潘嘉，崔紅梅，于婭，黎萬壽

·藥理毒理·

菊參的急性毒性和常壓耐缺氧實驗研究

潘嘉1，崔紅梅1，于婭2，黎萬壽1

目的：研究菊參提取物的毒性及其對小鼠常壓耐缺氧的影響，確定菊參提取物作用的物質(zhì)基礎(chǔ)。方法：根據(jù)文獻方法測定菊參提取物最大耐受量；根據(jù)文獻采用小鼠常壓耐缺氧實驗方法研究菊參提取物對小鼠在常壓缺氧條件下的生存時間。結(jié)果：菊參提取物最大耐受量倍數(shù)為1962倍；菊參提取物大劑量組小鼠生存平均時間為36.20 min。與模型組比較有顯著性差異（P＜0.05）。結(jié)論：菊參根提取物最大耐受量遠遠超過人用量的100倍，為一非常安全的藥物；菊參提取物可延長小鼠在常壓缺氧條件下的生存時間，具有一定的抗疲勞作用。

菊參；最大耐受量；耐缺氧

菊參，別名家種人參、土人參，菊科婆羅門參屬植物蒜葉婆羅門參Tragopogon Porrifolius L．的根，是近年來阿壩藏族自治區(qū)發(fā)現(xiàn)的與人參藥效相似的民族中藥，具有鎮(zhèn)靜、催眠、止咳、鎮(zhèn)痛、祛痰等功效[1～2]，而且民間認為該品有滋補強壯、安神益智的功效[3]。為驗證其作用，本文以小鼠為對象測定菊參根的急性毒性，并對小鼠進行耐缺氧實驗研究，為本藥的臨床用藥提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 藥物提取 菊參根切碎，用80%甲醇冷浸提取，合并提取液，減壓回收溶劑得浸膏，加水溶解后用乙醚萃取，收集水溶液，減壓去乙醚，用水飽和的正丁醇萃取。大孔樹脂洗脫，洗脫液濃縮凍干，經(jīng)HPLC純化后得單體。

1.1.2 藥品 菊參由四川省中醫(yī)藥科學(xué)院中藥資源與種植研究所提供；對照藥品西洋參含片，常州格藍生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)，批號20100621。

1.1.3 實驗動物 KM小鼠84只，♀♂各半，18～22 g，由四川省中醫(yī)藥科學(xué)院實驗動物中心提供，生產(chǎn)許可證號 SCXK（川）2008-19。

1.2 方法

1.2.1 最大耐受量測定[4]經(jīng)預(yù)試，給予菊參提取物最大給藥量后無動物死亡及其它中毒情況，故按照最大耐受量實驗方法測定了該藥的最大耐受量。

灌胃小鼠20只，雌雄各半，給藥量0.4 mL／10 g（相當(dāng)于3.27 g原生藥/10 g體重），1 d給藥1次，給藥后立即觀察小鼠的以下情況：神經(jīng)系統(tǒng)：(1)行為及反應(yīng)(包括不正常叫聲、煩躁、不安等)；(2)運動(包括肌肉抽搐、僵硬、強迫運動等)；(3)瞳孔及分泌物(瞳孔有無縮小或放大、流淚等)。呼吸及心血管系統(tǒng)：呼吸急促或過緩、鼻分泌，觸心前區(qū)心率快慢等。消化系統(tǒng)：腹部脹氣或收縮、大便堅硬或濕等。泌尿生殖系統(tǒng)：陰唇、乳腺腫脹、會陰部骯臟。皮膚和毛：顏色、完整性、有否充血、發(fā)疹等。其它：眼瞼下垂、眼球突出、震顫等。觀察9天，每天稱體重和食量。

1.2.2 常壓耐缺氧實驗[5]小鼠按體重隨機分為5組，菊參根提取物分為小、中、大受試劑量組（分別為0.98 、1.96 、3.92 g．kg-1，）模型對照組，西洋參含片對照組（0.45 g．kg-1），各受試組分別灌服相應(yīng)藥物，連續(xù)8天；于給藥后第8天，每組小鼠在給藥后30分鐘放入有10 g鈉石灰的250毫升的廣口瓶中，立即蓋上瓶蓋記時，直至小鼠停止呼吸。記錄小鼠在廣口瓶中的生存時間。

2 結(jié)果

2.1 最大耐受量實驗

給藥后，連續(xù)觀察9 d，小鼠未出現(xiàn)死亡情況。日常活動正常。未出現(xiàn)明顯的中毒現(xiàn)象。處死后解剖觀察其心、肝、脾、肺、腎等，均無特殊改變。

根據(jù)菊參臨床用藥劑量計算最大耐受量倍數(shù)：

[每只小鼠的耐受量/小鼠平均體重（20 g）]×[成人平均體重（60 kg）/成人每日用量]（倍）=（6.54/20 g）×（60000 g/10 g）=1962（倍）

2.2 常壓耐缺氧實驗

菊參根提取物對小鼠常壓耐缺氧作用實驗結(jié)果見下表。與對照組相比，菊參根提取物組的小鼠在缺氧條件下存活的時間更長，且菊參根提取物劑量越大，小鼠的存活時間更長?？梢娋諈⒏崛∥锟裳娱L缺氧小鼠的存活時間，且呈現(xiàn)一定的效量關(guān)系，結(jié)果見表1。

表1 菊參根對小鼠常壓耐缺氧作用的影響（）

表1 菊參根對小鼠常壓耐缺氧作用的影響（）

注：與模型組比較，*P＜0．05，**P＜0．01

組別 劑量（g/kg.d） 動物數(shù) 存活時間（min）模型對照 - 12 30.98±6.27西洋參含片 0.45 12 39.69±3.87**菊參根小劑量 0.98 12 28.22±4.67菊參根中劑量 1.96 12 33.31±3.25菊參根大劑量 3.92 12 36.20±4.07*

3 討論

本課題組通過實驗，證明菊參提取物對小鼠無毒副作用，可見本藥是一味比較安全的中藥。通過小鼠的常壓耐缺氧實驗顯示，與對照組比較，菊參提取物組可延長小鼠在常壓缺氧條件下的存活時間，且隨著劑量增加，小鼠的存活時間延長，呈現(xiàn)一定的效量關(guān)系，說明菊參提取物具有一定的抗缺氧功效。菊參和名貴中藥人參的藥效相似，據(jù)報道該植物具有“類人參樣”作用，而無人參樣副作用[6]，本實驗結(jié)果亦證實菊參根確有強壯作用，且毒副作用非常小，因此具有良好的開發(fā)應(yīng)用前景。

[1] 龍翔儒,田江明.蒜葉婆羅門參的藥理研究[J].中國中藥雜志,1986,(2):7.

[2] 王化遠,楊培全,鄒肇娥,等.民族藥菊參化學(xué)成分研究[J].華西藥學(xué)雜志,1991,6(4):205.

[3] 龍祥儒,田江明.蒜葉婆羅門參抗疲勞和耐缺氧作用的研究[J].中國中藥雜志,1990,(12):37.

[4] 陳奇.中藥藥理研究方法學(xué)[M].第1版.北京:人民衛(wèi)生出版社,1993:118.

[5] 陳奇.中藥藥理研究方法學(xué)[M].第1版.北京:人民衛(wèi)生出版社,1993:714.

[6] 謝居樂,陳菊芳.對菊參抗疲勞耐缺氧作用的研究[J].中國藥房,1995,6(2):10.

（責(zé)任編輯：陳思敏）

Experimental study of acute toxicity and hypoxia tolerance of Jushen

PAN Jia1, CUI Hong-mei1, YU Ya2, LI Wan-shou1// (1. Sichuan Academy of Chinese Medicine Sciences, Chengdu 610041; 2. Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, Chengdu 610075)

Objective:To study toxicity of Jushen extract and its effect on lifetime of mice under hypoxic condition.Method:The maximum tolerated dose of Jushen extract was tested according to the literature. The effect of Jushen extract on lifetime of mice under hypoxic conditions was studied according to the literature.Result:The maximum tolerance dosage of Jushen extract was 1962 times of dosage used in human. The average time of lifetime in the maximum dose group was 36.20 min which showed a signifcant difference between model group and control group (P＜0.05).Conclusion:The maximum tolerance dosage of Jushen extract is far more than 100 times of the dosage amount in human. The result shows that it is a very safe traditional Chinese medicine. Jushen extract can extend the lifetime of mice under hypoxic conditions which shows it has anti-fatigue effect.

Jushen；maximum tolerated dose；anti- hypoxia.

R 285.5

A

1674-926X(2014)04-009-02

四川省中醫(yī)藥管理局基本科研業(yè)務(wù)專項課題(A-2009N-17)

1. 四川省中醫(yī)藥科學(xué)院藥理毒理研究所，四川 成都 610041； 2.成都中醫(yī)藥大學(xué)，四川 成都 610075

潘嘉 Email:panjia028@163.com

2014-05-05