鄭玉梅

（吉林省農(nóng)安縣中醫(yī)院檢驗(yàn)科，吉林 長(zhǎng)春 130200）

酶聯(lián)免疫法檢測(cè)乙肝表面抗原的性能評(píng)價(jià)分析

鄭玉梅

（吉林省農(nóng)安縣中醫(yī)院檢驗(yàn)科，吉林 長(zhǎng)春 130200）

目的分析酶聯(lián)免疫法檢測(cè)乙肝表面抗原的性能評(píng)價(jià)，為臨床檢測(cè)乙肝表面抗原提供科學(xué)依據(jù)。方法選取2010年6月至2011年12月在我院門診科就診的83例乙肝患者作為檢測(cè)組，另選83例健康志愿者作為對(duì)照組，對(duì)兩組人員采用酶聯(lián)免疫法對(duì)乙肝表面抗原進(jìn)行檢測(cè)，記錄并分析兩組的檢測(cè)結(jié)果，對(duì)其性能評(píng)價(jià)進(jìn)行分析。結(jié)果經(jīng)過(guò)分析兩組的檢測(cè)結(jié)果可知，接近臨界值其分析物的重復(fù)性：+20%濃度臨界值其分析物檢測(cè)陽(yáng)性率不小于95%，-20%濃度臨界值其分析物檢測(cè)陽(yáng)性率不大于5%；靈敏度為96.38%，特異度為98.79%。結(jié)論酶聯(lián)免疫法對(duì)乙肝表面抗原檢測(cè)的臨界值為±20%，并且在檢測(cè)濃度的范圍內(nèi)得到的靈敏度與特異性均較高，因此采用酶聯(lián)免疫法檢測(cè)乙肝表面抗原對(duì)乙肝診斷具有重要意義，可在臨床上推廣與應(yīng)用。

酶聯(lián)免疫法；乙肝表面抗原；性能評(píng)價(jià)分析

乙肝全稱為乙型病毒性肝炎，是指機(jī)體感染乙型肝炎病毒后所引起的一種嚴(yán)重威脅人類健康的疾病[1]。乙型肝炎病毒主要存在于肝細(xì)胞內(nèi)，是一種嗜肝病毒，可通過(guò)損害肝細(xì)胞而引起肝細(xì)胞壞死、炎癥、纖維化等。乙型病毒性肝炎分為急性乙型肝炎和慢性乙型肝炎兩種。成年人中急性乙型肝炎患者的90%均可自愈，而慢性乙型肝炎則需要進(jìn)行系統(tǒng)的治療。具調(diào)查目前我國(guó)乙肝病毒的攜帶率為7.18%，但隨著乙肝疫苗的大力推廣與應(yīng)用，其感染率有逐年下降的趨勢(shì)。目前臨床上常用來(lái)診斷乙肝的檢測(cè)方法是乙肝五項(xiàng)檢測(cè)，即采用酶聯(lián)免疫法對(duì)表面抗原（HBsAg）、е抗體（抗HBe）、表面抗體（抗HBs）、核心抗體（抗HBc）、е抗原（HBeAg）進(jìn)行檢測(cè)，該方法又被稱為乙肝兩對(duì)半。乙肝表面抗原是指乙肝病毒的外殼蛋白，其本身不具有傳染性，但由于其常伴隨乙肝病毒的存在，所以乙肝表面抗原是感染乙肝病毒的標(biāo)志[2]。我院為了分析酶聯(lián)免疫法檢測(cè)乙肝表面抗原的性能評(píng)價(jià)，特選取了83例在我院進(jìn)行檢測(cè)的乙肝患者，并對(duì)其臨床資料進(jìn)行了詳細(xì)的回顧與分析，現(xiàn)將其總結(jié)如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2010年6月至2011年12月在我院門診科就診的83例乙肝患者，其中男性42例，女性41例；年齡19～71歲，平均年齡45.3歲。另選83例健康志愿者，其中男性40例，女性43例；年齡21～72歲，平均年齡46.1歲。采集所有受檢者在空腹時(shí)的血液樣本，對(duì)其進(jìn)行酶聯(lián)免疫檢測(cè)。

1.2 試劑與儀器

試劑盒由北京萬(wàn)泰生物藥物有限公司提供；儀器為ALISIE全自動(dòng)酶聯(lián)免疫分析儀，系統(tǒng)為瑞士HAMILTON全自動(dòng)酶免系統(tǒng)。質(zhì)控血清于衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心購(gòu)得，濃度為1 IU/mL，批號(hào)為0906。

1.3 檢測(cè)方法

采集所有受檢者的血液樣本，并進(jìn)行至少30 min的凝集，然后取其上層的血清備用。用稀釋液對(duì)酶復(fù)合物進(jìn)行稀釋后，依次加入血清、陽(yáng)性和陰性對(duì)照及質(zhì)控品。放置1 h孵育，之后洗板并加入底物，避光反應(yīng)30 min后加入終止液即完成反應(yīng)部分。最后滴加底物溶液，這時(shí)底物會(huì)在酶的作用下使其含有的供氫體從無(wú)色的還原型變?yōu)橛猩难趸?，并出現(xiàn)顏色反應(yīng)。通過(guò)底物呈現(xiàn)的顏色反應(yīng)對(duì)有無(wú)相應(yīng)的免疫反應(yīng)發(fā)生進(jìn)行評(píng)定，顏色反應(yīng)的深淺與標(biāo)本中相應(yīng)抗體或抗原的量呈正比。

重復(fù)性試驗(yàn)：收集檢測(cè)組S/CO檢測(cè)值（是指樣本吸光度與陽(yáng)性對(duì)照吸光度即臨界質(zhì)控值的比，該值＜1即為陽(yáng)性）接近于1的陽(yáng)性樣本，對(duì)其進(jìn)行一系列稀釋后，進(jìn)行重復(fù)檢測(cè)直到出現(xiàn)陰性與陽(yáng)性的比值約1∶1時(shí)，此時(shí)的濃度即為本檢測(cè)方法的臨界值。結(jié)果判斷當(dāng)S/CO＞1為陰性，S/CO＜1為陽(yáng)性。根據(jù)上述試驗(yàn)方法，計(jì)算出臨界值樣品±20%濃度的稀釋倍數(shù)，對(duì)臨界值±20%濃度的溶液分別進(jìn)行20次檢測(cè)，并記錄其檢測(cè)結(jié)果[3]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

記錄采用酶聯(lián)免疫法檢測(cè)乙肝表面抗原得到的數(shù)據(jù)，并采用SPSS11.0軟件完成數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)與處理。

2 結(jié) 果

經(jīng)過(guò)分析兩組的檢測(cè)結(jié)果可知，接近臨界值其分析物的重復(fù)性：+20%濃度臨界值其分析物檢測(cè)陽(yáng)性率不小于95%，-20%濃度臨界值其分析物檢測(cè)陽(yáng)性率不大于5%，故該檢測(cè)方法的檢測(cè)臨界濃度為± 20%；靈敏度為96.38%，特異度為98.79%。

3 討 論

乙型肝炎感染具有世界性流行的特點(diǎn)嚴(yán)重影響著人類的身體健康，我國(guó)目前乙肝病毒的攜帶率為7.18%，故尋找科學(xué)有效的檢測(cè)方法對(duì)于控制乙型肝炎的泛濫具有重要意義。乙肝表面抗原是一種存在于乙肝病毒表面的蛋白，雖然其本身無(wú)感染性，但是該蛋白的存在必定伴隨著乙肝病毒，所以若患者檢測(cè)乙肝表面抗原結(jié)果呈陽(yáng)性則可診斷為乙肝。目前臨床上使用最廣泛的檢測(cè)方法酶聯(lián)免疫法，就是通過(guò)檢測(cè)乙肝表面抗原而診斷疾病的，同時(shí)該法具有操作簡(jiǎn)便、成本低、特異性好、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)[4]。我院為了對(duì)酶聯(lián)免疫法檢測(cè)乙肝表面抗原的性能評(píng)價(jià)進(jìn)行分析，特在我院選取了83例乙肝患者及83例健康志愿者，采集其血液樣本后進(jìn)行乙肝表面抗原的檢測(cè)，結(jié)果得其檢查的臨界濃度為±20%，靈敏度為96.38%，特異度為98.79%。綜上所述，采用酶聯(lián)免疫法對(duì)乙肝表面抗原進(jìn)行檢測(cè)具有靈敏度高、特異性好的特點(diǎn)，應(yīng)用與臨床可有效提高乙肝的檢測(cè)率，為臨床治療乙肝提供科學(xué)有效的依據(jù)，故應(yīng)廣泛的推廣與應(yīng)用。

[1] 周永剛,方樹和,張玉靜.ELISA法檢測(cè)乙肝表面抗原室內(nèi)質(zhì)控的探討[J].內(nèi)蒙古中醫(yī)藥,2009,13(8):86.

[2] 高曉民,劉長(zhǎng)華,崔巖峰,等.酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)乙肝表面抗原結(jié)果分析[J].中國(guó)衛(wèi)生工程學(xué),2008,1(2):213.

[3] 陳桂山,張秀明,熊繼紅,等.酶聯(lián)免疫技術(shù)檢測(cè)乙肝表面抗原的分析性能評(píng)價(jià)[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2011,32(9):932.

[4] 李寧寧,楊繼紅,鄭義,等.乙肝表面抗原酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)質(zhì)控結(jié)果分析[J].湖北預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志,2009,11(2):7.

R512.6+<2 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B class="emphasis_bold">2 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B 文章編號(hào)：1671-8194（2014）27-0089-012 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B

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