劉 丹 李 凌 楊玉光 劉文濤 吳 瑾*

（哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬第三醫(yī)院內(nèi)七科，哈爾濱 黑龍江 150081）

中國(guó)人群的AXIN2 rs2240308多態(tài)性與肺癌易感性的關(guān)系研究

劉 丹 李 凌 楊玉光 劉文濤 吳 瑾*

（哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬第三醫(yī)院內(nèi)七科，哈爾濱 黑龍江 150081）

目的旨在探討AXIN2外顯子1-148（rs2240308）多態(tài)性與肺癌易感性在中國(guó)漢族人群的關(guān)系。方法在555例對(duì)照組和520例肺癌患者中使用TaqMan SNP基因分型方法對(duì)AXIN2外顯子1-148SNP進(jìn)行基因分型。使用非條件Logistic回歸分析來(lái)計(jì)算調(diào)整后的比值(OR)和95%可信區(qū)間(95% CI)的。結(jié)果AG、AA和GG基因型出現(xiàn)頻率在對(duì)照組和病例組之間存在顯著差異，相比于那些攜帶GG基因型的患者，攜帶A等位基因(AG+AA基因型)患者其肺癌易感性較高。結(jié)論在中國(guó)人群中AXIN2外顯子1-148 G->A多態(tài)性(rs2240308)患者其肺癌易感性較高。進(jìn)一步表明AXIN2可作為肺癌相關(guān)基因。

AXIN2；多態(tài)性；肺癌；中國(guó)人口

肺癌是一種人類癌癥中最常見(jiàn)的類型并且是全世界癌癥死亡的首要原因。與肺癌風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)的遺傳多態(tài)性的判定是了解這種致命的疾病的病因以及開(kāi)發(fā)新的方法來(lái)早期診斷和預(yù)防該疾病的關(guān)鍵。

支架蛋白Axin（軸抑制蛋白）是經(jīng)典Wnt/β-連環(huán)蛋白信號(hào)傳導(dǎo)途徑中的負(fù)調(diào)節(jié)因子，并且在許多人類癌癥中起到腫瘤抑制劑的作用。研究發(fā)現(xiàn)在肺癌中AXIN2的低表達(dá)與β-連環(huán)蛋白積聚相關(guān)，并且在非小細(xì)胞肺癌發(fā)生中Axin 2的表觀遺傳沉默導(dǎo)致β-catenin核積累。在肺癌中AXIN2基因的腫瘤特異性突變尚未見(jiàn)報(bào)道。然而，兩個(gè)由日本人和土耳其人參與的研究顯示AXIN2外顯子1-148 A/G（T/C上的轉(zhuǎn)錄等位基因；rs2240308）的SNP多態(tài)性與肺癌有很強(qiáng)的關(guān)聯(lián)。在這些研究中發(fā)現(xiàn)，與CCT（脯氨酸）相比TCT（絲氨酸）密碼子50與肺癌風(fēng)險(xiǎn)降低相關(guān)。到目前為止，還沒(méi)有中國(guó)人群Axin2 SNP多態(tài)性與肺癌之間關(guān)系的報(bào)告。因此我們對(duì)中國(guó)人AXIN2外顯子1-148(rs2240308）SNP多態(tài)性與肺癌易感性之間的關(guān)系進(jìn)行了一項(xiàng)對(duì)照研究。

1 材料與方法

1.1 研究人群

病例組是由520例肺癌患者組成，這些患者從2011年9月至2012年9月到哈醫(yī)大附屬第三醫(yī)院就醫(yī)。所有患者均是新發(fā)病例并且經(jīng)過(guò)病理證實(shí)。排除標(biāo)準(zhǔn)包括癌癥病史以及化療或放療。對(duì)照組包括555名是隨機(jī)抽取的同一時(shí)間同一地區(qū)的年齡、性別、出生地相匹配的健康人群。對(duì)照組人群沒(méi)有癌癥病史，沒(méi)接受過(guò)化療或放療。所有受試者均隨機(jī)從哈爾濱市及其周邊地區(qū)抽取。

1.2 DNA提取和TaqMan SNP基因分型分析

EDTA-抗凝靜脈血液樣本在-70 ℃下保存。根據(jù)說(shuō)明書(shū)使用RelaxGene血液DNA系統(tǒng)，從全血中分離出分離基因組DNA。使用基于TaqMan SNP基因分型分析儀與ABI7900 HT快速實(shí)時(shí)定量PCR系統(tǒng)和SDS2.4軟件進(jìn)行AXIN2外顯子1-148 (2240308)SNP多態(tài)性的基因分型。其檢測(cè)ID是C_2577354_1_。每次反應(yīng)均采用的Taqman通用預(yù)混液、Taqman探針10 ng DNA來(lái)進(jìn)行分析。為了質(zhì)量控制，在雙盲狀態(tài)下進(jìn)行基因分型過(guò)程。

1.3 統(tǒng)計(jì)分析

使用HaploView4.2軟件通過(guò)卡方檢驗(yàn)來(lái)檢測(cè)其對(duì)Hardy-Weinberg平衡的適應(yīng)性?；蛐团c肺癌風(fēng)險(xiǎn)之間的關(guān)聯(lián)是由多因素logistic回歸分析來(lái)進(jìn)行評(píng)估。采用SPSS15.0軟件以比值比（OR）及其95%可信區(qū)間（CI）來(lái)表示。P＜0.05被認(rèn)為是統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

2 結(jié) 果

在本病例對(duì)照研究，共1075例中國(guó)人，漢族（520例肺癌患者和555名健康對(duì)照受試者）進(jìn)行AXIN2外顯子1-148基因多態(tài)性的檢測(cè)。受試者的基本特征總結(jié)為，在患者組和對(duì)照組中男女比例分別為1∶1.43和1∶1.40?；颊呓M和對(duì)照組的平均年齡分別為（57.78±9.89）歲和（52.21±10.56）歲?；颊呓M和對(duì)照組在年齡（P=0.47）、性別（P=0.68）或吸煙狀態(tài)（P=0.90）方面沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

AXIN2外顯子1-148基因型分布狀態(tài)與對(duì)照組和肺癌組中患者等位基因頻率的分析如下。對(duì)照組和肺癌組中觀察到的AXIN2外顯子1-148A/G多態(tài)性的基因型分布狀態(tài)均符合Hardy-Weinberg平衡(對(duì)照組P=0.79，肺癌組P=0.27)。對(duì)照組和肺癌組中等位基因A對(duì)比等位基因G的出現(xiàn)頻率分別為0.31%、0.69%和0.36%、0.64%。與對(duì)照組相比肺癌組中A等位基因更加普遍(χ2=6.619，OR=0.7865，CI 95%=0.6548-0.9445，P=0.01009)。對(duì)照組中基因型AG、AA和GG的出現(xiàn)頻率分別是45.95%，12.07%和38.02%，而肺癌患者組中分別是41.54%，9.04%和45.19%。雙側(cè)卡式分析表明AG，AA和GG基因型比率在對(duì)照組和肺癌組中有顯著性差異(χ2=6.849，P=0.03256，df=2)。非條件Logistic回歸分析表明，相比于那些攜帶GG基因型人群，攜帶A等位基因（AG+AA基因型）的受試者其肺癌易感性較強(qiáng)(OR=0.733，CI 95%=0.5726-0.9393，P=0.01382)。

3 討 論

在本研究中，通過(guò)555名對(duì)照患者以及520例肺癌患者的DNA基因分型后結(jié)果，我們發(fā)現(xiàn)在中國(guó)漢族人群中AXIN2外顯子1-148 A->G多態(tài)性與肺癌風(fēng)險(xiǎn)之間存在關(guān)聯(lián)。

從生物學(xué)角度來(lái)說(shuō)，AXIN2基因多態(tài)性和肺癌之間完全可能存在關(guān)系。研究表明Axin2是Wnt信號(hào)傳導(dǎo)通路中的負(fù)調(diào)節(jié)物。與持續(xù)表達(dá)的Axin1不同，AXIN2作為β-連環(huán)蛋白降解復(fù)合物中的限制因素。

雖然AXIN2基因突變?cè)诜伟┲惺呛币?jiàn)的，但有兩項(xiàng)研究已經(jīng)報(bào)道了AXIN2外顯子1-148 A->G（C->T轉(zhuǎn)錄等位基因；rs2240308）與肺癌存在關(guān)系。一項(xiàng)日本人參與的對(duì)照研究表明，與健康對(duì)照組相比，肺癌患者AXIN2純合子T/T的外顯子-148的（絲氨酸密碼子50 ）的頻率顯著降低，且對(duì)T/T基因型與肺癌易感性降低相關(guān)。另外一項(xiàng)土耳其人參與的研究表明，Axin2 148 C->T (rs2240308)而不是另外七個(gè)AXIN2 SNP多態(tài)性與肺癌相關(guān)。與日本的研究相一致，他們發(fā)現(xiàn)了148 TT基因型與肺癌風(fēng)險(xiǎn)降低相關(guān)。

我們研究中國(guó)漢族人群的結(jié)果與日本人和土耳其人的結(jié)果相一致。值得注意的是我們發(fā)現(xiàn)Axin2外顯子1-148等位基因A與肺癌易感性降低相關(guān)。由于我們的研究有相對(duì)較大的樣本量，因此先前的研究中Axin Pro50Ser和肺癌發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)之間的顯著性關(guān)系得到了確認(rèn)。據(jù)我們所知這是第一個(gè)中國(guó)人群中Axin2多態(tài)性與肺癌關(guān)系的報(bào)道。

總而言之，我們發(fā)現(xiàn)在中國(guó)漢族人群中Axin2Exon1-148 A->G多態(tài)性(rs2240308)與肺癌發(fā)生有關(guān)。這進(jìn)一步表明Axin2是一個(gè)癌癥相關(guān)基因。但是該基因突變?cè)诜伟┌l(fā)生中的功能依然需要進(jìn)一步研究確定。

R734.2

B

1671-8194（2014）23-0080-02

黑龍江省教育廳2012年度科學(xué)技術(shù)研究項(xiàng)目資助（項(xiàng)目編號(hào)：12521317）

*通訊作者：E-mail:liudantg@126.com