周素英+陳國(guó)榮+馮國(guó)飛+潘丹+張品南+楊小敏+夏作利

[摘要] 目的 探討宮頸癌中EGFR及VEGF的表達(dá)與宮頸癌的關(guān)系及其相關(guān)性。方法 采用免疫組化EnVision法檢測(cè)80例宮頸癌組織芯片中EGFR和VEGF的表達(dá)，分析其與宮頸癌臨床病理特征的關(guān)系及其間相關(guān)性。結(jié)果 宮頸癌中的EGFR和VEGF陽性表達(dá)率分別為94.8%、79.1%，癌旁組織中的表達(dá)率分別為15%、20%。兩者在兩種組織中的表達(dá)有顯著差異（P<0.01）。EGFR表達(dá)與腫瘤大小、組織類型、病理分級(jí)、浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期有關(guān)（P<0.05）；VEGF與腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期有關(guān)（P<0.05）；EGFR和VEGF表達(dá)兩者之間有顯著性相關(guān)性（r=0.2548，P<0.05）。結(jié)論 EGFR和VEGF高表達(dá)與宮頸癌的生長(zhǎng)、浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移及預(yù)后有相關(guān)性，兩者在宮頸癌的發(fā)展中可能存在協(xié)同作用。

[關(guān)鍵詞] 宮頸癌；EGFR；VEGF；免疫組織化學(xué)；組織芯片；靶向治療

[中圖分類號(hào)] R737.33 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 1673-9701（2014）02-0068-04

Expression and correlation of EGFR and VEGF in cervical carcinoma

ZHOU Suying1 CHEN Guorong2 FENG Guofei1 PAN Dan1 ZHANG Pinnan1 YANG Xiaomin1 XIA Zuoli1

1.Department of Pathology， the Peoples Hospital of Wenzhou City in Zhejiang Province， Wenzhou 325200， China；

2.Department of Pathology， the First Affiliated Hospital of Wenzhou Medical College， Wenzhou 325000， China

[Abstract] Objective To study the relationship between the expressions of EGFR， VEGF in cervical carcinoma and to observe the correlation between EGFR and VEGF in them. Methods The expressions of EGFR and VEGF were studied by immunohistochemical EnVision in tissue microarray containing 80 cervical carcinoma tissues and the corresponding adjacent tissues. The relationship between EGFR and VEGF expression and the chinicopathological features was analyzed. Results The positive rates of EGFR and VEGF were 94.8% and 79.1% respectively in cervical carcinoma. However they were 15% and 20% respectively in the corresponding adjacent tissues. Expressions of EGFR and VEGF proteins were significantly higher in cervical carcinoma than those in adjacent tissues （P<0.01）. The overexpression of EGFR was found significantly associated with the tumer size，tissue type，differentiation degree， knubbly invasive depth，lymphnode metastasis and clinical stage（P<0.05）. That of VEGF found significantly associated with the tumer size，lymphnode metastasis and clinical stage （P<0.05）. Besides， the overexpression of EGFR was correlated with the overexpression of VEGF （r=0.2548， P<0.05）. Conclusion The overexpression of EGFR and VEGF in cervical carcinoma are closely correlated with the growth， invasion and metastasis， prognosis， and maybe have synergistic effect in development of cervical carcinoma.

[Key words] Cervical carcinoma； Epidermal growth factor receptor（EGFR）； Vascular endothelial growth factor（VEGF）； Immunohistochemistry； Tissue microarray； Targeted therapy

宮頸癌是發(fā)生在全球女性中第二大常見的惡性腫瘤[1]，其發(fā)病率有逐年上升且發(fā)病年輕化的趨勢(shì)。表皮生長(zhǎng)因子受體 （epidermal growth factor receptor，EGFR）是宮頸癌發(fā)生發(fā)展的重要因素，它與相應(yīng)的配體結(jié)合后，形成同源二聚體或異源二聚體，使受體的酪氨酸激酶，啟動(dòng)一系列調(diào)節(jié)細(xì)胞各方面功能的下游信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，包括細(xì)胞增殖、凋亡、血管發(fā)生、吸附和運(yùn)動(dòng)性，在癌組織中，這些通路調(diào)節(jié)障礙，可致使細(xì)胞過度增殖、轉(zhuǎn)移和耐藥[2]。endprint

血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）是目前發(fā)現(xiàn)的最重要的促血管生長(zhǎng)因子，有促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞分化、增生、遷移和浸潤(rùn)的作用[3]，在多種腫瘤中VEGF的表達(dá)增高，并且其水平的高低與腫瘤的某些生物學(xué)行為有密切關(guān)系。本文對(duì)構(gòu)建含有80例宮頸癌和癌旁組織標(biāo)本的組織芯片進(jìn)行免疫組化EnVision法檢測(cè)EGFR、VEGF的表達(dá)，以探討宮頸癌發(fā)生發(fā)展中EGFR、VEGF表達(dá)與宮頸癌臨床病理特征的關(guān)系和相關(guān)性，尋找宮頸癌抗腫瘤治療的靶點(diǎn)。

1資料與方法

1.1臨床資料

隨機(jī)選擇溫州市人民醫(yī)院病理科2003～2009年間80例宮頸癌根治術(shù)石蠟包埋組織蠟塊。包括鱗癌、腺鱗癌、腺癌，患者年齡 31～72歲。切4 μm切片1張，HE染色后，在蠟塊上選取癌組織區(qū)域，采用手術(shù)組織芯片制備儀，制備成陣列分別為6×4，7×4，7×4，3個(gè)組織芯片蠟塊。另取癌旁組織20例作為對(duì)照，宮頸癌病理分級(jí)按WHO分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)。臨床分期按FIGO的標(biāo)準(zhǔn)。

1.2方法

組織芯片上免疫組化采用EnVision二步法，DAB顯色。鼠單抗EGFR檢測(cè)試劑盒購自北京中山生物技術(shù)有限公司，鼠抗人VEGF單克隆抗體購自福州邁新生物技術(shù)開發(fā)公司。石蠟切片脫蠟，梯度酒精水化，4%過氧化氫阻斷內(nèi)源性過氧化物酶活性，按各檢測(cè)物試劑盒說明書進(jìn)行，蘇木素復(fù)染，中性樹膠封固，鏡下觀察結(jié)果，記錄并拍照。以已知陽性片為陽性對(duì)照，用磷酸鹽緩沖液（PBS）代替一抗為陰性對(duì)照。2人雙盲法觀察切片，選取至少5個(gè)具有代表性高倍視野（細(xì)胞數(shù)不少于1000個(gè)），對(duì)免疫組化結(jié)果進(jìn)行評(píng)估。

1.3結(jié)果判斷

EGFR表達(dá)物定位于細(xì)胞漿或細(xì)胞膜，以膜著色為主，呈棕黃色；VEGF主要定位于細(xì)胞漿，呈棕黃色；鏡下根據(jù)顯色強(qiáng)度和陽性細(xì)胞百分率，采用半定量積分法判斷結(jié)果：基本不著色為0分，著色淺為1分，著色適中為2分，著色深為3分，每張切片陽性細(xì)胞占≤5%為0分，6%～25%為1分，26%～50%為2分，51%～75%為3分，>75%為4分；兩者積分相乘，陰性≤1分，弱陽性2～4分，強(qiáng)陽性為≥5分。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

以SPSS統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，EGFR和VEGF在宮頸癌與癌旁組織中陽性表達(dá)率的比較及其與臨床病理特征各組間的比較采用χ2檢驗(yàn)；變量間相關(guān)性用Pearson直線相關(guān)分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 EGFR和VEGF在宮頸癌組織及癌旁組織中的表達(dá)

組織芯片經(jīng)HE染色后發(fā)現(xiàn)2例組織點(diǎn)發(fā)生脫片、移位，1例定位有誤，未見腫瘤細(xì)胞，剔除此3例病例組織學(xué)觀察77例。EGFR陽性信號(hào)在宮頸癌組織中主要分布于癌巢中（見圖1）。細(xì)胞漿或細(xì)胞膜著色，著淡黃色、黃色、棕黃色，同一切片中陽性細(xì)胞分布不均，染色范圍及程度不同，癌旁與間質(zhì)表達(dá)淡于癌巢。在鱗癌中，角化區(qū)域淡于非角化區(qū)域。鱗癌表達(dá)強(qiáng)于腺癌及腺鱗癌。20例癌旁組織中，3例偶見弱陽性表達(dá)，表達(dá)位于其基底細(xì)胞層及上層不典型增生細(xì)胞層；77例宮頸癌中，73例表達(dá)陽性，4例陰性，陽性率為94.8%，宮頸癌中EGFR的表達(dá)顯著高于癌旁組織（校正法：χ2=54.998，P<0.01）（見圖2）。

VEGF陽性信號(hào)在宮頸癌中主要分布與癌巢中（見圖1）。細(xì)胞漿著色，呈淡黃色、黃色、棕黃色；癌旁中心區(qū)強(qiáng)于周邊區(qū)，癌旁與間質(zhì)表達(dá)呈陰性或灶區(qū)弱表達(dá)，與癌巢表達(dá)對(duì)比鮮明。同時(shí)癌旁與間質(zhì)內(nèi)可見部分組織細(xì)胞（吞噬細(xì)胞）呈陽性表達(dá)。20例癌旁組織中，4例表達(dá)陽性；宮頸癌中，61例表達(dá)陽性，陽性率為79.1%，宮頸癌中EGFR、VEGF的表達(dá)顯著高于癌旁組織（χ2=25.1871，P<0.01）（見圖2）。

2.2 EGFR及VEGF的表達(dá)與宮頸癌臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系

EGFR在不同年齡、腫瘤大小、組織類型、病理分級(jí)、浸潤(rùn)深度、臨床分期以及有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移各組中的陰性與陽性表達(dá)率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與腫瘤的大小、浸潤(rùn)深度呈正相關(guān)（P<0.05，P< 0.01）；與腫瘤的病理分級(jí)、臨床分期呈負(fù)相關(guān)（P<0.05），在鱗癌中顯著高于非鱗癌中（P< 0.01），有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者顯著高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者（P<0.05），而與年齡無顯著性差異。見表1。

VEGF在腫瘤大小、臨床分期及有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移各組中的陽性、陰性表達(dá)率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與腫瘤的大小呈正相關(guān)（P<0.05）；與腫瘤的臨床分期呈負(fù)相關(guān)，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組顯著高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組（P<0.05，P<0.01）；與年齡、組織類型浸潤(rùn)深度、病理分級(jí)無顯著性差異。

2.3 EGFR和VEGF表達(dá)的相關(guān)性

Pearson直線相關(guān)分析顯示，宮頸癌組織中EGFR和VEGF的表達(dá)呈正相關(guān)（r=0.2548，P<0.05），見表2。

表2 EGFR和VEGF在宮頸癌中表達(dá)的相關(guān)性

注：Pearson列聯(lián)相關(guān)系數(shù) r=0.2548

3 討論

原癌基因cerbB-1（HER-1）的表達(dá)產(chǎn)物—EGFR就位于人染色體7p13-7p12上，屬I型跨膜酪氨酸激酶生長(zhǎng)因子受體，其與配體EGF結(jié)合后可促進(jìn)細(xì)胞的增殖分化并加速細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化[4]。近年研究者越來越關(guān)注遺傳學(xué)分子標(biāo)記與疾病臨床預(yù)后的關(guān)系，這既是在了解該病發(fā)展的分子基礎(chǔ)以達(dá)到準(zhǔn)確地進(jìn)行臨床病理學(xué)診斷的需要，更是選擇有效的分子靶向治療而使疾病得以及時(shí)遏制并最終獲得滿意療效和重要依據(jù)之一[2]。因此，很有必要研究宮頸癌與腫瘤治療重要靶標(biāo)EGFR的關(guān)系。

EGFR強(qiáng)陽性表達(dá)率在鱗癌中顯著高于非鱗癌中，在鱗癌中EGFR在分化差的癌細(xì)胞表達(dá)強(qiáng)，在分化好的癌細(xì)胞表達(dá)弱，這提示EGFR與鱗狀上皮的增殖和分化有關(guān)；在其他臨床病理因素中，EGFR的表達(dá)與宮頸癌腫瘤的大小、病理分級(jí)、浸潤(rùn)深度、臨床分期有顯著性差異，與腫瘤的大小、浸潤(rùn)深度呈正相關(guān)；與腫瘤的病理分級(jí)、臨床分期呈負(fù)相關(guān)；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者顯著高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者；而與年齡無顯著性差異，此結(jié)果與大多數(shù)文獻(xiàn)報(bào)道一致[5]。本研究提示EGFR是參與宮頸癌浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移分子機(jī)制的重要分子，其過度表達(dá)與低分化、高增殖、易轉(zhuǎn)移有關(guān)，可作為制定宮頸癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移傾向及其預(yù)后的一個(gè)有效指標(biāo)。此外，我們發(fā)現(xiàn)，在腺癌或腺鱗癌中，EGFR表達(dá)陽性率較鱗癌低，這與Fatima Baltazar等[6]研究結(jié)果相符。但本組腺癌或腺鱗癌例數(shù)較少，其原因有待更多樣本量的研究。endprint

血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）是一種內(nèi)皮細(xì)胞的特異性有絲分裂原，在體外能促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞的生長(zhǎng)，在體內(nèi)可誘導(dǎo)血管發(fā)生[7]。研究表明，VEGF通過VEGFR介導(dǎo)的受體信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖、遷移，阻止內(nèi)皮細(xì)胞凋亡和宮腔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)退化，增加血管滲透性，從而促進(jìn)腫瘤血管生成和腫瘤生長(zhǎng)；并且目前以VEGFR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路為靶點(diǎn)進(jìn)行腫瘤靶向治療已在多種腫瘤取得了實(shí)質(zhì)性的療效[8]。

近年來，穆彥如等[9]、李雯等[10]認(rèn)為VEGF參與宮頸癌變過程，且與腫瘤分化及臨床分期有關(guān)。李淼[3]、宋亞輝等[11]學(xué)者認(rèn)為VEGF與宮頸癌有無淋巴結(jié)有關(guān)，但穆彥如等[9]認(rèn)為它與腫瘤分化、組織學(xué)類型、浸潤(rùn)深度無關(guān)。而宋濤等[12]又認(rèn)為VEGF與組織學(xué)類型有關(guān)，腺癌的表達(dá)率高于鱗癌的表達(dá)率，他們的研究結(jié)果不甚一致。我們通過對(duì)含有80例宮頸癌的組織芯片進(jìn)行研究，觀察有效對(duì)象77例，結(jié)果顯示：VEGF在宮頸癌中的陽性表達(dá)率為79.1%，且腫瘤周邊區(qū)域的VEGF表達(dá)水平較中央?yún)^(qū)域低，這與文獻(xiàn)[3]結(jié)果相近。結(jié)果表明宮頸癌中VEGF呈過表達(dá)，并且與腫瘤的大小、臨床分期及有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，與年齡病理分級(jí)、浸潤(rùn)深度、組織學(xué)類型無關(guān)。與腫瘤的大小，臨床分期有關(guān)，與浸潤(rùn)深度無關(guān)，這與穆彥如等[9]、李雯等[10]的觀點(diǎn)是一致的；與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，這與文獻(xiàn)[3，11]的報(bào)道是吻合的，說明VEGF過表達(dá)者，惡性程度較高，易發(fā)生盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，提示腫瘤組織中VEGF水平在一定程度上反映腫瘤的局部浸潤(rùn)活性和轉(zhuǎn)移潛能，與腫瘤的轉(zhuǎn)移分期臨床及預(yù)后密切相關(guān)。因此，對(duì)VEGF表達(dá)較高者，術(shù)中要警惕淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和癌細(xì)胞浸潤(rùn)可能。但本研究不支持與腫瘤分化有關(guān)，這與李雯等[10]的觀點(diǎn)不同，這尚需進(jìn)一步探索。此外，我們發(fā)現(xiàn)在腫瘤間質(zhì)中有些組織細(xì)胞呈陽性表達(dá)，這與VEGF已知的生物學(xué)理論相符，VEGF是腫瘤細(xì)胞、腫瘤侵入的巨噬細(xì)胞和肥大細(xì)胞所分泌的，以旁分泌的形式，刺激腫瘤內(nèi)皮細(xì)胞，誘導(dǎo)血管形成，促進(jìn)腫瘤持續(xù)生長(zhǎng)，并提高血管通透性[9]。

同時(shí)，我們分析了EGFR與VEGF在本組宮頸癌中表達(dá)的相關(guān)關(guān)系，結(jié)果發(fā)現(xiàn)隨著EGFR增加，VEGF也不同程度增加，兩者的表達(dá)呈正相關(guān)，提示它們對(duì)宮頸癌有正效應(yīng)作用，有聯(lián)合表達(dá)，它們表達(dá)越高，宮頸癌的侵襲轉(zhuǎn)移功能越大，預(yù)后越差。以上研究結(jié)果支持EGFR已知的生物學(xué)理論[13]，它依賴的下游信號(hào)轉(zhuǎn)移通路激活，可以促進(jìn)細(xì)胞增殖、抑制細(xì)胞凋亡和分化，并增加VEGF的表達(dá)水平，繼而促進(jìn)新生血管形成、有利于腫瘤侵襲和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。Ciardiello等[14]也發(fā)現(xiàn)EGFR能通過刺激腫瘤細(xì)胞分泌VEGF來誘導(dǎo)血管生成。二者聯(lián)合表達(dá)預(yù)示更高的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率和更具有侵襲性的生物學(xué)行為。

EGFR和VEGF有著共同的信號(hào)傳導(dǎo)途徑，他們直接或間接作用于腫瘤細(xì)胞，EGFR是有關(guān)血管發(fā)生的受體，在腫瘤血管形成過程中的表皮細(xì)胞中表達(dá)[15]。本組研究表明在宮頸癌中二者均過表達(dá)，且呈正相關(guān)，與宮頸癌的TNM分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，具有協(xié)同效應(yīng)，存在聯(lián)合表達(dá)。聯(lián)合應(yīng)用EGFR阻斷劑和VEGF抑制劑分子靶向治療可能帶來更多效應(yīng)。這預(yù)示著在宮頸癌中，以EGFR為靶點(diǎn)的靶向治療與以VEGF為靶點(diǎn)的抗血管生成療法聯(lián)合應(yīng)用的可行性具有理論依據(jù)。

綜上所述，EGFR是參與宮頸癌浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移分子機(jī)制的重要分子，其過度表達(dá)與低分化、高增殖、易轉(zhuǎn)移有關(guān)；VEGF與宮頸癌的生長(zhǎng)、浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移、預(yù)后有關(guān)；它們?cè)趯m頸癌的表達(dá)呈正相關(guān)，且具有協(xié)同效應(yīng)。通過對(duì)宮頸癌的活檢或根治標(biāo)本組織進(jìn)行EGFR和VEGF表達(dá)的病理檢測(cè)，指導(dǎo)臨床以兩者為靶點(diǎn)聯(lián)合靶向用藥能成為意義深遠(yuǎn)的治療宮頸癌的新方法，值得推廣。

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（收稿日期：2013-03-19）endprint

血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）是一種內(nèi)皮細(xì)胞的特異性有絲分裂原，在體外能促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞的生長(zhǎng)，在體內(nèi)可誘導(dǎo)血管發(fā)生[7]。研究表明，VEGF通過VEGFR介導(dǎo)的受體信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖、遷移，阻止內(nèi)皮細(xì)胞凋亡和宮腔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)退化，增加血管滲透性，從而促進(jìn)腫瘤血管生成和腫瘤生長(zhǎng)；并且目前以VEGFR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路為靶點(diǎn)進(jìn)行腫瘤靶向治療已在多種腫瘤取得了實(shí)質(zhì)性的療效[8]。

近年來，穆彥如等[9]、李雯等[10]認(rèn)為VEGF參與宮頸癌變過程，且與腫瘤分化及臨床分期有關(guān)。李淼[3]、宋亞輝等[11]學(xué)者認(rèn)為VEGF與宮頸癌有無淋巴結(jié)有關(guān)，但穆彥如等[9]認(rèn)為它與腫瘤分化、組織學(xué)類型、浸潤(rùn)深度無關(guān)。而宋濤等[12]又認(rèn)為VEGF與組織學(xué)類型有關(guān)，腺癌的表達(dá)率高于鱗癌的表達(dá)率，他們的研究結(jié)果不甚一致。我們通過對(duì)含有80例宮頸癌的組織芯片進(jìn)行研究，觀察有效對(duì)象77例，結(jié)果顯示：VEGF在宮頸癌中的陽性表達(dá)率為79.1%，且腫瘤周邊區(qū)域的VEGF表達(dá)水平較中央?yún)^(qū)域低，這與文獻(xiàn)[3]結(jié)果相近。結(jié)果表明宮頸癌中VEGF呈過表達(dá)，并且與腫瘤的大小、臨床分期及有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，與年齡病理分級(jí)、浸潤(rùn)深度、組織學(xué)類型無關(guān)。與腫瘤的大小，臨床分期有關(guān)，與浸潤(rùn)深度無關(guān)，這與穆彥如等[9]、李雯等[10]的觀點(diǎn)是一致的；與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，這與文獻(xiàn)[3，11]的報(bào)道是吻合的，說明VEGF過表達(dá)者，惡性程度較高，易發(fā)生盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，提示腫瘤組織中VEGF水平在一定程度上反映腫瘤的局部浸潤(rùn)活性和轉(zhuǎn)移潛能，與腫瘤的轉(zhuǎn)移分期臨床及預(yù)后密切相關(guān)。因此，對(duì)VEGF表達(dá)較高者，術(shù)中要警惕淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和癌細(xì)胞浸潤(rùn)可能。但本研究不支持與腫瘤分化有關(guān)，這與李雯等[10]的觀點(diǎn)不同，這尚需進(jìn)一步探索。此外，我們發(fā)現(xiàn)在腫瘤間質(zhì)中有些組織細(xì)胞呈陽性表達(dá)，這與VEGF已知的生物學(xué)理論相符，VEGF是腫瘤細(xì)胞、腫瘤侵入的巨噬細(xì)胞和肥大細(xì)胞所分泌的，以旁分泌的形式，刺激腫瘤內(nèi)皮細(xì)胞，誘導(dǎo)血管形成，促進(jìn)腫瘤持續(xù)生長(zhǎng)，并提高血管通透性[9]。

同時(shí)，我們分析了EGFR與VEGF在本組宮頸癌中表達(dá)的相關(guān)關(guān)系，結(jié)果發(fā)現(xiàn)隨著EGFR增加，VEGF也不同程度增加，兩者的表達(dá)呈正相關(guān)，提示它們對(duì)宮頸癌有正效應(yīng)作用，有聯(lián)合表達(dá)，它們表達(dá)越高，宮頸癌的侵襲轉(zhuǎn)移功能越大，預(yù)后越差。以上研究結(jié)果支持EGFR已知的生物學(xué)理論[13]，它依賴的下游信號(hào)轉(zhuǎn)移通路激活，可以促進(jìn)細(xì)胞增殖、抑制細(xì)胞凋亡和分化，并增加VEGF的表達(dá)水平，繼而促進(jìn)新生血管形成、有利于腫瘤侵襲和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。Ciardiello等[14]也發(fā)現(xiàn)EGFR能通過刺激腫瘤細(xì)胞分泌VEGF來誘導(dǎo)血管生成。二者聯(lián)合表達(dá)預(yù)示更高的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率和更具有侵襲性的生物學(xué)行為。

EGFR和VEGF有著共同的信號(hào)傳導(dǎo)途徑，他們直接或間接作用于腫瘤細(xì)胞，EGFR是有關(guān)血管發(fā)生的受體，在腫瘤血管形成過程中的表皮細(xì)胞中表達(dá)[15]。本組研究表明在宮頸癌中二者均過表達(dá)，且呈正相關(guān)，與宮頸癌的TNM分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，具有協(xié)同效應(yīng)，存在聯(lián)合表達(dá)。聯(lián)合應(yīng)用EGFR阻斷劑和VEGF抑制劑分子靶向治療可能帶來更多效應(yīng)。這預(yù)示著在宮頸癌中，以EGFR為靶點(diǎn)的靶向治療與以VEGF為靶點(diǎn)的抗血管生成療法聯(lián)合應(yīng)用的可行性具有理論依據(jù)。

綜上所述，EGFR是參與宮頸癌浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移分子機(jī)制的重要分子，其過度表達(dá)與低分化、高增殖、易轉(zhuǎn)移有關(guān)；VEGF與宮頸癌的生長(zhǎng)、浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移、預(yù)后有關(guān)；它們?cè)趯m頸癌的表達(dá)呈正相關(guān)，且具有協(xié)同效應(yīng)。通過對(duì)宮頸癌的活檢或根治標(biāo)本組織進(jìn)行EGFR和VEGF表達(dá)的病理檢測(cè)，指導(dǎo)臨床以兩者為靶點(diǎn)聯(lián)合靶向用藥能成為意義深遠(yuǎn)的治療宮頸癌的新方法，值得推廣。

[參考文獻(xiàn)]

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[3] 李淼，閆風(fēng)彩，錢智，等. 宮頸癌組織中Survivin、Ki-67及VEGF的表達(dá)及相關(guān)性[J]. 現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2011，19（7）：1396-1399.

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[9] 穆彥如，謝凱. VEGF的研究進(jìn)展及其婦科腫瘤中的應(yīng)用[J]. 實(shí)用腫瘤學(xué)雜志，2010，24（1）：90-92.

[10] 李雯，何勉，曾建芳，等. 宮頸鱗狀細(xì)胞癌巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子和p16蛋白表達(dá)與臨床病理的關(guān)系[J]. 中華腫瘤雜志，2008，30（7）：511-514.

[11] 宋亞輝，劉青云，張林. VEGF和P53蛋白在宮頸癌中的表達(dá)[J]. 現(xiàn)代生物學(xué)進(jìn)展，2010，10（2）：313.

[12] 宋濤，張榮玲，周蘭英. 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子在婦科腫瘤中的研究進(jìn)展[J]. 當(dāng)代醫(yī)學(xué)，2008，14（22）：11-12.

[13] RmaliKA，PuntisM C，Jiang WG. Tumour associated angiogenesis in human colorectal cancer[J]. Colorectal Dis，2007，9（1）：3-14.

[14] Ciardiello F，Troiani T，Bianco R，et al. Interaction between the epidemal growth factor receptor（EGFR） and the vascular endothelia growth factor（VEGF） pathways a rational approach for multitarget anticancer therapy[J]. Ann Oncol，2006，17（Suppl7）：109-114.

[15] 江萍，王俊杰. 分子靶向聯(lián)合治療非小細(xì)胞肺癌研究進(jìn)展[J]. 中國(guó)腫瘤臨床與康復(fù)，2009，16（5）：458-460.

（收稿日期：2013-03-19）endprint

血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）是一種內(nèi)皮細(xì)胞的特異性有絲分裂原，在體外能促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞的生長(zhǎng)，在體內(nèi)可誘導(dǎo)血管發(fā)生[7]。研究表明，VEGF通過VEGFR介導(dǎo)的受體信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖、遷移，阻止內(nèi)皮細(xì)胞凋亡和宮腔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)退化，增加血管滲透性，從而促進(jìn)腫瘤血管生成和腫瘤生長(zhǎng)；并且目前以VEGFR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路為靶點(diǎn)進(jìn)行腫瘤靶向治療已在多種腫瘤取得了實(shí)質(zhì)性的療效[8]。

近年來，穆彥如等[9]、李雯等[10]認(rèn)為VEGF參與宮頸癌變過程，且與腫瘤分化及臨床分期有關(guān)。李淼[3]、宋亞輝等[11]學(xué)者認(rèn)為VEGF與宮頸癌有無淋巴結(jié)有關(guān)，但穆彥如等[9]認(rèn)為它與腫瘤分化、組織學(xué)類型、浸潤(rùn)深度無關(guān)。而宋濤等[12]又認(rèn)為VEGF與組織學(xué)類型有關(guān)，腺癌的表達(dá)率高于鱗癌的表達(dá)率，他們的研究結(jié)果不甚一致。我們通過對(duì)含有80例宮頸癌的組織芯片進(jìn)行研究，觀察有效對(duì)象77例，結(jié)果顯示：VEGF在宮頸癌中的陽性表達(dá)率為79.1%，且腫瘤周邊區(qū)域的VEGF表達(dá)水平較中央?yún)^(qū)域低，這與文獻(xiàn)[3]結(jié)果相近。結(jié)果表明宮頸癌中VEGF呈過表達(dá)，并且與腫瘤的大小、臨床分期及有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，與年齡病理分級(jí)、浸潤(rùn)深度、組織學(xué)類型無關(guān)。與腫瘤的大小，臨床分期有關(guān)，與浸潤(rùn)深度無關(guān)，這與穆彥如等[9]、李雯等[10]的觀點(diǎn)是一致的；與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，這與文獻(xiàn)[3，11]的報(bào)道是吻合的，說明VEGF過表達(dá)者，惡性程度較高，易發(fā)生盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，提示腫瘤組織中VEGF水平在一定程度上反映腫瘤的局部浸潤(rùn)活性和轉(zhuǎn)移潛能，與腫瘤的轉(zhuǎn)移分期臨床及預(yù)后密切相關(guān)。因此，對(duì)VEGF表達(dá)較高者，術(shù)中要警惕淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和癌細(xì)胞浸潤(rùn)可能。但本研究不支持與腫瘤分化有關(guān)，這與李雯等[10]的觀點(diǎn)不同，這尚需進(jìn)一步探索。此外，我們發(fā)現(xiàn)在腫瘤間質(zhì)中有些組織細(xì)胞呈陽性表達(dá)，這與VEGF已知的生物學(xué)理論相符，VEGF是腫瘤細(xì)胞、腫瘤侵入的巨噬細(xì)胞和肥大細(xì)胞所分泌的，以旁分泌的形式，刺激腫瘤內(nèi)皮細(xì)胞，誘導(dǎo)血管形成，促進(jìn)腫瘤持續(xù)生長(zhǎng)，并提高血管通透性[9]。

同時(shí)，我們分析了EGFR與VEGF在本組宮頸癌中表達(dá)的相關(guān)關(guān)系，結(jié)果發(fā)現(xiàn)隨著EGFR增加，VEGF也不同程度增加，兩者的表達(dá)呈正相關(guān)，提示它們對(duì)宮頸癌有正效應(yīng)作用，有聯(lián)合表達(dá)，它們表達(dá)越高，宮頸癌的侵襲轉(zhuǎn)移功能越大，預(yù)后越差。以上研究結(jié)果支持EGFR已知的生物學(xué)理論[13]，它依賴的下游信號(hào)轉(zhuǎn)移通路激活，可以促進(jìn)細(xì)胞增殖、抑制細(xì)胞凋亡和分化，并增加VEGF的表達(dá)水平，繼而促進(jìn)新生血管形成、有利于腫瘤侵襲和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。Ciardiello等[14]也發(fā)現(xiàn)EGFR能通過刺激腫瘤細(xì)胞分泌VEGF來誘導(dǎo)血管生成。二者聯(lián)合表達(dá)預(yù)示更高的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率和更具有侵襲性的生物學(xué)行為。

EGFR和VEGF有著共同的信號(hào)傳導(dǎo)途徑，他們直接或間接作用于腫瘤細(xì)胞，EGFR是有關(guān)血管發(fā)生的受體，在腫瘤血管形成過程中的表皮細(xì)胞中表達(dá)[15]。本組研究表明在宮頸癌中二者均過表達(dá)，且呈正相關(guān)，與宮頸癌的TNM分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，具有協(xié)同效應(yīng)，存在聯(lián)合表達(dá)。聯(lián)合應(yīng)用EGFR阻斷劑和VEGF抑制劑分子靶向治療可能帶來更多效應(yīng)。這預(yù)示著在宮頸癌中，以EGFR為靶點(diǎn)的靶向治療與以VEGF為靶點(diǎn)的抗血管生成療法聯(lián)合應(yīng)用的可行性具有理論依據(jù)。

綜上所述，EGFR是參與宮頸癌浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移分子機(jī)制的重要分子，其過度表達(dá)與低分化、高增殖、易轉(zhuǎn)移有關(guān)；VEGF與宮頸癌的生長(zhǎng)、浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移、預(yù)后有關(guān)；它們?cè)趯m頸癌的表達(dá)呈正相關(guān)，且具有協(xié)同效應(yīng)。通過對(duì)宮頸癌的活檢或根治標(biāo)本組織進(jìn)行EGFR和VEGF表達(dá)的病理檢測(cè)，指導(dǎo)臨床以兩者為靶點(diǎn)聯(lián)合靶向用藥能成為意義深遠(yuǎn)的治療宮頸癌的新方法，值得推廣。

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[3] 李淼，閆風(fēng)彩，錢智，等. 宮頸癌組織中Survivin、Ki-67及VEGF的表達(dá)及相關(guān)性[J]. 現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2011，19（7）：1396-1399.

[4] 李青，紀(jì)捷，吳王飛，等. 宮頸鱗狀上皮病變中EGFR蛋白表達(dá)及基因擴(kuò)增的臨床意義[J]. 診斷病理學(xué)雜志，2010， 17（6）：448-452.

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[6] Fatima Baltazar，Ph.D.，Adhemar Longatto Filho，et al. Cyclooxygenase-2 and epidermal growth factor receptor expressions in different histological subtypes of cervical carcinomas[J]. Int J Gynecol Pathol，2007，26（3）：235-241.

[7] 孟琴，紀(jì)新強(qiáng). RKIP和VEGF在宮頸癌及癌前病變中表達(dá)的臨床研究[J]. 山東醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)校學(xué)報(bào)，2011， 33（2）：87-90.

[8] 魏曉瑩，孫新臣，曹遠(yuǎn)東，等. EGFR和VEGF在大腸癌組織中的表達(dá)及臨床意義[J]. 臨床腫瘤學(xué)雜志，2009，14（10）：895-899.

[9] 穆彥如，謝凱. VEGF的研究進(jìn)展及其婦科腫瘤中的應(yīng)用[J]. 實(shí)用腫瘤學(xué)雜志，2010，24（1）：90-92.

[10] 李雯，何勉，曾建芳，等. 宮頸鱗狀細(xì)胞癌巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子和p16蛋白表達(dá)與臨床病理的關(guān)系[J]. 中華腫瘤雜志，2008，30（7）：511-514.

[11] 宋亞輝，劉青云，張林. VEGF和P53蛋白在宮頸癌中的表達(dá)[J]. 現(xiàn)代生物學(xué)進(jìn)展，2010，10（2）：313.

[12] 宋濤，張榮玲，周蘭英. 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子在婦科腫瘤中的研究進(jìn)展[J]. 當(dāng)代醫(yī)學(xué)，2008，14（22）：11-12.

[13] RmaliKA，PuntisM C，Jiang WG. Tumour associated angiogenesis in human colorectal cancer[J]. Colorectal Dis，2007，9（1）：3-14.

[14] Ciardiello F，Troiani T，Bianco R，et al. Interaction between the epidemal growth factor receptor（EGFR） and the vascular endothelia growth factor（VEGF） pathways a rational approach for multitarget anticancer therapy[J]. Ann Oncol，2006，17（Suppl7）：109-114.

[15] 江萍，王俊杰. 分子靶向聯(lián)合治療非小細(xì)胞肺癌研究進(jìn)展[J]. 中國(guó)腫瘤臨床與康復(fù)，2009，16（5）：458-460.

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