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        融水縣家畜布魯氏菌病血清學(xué)調(diào)查

        2014-03-06 20:26:46覃超林
        養(yǎng)殖與飼料 2014年8期
        關(guān)鍵詞:布病布魯氏菌家畜

        覃超林

        廣西壯族自治區(qū)融水縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,廣西融水 545300

        融水縣家畜布魯氏菌病血清學(xué)調(diào)查

        覃超林

        廣西壯族自治區(qū)融水縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,廣西融水 545300

        為進(jìn)一步了解融水縣家畜布魯氏菌病防控成果,全面了解融水縣家畜布魯氏菌病的流行病學(xué)情況,2013年,筆者采用虎紅平板凝集試驗(yàn)和試管凝集試驗(yàn)法對(duì)轄區(qū)內(nèi)20個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)的豬100份、牛100份、羊75份血清進(jìn)行了檢測。結(jié)果發(fā)現(xiàn):采用虎紅平板凝集試驗(yàn)法檢測的275份血清檢出15份陽性(其中豬5份、牛5份、羊5份,且均來自同一個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)),其余260份血清均為陰性;但采用試管凝集試驗(yàn)法對(duì)虎紅平板凝集試驗(yàn)陽性的20份樣品進(jìn)行檢測,結(jié)果均為陰性。

        布魯氏菌??;家畜;血清流行病學(xué);調(diào)查;融水縣

        布魯氏菌病(也稱布氏桿菌病,以下簡稱布?。┦怯刹剪斒暇鸬囊愿腥炯倚鬄橹鞯娜双F共患傳染病。家畜中以牛、羊、豬最常發(fā)生,感染家畜以流產(chǎn)、不孕、睪丸炎等為特征。融水縣自1971年發(fā)現(xiàn)豬布病后,在各級(jí)政府的領(lǐng)導(dǎo)和各級(jí)業(yè)務(wù)部門的支持協(xié)助下,嚴(yán)格按照布病防制程序,采取了“檢、宰、切、健”四大措施,經(jīng)過多年的努力,1992年11月順利通過自治區(qū)布病考核驗(yàn)收小組的考核驗(yàn)收,達(dá)到穩(wěn)定控制縣的標(biāo)準(zhǔn)。

        控制家畜布病是一項(xiàng)關(guān)系到人民群眾身體健康和畜牧業(yè)發(fā)展的艱巨而長期的任務(wù)。為進(jìn)一步了解融水縣家畜布病防控成果,全面了解融水縣家畜布病的流行病學(xué)情況,2013年1~12月,筆者對(duì)轄區(qū)內(nèi)20個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)的豬100份、牛100份、羊75份血清進(jìn)行了檢測?,F(xiàn)將調(diào)查情況報(bào)告如下。

        1 材料與方法

        1.1 試驗(yàn)材料

        1)被檢血清。20個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn),每個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)隨機(jī)抽取未免疫布病疫苗的豬5份、黃/水牛5份、羊5份血清,全縣共采集豬100份、黃/水牛100份、羊75份血清(部分鄉(xiāng)鎮(zhèn)無存欄羊,未采樣),并保存于-20℃待檢。

        2)診斷液。布魯氏菌病標(biāo)準(zhǔn)陽性血清、陰性血清,布魯氏菌病虎紅平板凝集抗原,及布魯氏菌病試管凝集抗原均購自青島易邦生物工程有限公司。

        1.2 檢測方法及判定標(biāo)準(zhǔn)

        1)虎紅平板凝集試驗(yàn)。先取陽性血清、陰性血清和稀釋液各30 μL分別置于潔凈玻璃片上,各加布病虎紅平板凝集抗原懸液30 μL,攪拌混勻?yàn)橹睆酱笮? cm,然后搖動(dòng)1~2 min,于4 min內(nèi)在黑色背景下觀察結(jié)果。當(dāng)陰性血清對(duì)照不凝集(-),陽性血清對(duì)照出現(xiàn)凝集(+)時(shí),陰陽性血清對(duì)照試驗(yàn)成立,方可對(duì)被檢血清進(jìn)行判定。被檢血清的檢測與陰陽性血清檢測方法相同,重復(fù)上述操作并觀察記錄結(jié)果。

        結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn):根據(jù)凝集反應(yīng)強(qiáng)度判讀?!?+++”,凝集塊呈菌叢狀,凝塊間液體明顯清亮;“+++”,凝集反應(yīng)較強(qiáng);“++”,形成較明顯卷邊,凝集塊間液體稍清亮;“+”,稍有凝集,稍有卷邊形成,凝集物間液體呈紅色;“-”,無凝集,呈均勻粉紅色。以4 min內(nèi)出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象判為陽性(+);無凝集現(xiàn)象,呈均勻粉紅色者判為陰性(-)。對(duì)出現(xiàn)陽性反應(yīng)的需作試管凝集試驗(yàn)檢測。

        2)試管凝集試驗(yàn)??乖?:20稀釋,被檢豬和羊的血清分別作1:25、1:50、1:100、1:200稀釋,被檢牛血清分別作1:50、1:100、1:200和1:400稀釋,同時(shí)設(shè)陰、陽性血清對(duì)照(陰性血清的稀釋和加抗原的方法與被檢血清相同,陽性血清需稀釋到原有滴度,加抗原的方法與受檢血清相同)。將0.5 mL稀釋后的抗原加入已稀釋好的各血清管中,并振搖均勻,置36~37℃作用24 h,取出觀察并記錄結(jié)果。

        結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn):按各試管上層液體清亮度判讀?!?+++”,菌體完全凝集,100%下沉,上層液體100%清亮;“+++”,菌體幾乎完全凝集,上層液體75%清亮;“++”,菌體凝集顯著,液體50%清亮;“+”,凝集物有沉淀,液體25%清亮;“-”,凝集物無沉淀,液體均勻渾濁。以產(chǎn)生50%凝集(++)的血清最大稀釋度為受檢血清的效價(jià)。牛待檢血清的凝集價(jià)在1:100(++)以上者為陽性,1:50(++)為可疑;羊、豬待檢血清的凝集價(jià)在1:50(++)以上為陽性,1:25(++)為可疑。對(duì)試驗(yàn)結(jié)果為“可疑”的,應(yīng)在3~4周后重新采血檢驗(yàn),以進(jìn)一步確定檢測結(jié)果。

        2 結(jié)果與分析

        1)采用虎紅平板凝集試驗(yàn)法對(duì)所有血清進(jìn)行初篩,發(fā)現(xiàn)275份血清檢出15份陽性(其中豬5份、牛5份、羊5份,且均來自同一個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)),其余260份血清均為陰性。

        2)采用試管凝集試驗(yàn)法對(duì)虎紅平板凝集試驗(yàn)陽性的20份樣品進(jìn)行檢測,結(jié)果均為陰性。

        3討 論

        1)本次布病血清學(xué)調(diào)查中,采用虎紅平板凝集試驗(yàn)和試管凝集試驗(yàn)法對(duì)融水縣20個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)的豬100份、牛100份、羊75份血清進(jìn)行抗體檢測,檢出陽性率為0%。本次所調(diào)查的家畜均未免疫過布病疫苗,檢測結(jié)果表明所檢測的豬、牛、羊不存在自然感染布病野毒情況,說明融水縣在過去這些年家畜布病的防控工作還是扎實(shí)、穩(wěn)定、有保障的。

        2)而對(duì)于布病虎紅平板凝集試驗(yàn)中檢出陽性的樣品為何出現(xiàn)在同一個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)的原因,筆者經(jīng)過分析,懷疑采樣材料有問題。經(jīng)證實(shí),是因該鄉(xiāng)鎮(zhèn)在采樣時(shí)由于一次性PE注射器不足,臨時(shí)用了該鄉(xiāng)衛(wèi)生院的十幾支真空采血管,且這些真空采血管內(nèi)含帶肝素鈉。而抗凝劑可造成布病虎紅平板凝集試驗(yàn)的假陽性結(jié)果[1]。

        3)布病的傳播流行影響著畜牧業(yè)的可持續(xù)發(fā)展和人類的身體健康,布病預(yù)防和控制工作任重而道遠(yuǎn)。在融水縣的這次調(diào)查中也發(fā)現(xiàn)了一些問題,如:多數(shù)養(yǎng)戶文化水平低,對(duì)布病了解甚少,不了解布病的傳播途徑和相關(guān)防護(hù)知識(shí)。因此,加強(qiáng)布病防治宣傳、增強(qiáng)自我保護(hù)意識(shí)、積極采取防控措施,將是融水縣未來布病防控工作的重點(diǎn)之一。

        融水縣為布病的老疫區(qū),雖然多年前已經(jīng)通過了自治區(qū)家畜布病控制工作的驗(yàn)收,但我們?nèi)圆荒艿粢暂p心,還應(yīng)該嚴(yán)格實(shí)行檢疫制度,對(duì)新引進(jìn)種用家畜進(jìn)行檢疫,以免造成病原從外地流入?!俺R?guī)監(jiān)測+種畜場重點(diǎn)監(jiān)測、定時(shí)+定點(diǎn)監(jiān)測”,可以做到早發(fā)現(xiàn)、早處置,全面掌握疫情動(dòng)態(tài),為布病防控提供依據(jù),把布病的發(fā)生和傳播控制在源頭。

        [1]蒙文娟.抗凝劑對(duì)布氏桿菌病檢測結(jié)果的影響[J].養(yǎng)殖與飼料,2014(7):10-11.

        2014-05-28

        覃超林,男,1984年生。

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