器減少，出現(xiàn)電子半透明區(qū)，接著微絨毛和末端網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)消失，部分胞漿突入腸腔內(nèi)，腸細(xì)胞變平，緊密連接消失，脫落進(jìn)入腸腔，可見腸細(xì)胞內(nèi)的病毒是通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜以出芽方式形成的。在結(jié)腸，含病毒的腸細(xì)胞出現(xiàn)一些細(xì)胞病變，但未見細(xì)胞脫落。

五、診斷

PED與豬傳染性胃腸炎（TGE)的臨床癥狀極其相似，所以根據(jù)臨床癥狀來診斷PED是非常困難的。最初在實驗室中，主要依靠病毒分離、病毒中和試驗和免疫熒光試驗等檢測PEDV抗原和抗體的病原學(xué)新方法，這些方法都能對PED作出準(zhǔn)確的診斷，但是操作復(fù)雜而且耗時。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，PCR、ELISA被應(yīng)用到PEDV診斷技術(shù)中。另外，也應(yīng)該和豬偽狂犬病毒（PRV)、豬輪狀病毒（PRoV)、豬捷申病毒、豬圓環(huán)病毒、豬繁殖與呼吸綜合癥病毒、豬瘟病毒、以及細(xì)菌等引起的腹瀉相區(qū)分和鑒別。

六、防治

1.疫苗預(yù)防。暴發(fā)PED時，無特別有效的措施，抗菌藥物治療無效。我國預(yù)防豬流行性腹瀉主要依賴于滅活疫苗和弱毒疫苗。中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所馬思奇、馮力等等在“八五”期間到“十二五”期間分別完成了 “豬傳染性胃腸炎、豬流行性腹瀉二聯(lián)滅活疫苗”和“豬傳染性胃腸炎、豬流行性腹瀉三聯(lián)弱毒疫苗”的研制并應(yīng)用于各地豬場。

馮力等TGEV和PEDV 二聯(lián)滅活疫苗和弱毒疫苗的應(yīng)用大大降低了我國豬流行性腹瀉及豬傳染性肺炎的發(fā)生率，為我國豬病毒性腹瀉疾病的預(yù)防提供了保障。

由于多發(fā)于寒冷的冬季，有明顯的季節(jié)性，可在每年的10月份對母豬進(jìn)行兩次腹瀉二聯(lián)弱毒苗或三聯(lián)苗的防疫注射，防疫間隔20 d，治療時無特效藥物，由于對5周齡以上的豬引起死亡率較低，可對不同階段病豬進(jìn)行不同方法對癥治療，如投用收斂止瀉劑，使用抗菌藥物以防止細(xì)菌繼發(fā)感染，靜脈注射葡萄糖鹽水和碳酸氫鈉溶液以防止脫水和酸中毒等，一般都可獲得良好效果。

發(fā)生腹瀉的豬只應(yīng)讓其自由飲水，以減少脫水的發(fā)生，另外，應(yīng)停止喂料，尤其對于育肥豬。將PEDV人為地擴(kuò)散到妊娠母豬舍可激發(fā)母豬乳汁中迅速產(chǎn)生免疫力，因而可縮短本病的流行時間。

對于種豬場，若發(fā)現(xiàn)暴發(fā)PED后連續(xù)數(shù)窩的斷奶仔豬中均存在PEDV，則可將仔豬斷奶后立即移至別處至少飼養(yǎng)4周，同時暫停從外引進(jìn)新豬。加強衛(wèi)生管理，可防止病毒侵入豬場內(nèi)，目前流行病學(xué)調(diào)查表明本病毒主要是通過豬和人的流動而侵入豬場的。

晚秋至早春寒冷季節(jié)，不要引進(jìn)帶毒豬，注意消毒和飼養(yǎng)管理，搞好舍飼衛(wèi)生，防止潮濕悶熱，保持舍內(nèi)空氣新鮮。提高豬群健康水平，增強抗病力。

實行“全進(jìn)全出”的管理，可有效的預(yù)防此病流行。有資料報道，在疫病流行時用新城疫I系苗作緊急防治，按50～100倍稀釋作交巢穴（后海穴）或肌肉注射1～2次，有良好效果，防治有效率可達(dá)90%左右，此防治原理是新城疫I系苗作為誘導(dǎo)劑，可誘導(dǎo)豬機體產(chǎn)生干擾素，干擾素具有廣譜的抗病毒繁殖活性。

2.返飼。根據(jù)PEDV為冠狀病毒的病原特征、致病機理和流行性特征，認(rèn)為合理的返飼是目前控制PED最有效的措施之一。

返飼是一種原始的免疫方法，其原理是將感染仔豬的病毒通過口服的方法感染懷孕母豬，使其產(chǎn)生免疫抗體（類似于接種口服弱毒苗），從而使新生仔豬可以通過母乳獲得高滴度的母源抗體，以抵抗病毒的感染。返飼對冠狀病毒和輪狀病毒感染控制均有效。

科學(xué)的返飼應(yīng)注意選擇合適的病料、合理的制各方法和返飼程序的管理等幾個方面。一個合理的返飼應(yīng)掌握以下原則：（1）目的是在整個母豬群中建立整齊的免疫水平，使得母源抗體可以保護(hù)哺乳仔豬（至少是2周齡以內(nèi)的仔豬）免受病毒感染。（2）需要空懷和懷孕100日齡以內(nèi)的所有母豬、后備豬。（3）返飼過程中隔離懷孕100日齡以上母豬和哺乳母豬。（4）返飼的時間最好相對集中，如在1周內(nèi)完成。（5）懷孕100日齡以上及產(chǎn)房母豬，在斷奶后進(jìn)行返飼。

傳統(tǒng)的返飼方法通常將收集的仔豬腹瀉糞便，直接飼喂給懷孕母豬?，F(xiàn)在普遍采用的改良方法為采集發(fā)病仔豬7～10日齡（發(fā)病2～3 d)小腸，制備組織勻漿，按一定比例飼喂母豬。具體步驟如下：（1）患病仔豬放血后，清水沖洗體表的糞便等污物，然后用手術(shù)刀小心剖開腹部皮膚，勿將腸管割破。（2）剖開腹部后，從十二指腸往下順著找，當(dāng)找到十二指腸與空腸的大致交界處時用縫線結(jié)扎此處，之后找到回盲交界處也用縫線結(jié)扎。用手術(shù)剪剪下兩個結(jié)扎點之間的小腸段部分，連同小腸或其它腸內(nèi)容物一起置入無菌容器中。（3）當(dāng)采集足夠的小腸組織后，用消毒手術(shù)剪將其剪成碎狀小塊，置于組織勻漿機，制備勻漿。（4)向勻漿中加入抗生素（每100 g組織中加慶大霉素3 ml、新霉素l g、硫酸黏菌素2 g）和并稀釋劑（如每100 g組織中加400 ml鮮牛奶）。

同時病料的采集和處理應(yīng)注意以下幾點。（1）盡量選擇日齡?。?0日齡以內(nèi)）的發(fā)病豬。（2）癥狀越典型越好，若同窩母豬帶有腹瀉更佳，如果能進(jìn)行快速確診PEDV，則更理想。（3）在出現(xiàn)腹瀉后2 d內(nèi)撲殺，采集小腸。（4）盡量剔除有細(xì)菌繼發(fā)感染和球蟲感染的病料。（5） —般不選擇2周齡以上的仔豬，因為無法排查球蟲感染。（6）病料最好現(xiàn)采現(xiàn)用，如需長期儲存（7d以上)，須-20℃凍存。

將制備好的返飼用組織勻漿給符合條件的母豬一次性投喂，包括后備母豬，10 ml/頭；返飼后，注意觀察母豬是否有減料和拉稀癥狀；無需對出現(xiàn)上述癥狀的母豬作任何處理，2～3 d后自然恢復(fù)；7 d后對在上次飼喂時未出現(xiàn)拉稀的母豬再次拌料投喂，哺乳母豬斷奶后投喂;返飼當(dāng)天，勿在飲水中加入次氯酸和消毒劑。

在返飼期間，嚴(yán)格控制豬場內(nèi)外的豬和人員流動；對于出現(xiàn)腹瀉的豬，需要進(jìn)行抗生素治療防止細(xì)菌感染以及添加電解質(zhì)多維防止脫水和酸中毒；對于自然免疫不發(fā)病豬，不做處理。對于出現(xiàn)腹瀉的保育/肥育豬，也需要進(jìn)行抗生素治療防止細(xì)菌感染和添加電解質(zhì)多維防止脫水和酸中毒；對于2 周齡以上的腹瀉哺乳仔豬，采取早期斷奶隔離，并配合抗生素治療防止細(xì)菌感染和添加電解質(zhì)多維防止脫水和酸中毒；對于1周齡以內(nèi)的腹瀉仔豬，撲殺收集病料，符合條件的可用于返飼。

（本文根據(jù)會議資料整理，因版面有限，本刊對作者原文有所刪節(jié)）