張新明 盧玲玲 涂斐佩 潘曉夫 (瑞安市塘下人民醫(yī)院，瑞安 325204)

原發(fā)性高血壓病是臨床常見病、多發(fā)病，在中國有超過2.6 億的患者;10%～15%將進展至慢性腎衰竭。高血壓腎病排在腎小球腎炎、糖尿病腎病之后居第三位，占老年人慢性腎功能不全發(fā)病原因的第一位［1-3］。長期高血壓引起的小動脈硬化病變可以遍及全身，但以腎臟最明顯。腎小管缺血性的病變導致尿濃縮功能減退，患者夜尿增多;腎小球缺血性病變則出現(xiàn)蛋白尿，早期蛋白尿的程度一般是輕至中度，24 h 定量一般不超過1.5～2 g，一般以小分子蛋白為主。高血壓所致的腎臟疾病早期往往無特異性臨床癥狀，發(fā)展到后期所致的腎臟損傷幾乎不可逆轉(zhuǎn)，因此尋找一個良好的生物學指標來監(jiān)測高血壓患者的腎臟功能進行早期積極的預防和治療，控制原發(fā)病對腎臟的損害刻不容緩。

近年來研究發(fā)現(xiàn)，尿NGAL 蛋白在急性腎損傷、慢性腎炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡腎病、糖尿病腎病所致的早期腎臟損傷過程中檢測出明顯高于正常對照組［4-7］;缺血或中毒性AKI(急性腎損傷)動物模型中，NGAL 蛋白是最早上調(diào)的蛋白之一，腎臟損傷僅3 h，就能檢測其血尿水平的成倍升高［8］;有學者通過Luciferase 和mCherry 雙熒光報告基因在NGAL啟動子和其5'UTR 驅(qū)動下的knock in 小鼠模型的實驗結(jié)果顯示在缺血性和細胞毒性腎損傷時NGAL基因表達活性在腎組織中的呈明顯的劑量依賴性［9］;這些結(jié)果提示監(jiān)測NGAL 對腎臟早期損傷的監(jiān)測具有重要的意義。

但目前仍未見有關(guān)于NGAL 與高血壓腎病的相關(guān)研究報道。當腎臟受到損傷，尤其是缺血再灌注損傷時，NGAL 可誘導腎小管上皮細胞再生，促進修復［10］?；贜GAL 與腎臟疾病及原發(fā)性高血壓的密切關(guān)系，本實驗擬對各期高血壓腎病患者的血、尿NGAL 蛋白進行檢測，并追蹤隨訪，以明確NGAL在高血壓腎病中的表現(xiàn)，為今后更進一步的研究奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 實驗標本 (高血壓腎病患者與正常健康人群的選取):選取2012 年10 月至2014 年5 月在本院住院，高血壓病史大于10 年以上的患者，排除原發(fā)性腎臟疾病，糖尿病等繼發(fā)性腎臟疾病，臨床確診為原發(fā)性高血壓腎病患者90 例(男48 例，45～72歲;女42 例，43～70 歲)按24 h 尿微量白蛋白排泄率分為正常蛋白尿組(A 組，30 例，UAER＜30 mg/24 h)，微量蛋白尿組(B 組，30 例，UAER 介于30～300 mg/24 h)及大量蛋白尿組(C 組，30 例，UAER＞300 mg/24 h);查看所有健康體檢人群的電子病歷，選取所有檢查項目(肝腎血脂、腹部B 超、胸片等均正常，排除高血壓、糖尿病、心臟病等疾病)30 例(D組，男18 例，45～60 歲;女12 例，43～60 歲)。收集兩組人群的相關(guān)信息(住院號，姓名，性別，尿常規(guī)，尿肌酐，腎功能等)，并隨訪一年。采集兩組人群的血清標本，晨尿標本離心沉淀取上清液于-80℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 實驗方法 從-80℃冰箱取出上述標本，置室溫放置30 min。分別檢測兩組標本的血肌酐、尿素氮、半胱氨酸蛋白酶抑制劑C、超敏C 反應蛋白、尿轉(zhuǎn)鐵蛋白含量以及血、尿NGAL 等指標。NGAL 檢測方法為ELISA 法(R＆D 公司)嚴格按照說明書操作，其余檢測項目均在AU2700 全自動生化儀上檢測。嚴格按照檢驗科標準化檢測程序進行檢測，采用的方法室內(nèi)質(zhì)控為試劑盒內(nèi)部質(zhì)控品，標準品為配套標準品。

2 結(jié)果

2.1 隨訪前后高血壓腎病組(A、B、C 組)與正常對照組血壓變化情況與GFR(ml/min)水平比較 隨訪各組前后血壓變化無統(tǒng)計學差異;高血壓腎病組GFR隨病情加重顯示下降趨勢，B 組C 組GFR 水平顯著低于A 組(隨訪前，P＜0.001;隨訪后，P＜0.001);B 組C 組GFR 水平顯著低于對照組D 組(隨訪前，P ＜0.001;隨訪后，P＜0.001);D 組與A 組GFR 水平未見統(tǒng)計學差別(P＞0.05)見表1。MDRD GFr=186.3×Scr(mg/dl)-1.154×年齡(歲)-0.203×0.742(女性)×1.233(中國人)。

2.2 各組血尿NGAL 水平比較及隨訪后的變化 表2 展示了隨訪前后血尿NGAL 各組水平的變化。結(jié)果顯示:無論是隨訪前還是隨訪后，血NGAL 水平隨尿蛋白的排出增多而降低，尿NGAL 水平隨尿蛋白的排出增多而增高。尿NGAL 水平為C 組高于B組高于A 組，血NGAL 水平為D 組高于B 組高于C組，血尿NGAL 水平在D 組與A 組無顯著差別。且隨訪后各組血尿變化有顯著差別，隨訪后血NGAL水平高于隨訪前，尿NGAL 水平低于隨訪前。

2.3 其他指標隨訪前后的變化 表3 顯示了與高血壓腎病病情相關(guān)的其他常見臨床生化指標。尿素氮(BUN)、尿轉(zhuǎn)鐵蛋白(Tf)、血肌酐(Scr)、胱抑素C(CysC)與患者受試過程中的腎功能密切相關(guān);超敏C 反應蛋白(hsCRP)主要與患者體內(nèi)是否存在炎癥與應激情況有關(guān)。

表1 隨訪前后GFR(ml/min/1.73 m2)水平比較Tab.1 Comparison of GFR(ml/min/1.73 m2)at baseline and follow-up

表2 隨訪前后各組患者血尿NGAL 水平(μg/L)Tab.2 NGAL(μg/L)at baseline and follow-up

表3 其他相關(guān)臨床指標隨訪前后比較Tab.3 Comparisons of other clinical parameters at baseline and after follow-up

表4 NGAL 與其他臨床指標的相關(guān)性比價Tab.4 Correlation between NGAL and other clinical parameters

各指標在隨訪前后無明顯差別。hsCRP 在各組中變化不明顯，其余各腎功能相關(guān)指標在B、C 組明顯高于A、D 組。

2.4 相關(guān)分析 表4 顯示，尿NGAL 與臨床其他腎病指標密切相關(guān)，血NGAL 與其他指標相關(guān)性較弱，與CsyC 負相關(guān)。尿NGAL 與GFR 負相關(guān)，與BUN，CysC 正相關(guān)。隨訪前后結(jié)果一致。

3 討論

中性粒細胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白(NGAL)存在于中性粒細胞中的過氧化物酶陰性顆粒中，在人體組織中(腎臟、胰腺、呼吸道、消化道等)廣泛分布。已有相關(guān)文獻表明，在腎病綜合征、急性腎損傷、系統(tǒng)性紅斑狼瘡腎病、糖尿病腎病患者的早期過程中檢測出尿NGAL 蛋白明顯高于正常對照組，提示尿NGAL 蛋白的升高對腎臟早期損傷的監(jiān)測具有重要的意義。

NGAL 除與上訴腎臟疾病關(guān)系密切外，本研究發(fā)現(xiàn)，在高血壓腎病中，血尿NGAL 水平明顯變化明顯，血NGAL 水平低于正常對照組，尿NGAL 水平高于對照組，且在蛋白尿期表現(xiàn)更為明顯，與腎小球濾過率密切相關(guān)。尿NGAL 與血NGAL 水平相比，變化更為明顯，與臨床腎病的其他指標關(guān)聯(lián)性強。與GFR、BUN、CysC 均關(guān)系密切。所以我們認為在高血壓腎病的早期指標中，尿NGAL 是一個敏感較好的指標。

高血壓腎病在發(fā)病早期屬于可逆性疾病，在隨訪的一年時間里，病人定期監(jiān)測血壓，血壓情況控制良好，有一部分隨訪前表現(xiàn)為蛋白尿的病人在隨訪一年后檢測為無蛋白尿，屬病情好轉(zhuǎn)的情況。也提示在慢性病控制中堅持隨訪，形成良好的飲食和健康生活方式，嚴格控制血壓的重要性。但是本研究病人例數(shù)還有所局限，在進一步的研究中，我們會增加例數(shù)，以求得出更為準確的數(shù)據(jù)信息。

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