徐艷華

內(nèi)蒙古民族大學(xué)附屬醫(yī)院/國(guó)家藥物臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)，內(nèi)蒙古 通遼 028007

肝臟是人和動(dòng)物體內(nèi)最重要的器官之一。近年來(lái)，肝硬化和肝癌的發(fā)病率逐年增高，肝臟病變部位切除是治療的重要途徑。如何有效地發(fā)掘肝臟再生潛能是術(shù)后病人得以存活的關(guān)鍵，因此，對(duì)肝臟的再生機(jī)理進(jìn)行研究對(duì)于肝臟疾病的治療具有重要的理論意義和臨床應(yīng)用價(jià)值。

由于肝臟疾病病因多樣性以及倫理等方面的原因，對(duì)肝臟再生機(jī)理的認(rèn)識(shí)多來(lái)自實(shí)驗(yàn)動(dòng)物［1］。哺乳動(dòng)物肝臟具有很強(qiáng)的再生潛能，肝部分切除后，剩余的肝細(xì)胞能迅速分裂增殖［2］。一般選擇大鼠或小鼠進(jìn)行肝再生的研究，因其肝臟在解剖學(xué)上與人類肝臟關(guān)系密切，肝70%切除后可在7～10天內(nèi)基本恢復(fù)原有的體積和功能［3］，因此成為研究肝再生較理想的動(dòng)物模型。

1 部分肝臟切除模型

劉國(guó)華等［4］分別采用分次與一次肝部分切除的方法建立大鼠肝再生模型，證實(shí)了采用分次肝部分切除術(shù)建立大鼠肝再生模型的方法的可行性，該方法量化肝臟切除程度的準(zhǔn)確性高，并發(fā)癥發(fā)生率低，手術(shù)成功率高，是理想的手術(shù)方法?？娒饔赖龋?］切除70%大鼠肝臟制作肝再生模型，研究大鼠肝再生過(guò)程中肝細(xì)胞線粒體膜通透性轉(zhuǎn)換的變化規(guī)律，闡明大鼠肝再生過(guò)程中線粒體PT出現(xiàn)明顯規(guī)律性改變，可能與肝再生過(guò)程中線粒體氧化磷酸化的變化以及肝再生的啟動(dòng)和終止有關(guān)。張谷裕等［6］采用手術(shù)切除2/3肝臟建立大鼠肝卵圓細(xì)胞增殖肝再生模型，探討維生素K2對(duì)大鼠部分肝切除術(shù)后肝再生過(guò)程中肝功能恢復(fù)的影響，證實(shí)了維生素K2對(duì)大鼠肝再生模型術(shù)后肝功能恢復(fù)有明顯的改善作用。李紅蕾［7］通過(guò)部分肝切除建立大鼠肝再生模型，檢測(cè)干細(xì)胞緊密連接、粘附連接、粘著斑和間隙連接等相關(guān)基因在大鼠再生肝中的表達(dá)情況。表明肝再生細(xì)胞生理生化活動(dòng)具有多樣性和復(fù)雜性。根據(jù)肝再生基因表達(dá)變化和表達(dá)模式推測(cè)，肝再生早期和前期間隙連接形成增強(qiáng)，晚中期和后期間隙連接形成減少;早期、前期和后期粘著斑形成增強(qiáng);緊密連接和粘附連接的形成貫穿于整個(gè)肝再生。朱清靜［8］采用大鼠肝部分切除法建立肝再生模型，研究丹黃方促肝細(xì)胞再生的作用機(jī)制。結(jié)果表明，丹黃方可能是通過(guò)增強(qiáng)肝組織PC3mRNA、c-fosmRNA的表達(dá)而促進(jìn)肝細(xì)胞的增殖。周播江［9］通過(guò)建立大鼠肝再生模型，觀察肝再生模型大鼠血清和肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)骨髓干細(xì)胞向肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞分化的作用，結(jié)果表明，大鼠骨髓干細(xì)胞在肝再生模型大鼠血清或肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子的誘導(dǎo)下能橫向分化為肝實(shí)質(zhì)樣細(xì)胞。湯朝暉［10］利用肝部分切除術(shù)，建立可準(zhǔn)確量化和易于操控的小鼠肝臟再生模型，結(jié)果表明，該方法可準(zhǔn)確量化肝臟切除的程度，具有可控性強(qiáng)、簡(jiǎn)便易行和成功率高等優(yōu)點(diǎn)，為小鼠肝再生的研究奠定了基礎(chǔ)。趙丹丹［11］同樣運(yùn)用大鼠進(jìn)行肝部分切除成功建立了肝再生模型，并進(jìn)行了完全去神經(jīng)對(duì)大鼠再生感雌激素受體表達(dá)的影響研究。陳歡［12］采取大鼠肝臟部分切除方法建立肝再生模型，進(jìn)行肝再生過(guò)程中的microRNA表達(dá)譜和差異microRNA的研究，豐富了對(duì)肝再生過(guò)程中基因表達(dá)調(diào)控機(jī)制的研究。陳戰(zhàn)［13］采用大鼠肝臟2/3切除術(shù)建立大鼠肝再生模型，觀察殘肝組織病理狀況及NF-κB的激活狀況，闡明川芎嗪通過(guò)抑制炎癥反應(yīng)可以對(duì)創(chuàng)傷后肝組織起到保護(hù)作用，但其對(duì) NF-κB活化的抑制使肝細(xì)胞有絲分裂發(fā)生阻滯，從而延遲了肝再生的啟動(dòng)期，影響了肝再生的進(jìn)程。陳偉［14］從分子生物學(xué)角度對(duì)肝再生進(jìn)行了系統(tǒng)的綜述性研究。羅志新［15］通過(guò)對(duì)小鼠肝切除后再生的綜述，證實(shí)參與調(diào)控肝再生的細(xì)胞因子和生長(zhǎng)因子有:肝再生增強(qiáng)因子、腫瘤壞死因子、白介素6、白介素1、肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子、去甲腎上腺素、卵泡抑素、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子等。袁星［16］通過(guò)對(duì)動(dòng)物肝臟70%的切除建立肝再生模型，進(jìn)行蛋白組學(xué)和代謝組學(xué)研究，結(jié)果表明，差異蛋白在肝再生早期較多，磷脂的代謝早期增強(qiáng)、后期減弱。袁斌［17］通過(guò)對(duì)肝臟部分切除建立大鼠肝再生模型，探討MiR-23b在肝再生終止階段的表達(dá)及功能，結(jié)果表明，肝再生終止階段神經(jīng)顆粒素的表達(dá)量上調(diào)與miR-23b以及外源性甲狀腺激素 T3無(wú)關(guān)，NO通過(guò)誘導(dǎo)神經(jīng)顆粒素表達(dá)上調(diào)，參與線粒體凋亡通路調(diào)控肝再生終止。魯育民［18］采用70%部分肝切除大鼠動(dòng)物模型，并采用膽總管結(jié)扎的方法研究梗阻性黃疸不同引流方式，結(jié)果表明，外引流術(shù)對(duì)肝再生有明顯的抑制，外引流術(shù)相對(duì)內(nèi)引流術(shù)導(dǎo)致的肝再生差異可能是由于膽汁酸腸肝循環(huán)破壞，F(xiàn)XR表達(dá)下調(diào)，進(jìn)而影響了肝再生。焦華波［19］從膽管結(jié)扎后肝臟病理生理的改變與去膽管肝葉對(duì)肝再生的影響方面進(jìn)行了綜述，為肝再生機(jī)制的研究提供了參考依據(jù)。陸克［20］將肝再生相關(guān)因子從起始階段、增值階段、終止階段進(jìn)行了綜述性研究，表明TGF-β1、Hippo、ILK、磷脂酰肌醇3等均與肝再生的肝功能恢復(fù)密切相關(guān)。

2 化學(xué)藥物損傷模型

賴林泉［21］采用小鼠CCl4腹腔注射建立肝損傷再生模型，分析了絲裂原活化蛋白激酶信號(hào)通路基因的表達(dá)譜，表明了此信號(hào)通路對(duì)肝再生不同階段的雙重調(diào)控作用。

3 連續(xù)肝切除模型

湯莉等［22］選用小鼠進(jìn)行肝順次手術(shù)結(jié)扎，切除2/3肝組織，觀察術(shù)后小鼠生存和肝組織再生狀況。最終通過(guò)分葉順次肝切除術(shù)，可準(zhǔn)確量化肝臟切除的程度，簡(jiǎn)便易行、成功率高，為肝再生的機(jī)理研究提供了理想的動(dòng)物模型。丁?。?3］進(jìn)行大鼠長(zhǎng)間隔連續(xù)切除肝葉，21天后處死動(dòng)物。為研究多次再生后的新生肝組織的功能是否恢復(fù)到正常肝功能范圍及肝臟的再生是結(jié)構(gòu)性再生還是功能性再生建立了模型。李瀚渂［24］采取大鼠肝臟左右葉切除的方法建立肝再生模型，研究下丘腦-垂體-肝軸對(duì)肝再生的影響及機(jī)制。結(jié)果表明，MSC-肝再生-大鼠模型的肝再生過(guò)程受到高級(jí)中樞的調(diào)控，其調(diào)控的可能機(jī)制是通過(guò)下丘腦-垂體-肝軸影響大鼠的肝再生過(guò)程。李紅蕾［25］以大鼠部分肝切除后不同時(shí)間恢復(fù)的肝組織為材料，利用生物信息學(xué)方法研究肝再生相關(guān)基因的表達(dá)動(dòng)態(tài)、表達(dá)模式以及作用時(shí)間和互作關(guān)系，探討細(xì)胞外基質(zhì)、細(xì)胞連接、細(xì)胞骨架、細(xì)胞遷移和膜蛋白相關(guān)基因在肝再生中的作用。結(jié)果表明，細(xì)胞外基質(zhì)、細(xì)胞連接、細(xì)胞骨架、細(xì)胞遷移和膜蛋白相關(guān)基因表達(dá)在再生肝組織的結(jié)構(gòu)和功能重建中發(fā)揮重要作用。

綜上所述，肝再生模型建立方法多種多樣，此模型的建立促進(jìn)了肝臟再生機(jī)理的研究，為臨床肝臟外科手術(shù)的開(kāi)展和肝臟疾病的治療提供了理論指導(dǎo)。研究者可依據(jù)自身實(shí)驗(yàn)條件及需求進(jìn)行選擇，同時(shí)還應(yīng)全面考慮模型建立時(shí)動(dòng)物的年齡、性別、營(yíng)養(yǎng)，以及操作過(guò)程中的無(wú)菌條件。

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