周 成，鄔應(yīng)龍，向世瓊，夏曉杰

氧化魔芋葡甘露聚糖對(duì)齊口裂腹魚(yú)品質(zhì)和脂肪代謝相關(guān)基因表達(dá)的影響

周 成，鄔應(yīng)龍*，向世瓊，夏曉杰

（四川農(nóng)業(yè)大學(xué)食品學(xué)院，四川 雅安 625014）

目的：研究日糧氧化魔芋葡甘露聚糖（oxidized konjac glucomannan，OKGM）對(duì)齊口裂腹魚(yú)的品質(zhì)和脂肪代謝相關(guān)基因表達(dá)的影響。方法：將初始體質(zhì)量為80 g的齊口裂腹魚(yú)隨機(jī)分成5 組，分別飼喂質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0（對(duì)照組）、0.4%、0.8%、1.6%、3.2% OKGM，養(yǎng)殖60 d后，考察OKGM對(duì)齊口裂腹魚(yú)的品質(zhì)和脂肪代謝相關(guān)基因表達(dá)的影響。結(jié)果：與對(duì)照組相比，日糧OKGM添加量為1.6%和3.2%能顯著增加齊口裂腹魚(yú)腹肌中蛋白質(zhì)含量（P＜0.05），添加量為0.8%時(shí)，會(huì)顯著降低腹肌粗脂肪含量（P＜0.05），OKGM添加量對(duì)齊口裂腹魚(yú)肌肉中水分和粗灰分無(wú)顯著影響（P＞0.05）；添加量對(duì)齊口裂腹魚(yú)肌肉的pH值、失水率、羥脯氨酸含量、膠原蛋白含量的影響均無(wú)顯著性差異（P＞0.05）；添加量為1.6%時(shí)能顯著升高肌肉中過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體-α（peroxisome proliferator activated receptor-α，PPAR-α）mRNA 表達(dá)水平（P＜0.05），添加量為0.8%能顯著升高肝胰臟中PPAR-α mRNA表達(dá)水平（P＜0.05）；添加量為0.8%能極顯著降低齊口裂腹魚(yú)肌肉中脂肪酸結(jié)合蛋白（fatty acid binding protein，F(xiàn)ABP）mRNA表達(dá)水平（P＜0.01），添加量對(duì)肝胰臟中FABP mRNA表達(dá)水平的影響差異均不顯著（P＞0.05）。結(jié)論：日糧中添加適量OKGM能改善齊口裂腹魚(yú)的品質(zhì)，調(diào)節(jié)脂肪代謝相關(guān)基因表達(dá)。

氧化魔芋葡甘露聚糖；齊口裂腹魚(yú)；品質(zhì)；過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體-α；脂肪酸結(jié)合蛋白

齊口裂腹魚(yú)（Schizothorax prenanti Tchang）為川西高原特有的冷水性魚(yú)類(lèi)，其肉質(zhì)細(xì)嫩、味道鮮美，具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值，是產(chǎn)區(qū)名貴的野生經(jīng)濟(jì)魚(yú)類(lèi)[1-2]。目前，齊口裂腹魚(yú)的人工繁殖技術(shù)已經(jīng)基本成熟[3]，并逐步開(kāi)始了集約化養(yǎng)殖。但在養(yǎng)殖過(guò)程中，各種疾病時(shí)有發(fā)生，影響了齊口裂腹魚(yú)人工養(yǎng)殖的發(fā)展[4]。有效提高養(yǎng)殖魚(yú)類(lèi)的品質(zhì)，保證魚(yú)肉的質(zhì)量安全，對(duì)促進(jìn)養(yǎng)殖業(yè)的持續(xù)健康發(fā)展具有深遠(yuǎn)意義。

氧化魔芋葡甘露聚糖是魔芋葡甘露聚糖（konjac glucomannan，KGM）經(jīng)適當(dāng)?shù)难趸瘎┭趸笾频玫?。KGM是到目前為止最優(yōu)良的可溶性膳食纖維，同時(shí)具有降血脂、降血糖、增強(qiáng)免疫等生理功能，對(duì)預(yù)防和輔助治療各種疾病，如肥胖癥、腸道癌、心血管病、糖尿病等，具有重要作用[5]。

過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體（peroxisome proliferator activated receptors，PPARs）是一類(lèi)由配體激活的核轉(zhuǎn)錄因子，屬Ⅱ型核受體家族成員[6]。PPARs分為α、β、γ 3個(gè)亞型[7]。PPARs在介導(dǎo)脂肪酸氧化及脂肪代謝中起重要作用，其靶基因均與脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)和代謝途徑有關(guān)。Desvergne等[8]報(bào)道，PPARs可增加脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白和脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)酶的表達(dá)，刺激細(xì)胞對(duì)脂肪酸的攝入和向脂酸CoA的轉(zhuǎn)化PPARs是調(diào)控肝臟脂肪酸氧化酶基因表達(dá)的轉(zhuǎn)錄因子。Panadero等[9]研究表明：PPAR-α可以調(diào)節(jié)若干線(xiàn)粒體脂肪酸催化酶的表達(dá)，通過(guò)誘導(dǎo)肌肉和肝臟特異性的肉毒堿棕?cái)R酸轉(zhuǎn)運(yùn)酶表達(dá)而調(diào)控脂肪酸向線(xiàn)粒體的轉(zhuǎn)運(yùn)，刺激β-氧化過(guò)程，降低脂肪酸和甘油三酯合成。脂肪酸結(jié)合蛋白（fatty acid binding protein，F(xiàn)ABP）屬于脂質(zhì)結(jié)合蛋白超家族成員，是一類(lèi)分子質(zhì)量較小而對(duì)脂肪酸有高親和力的可溶性蛋白質(zhì)[10]，有研究表明，心型脂肪酸結(jié)合蛋白（H-FABP）表達(dá)量與肌間脂肪含量呈正相關(guān)[11]，因此脂肪酸結(jié)合蛋白基因被作為肌肉間脂肪的候選基因。

本實(shí)驗(yàn)主要研究日糧中添加氧化魔芋葡甘露聚糖（oxidized konjac glucomannan，OKGM）對(duì)齊口裂腹魚(yú)肌肉品質(zhì)的影響，并通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（real-time polymerase chain reaction，RT-PCR）技術(shù)檢測(cè)齊口裂腹魚(yú)脂肪代謝相關(guān)基因PPAR-α、FABP的mRNA表達(dá)水平。由于沉淀在肌肉內(nèi)的脂肪含量與肉的嫩度和風(fēng)味有直接的關(guān)系，對(duì)齊口裂腹魚(yú)PPARs及其脂肪代謝相關(guān)基因的研究，可為齊口裂腹魚(yú)育種和品質(zhì)改良提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

OKGM由四川農(nóng)業(yè)大學(xué)食品學(xué)院功能性食品實(shí)驗(yàn)室自制[12]；齊口裂腹魚(yú)購(gòu)自四川省雅安天泉雅魚(yú)場(chǎng)，為2011年孵化的同一批魚(yú)種，體質(zhì)量（79.54±8.12）g/尾，選擇體質(zhì)健壯的實(shí)驗(yàn)魚(yú)300 尾，暫養(yǎng)馴食14 d后開(kāi)始實(shí)驗(yàn)；魚(yú)粉、豆粕、玉米、麩皮、魚(yú)用多維、礦物添加劑、磷酸二氫鈣由四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)研究所提供；菜油、面粉購(gòu)自雅安市農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)。

總膽固醇、甘油三酯試劑盒 南京建成生物工程研究所；TRNzol 天根生化科技有限公司；反轉(zhuǎn)錄試劑盒、SYBR?Premix Ex TaqTM日本TaKaRa公司；西班牙瓊脂糖 北京恒奧生物科技有限公司；其他試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。

1.2 儀器與設(shè)備

PCR儀、凝膠成像系統(tǒng)、熒光定量PCR儀、水平電泳槽、電泳儀 美國(guó)Bio-Rad公司；微量移液器、Centrifuge 5810R高速低溫離心機(jī) 德國(guó)Eppendorf公司。

1.3 動(dòng)物飼養(yǎng)與管理

1.3.1 動(dòng)物分組與管理

暫養(yǎng)2 周后，選擇健康無(wú)傷病的齊口裂腹魚(yú)隨機(jī)分組，設(shè)1 個(gè)對(duì)照組，4 個(gè)OKGM處理組，每個(gè)處理組設(shè)3 個(gè)平行組。每個(gè)處理組投放20 尾魚(yú)，每個(gè)重復(fù)組投入1 個(gè)魚(yú)缸（規(guī)格為0.70 m×0.50 m×0.50 m），共15 個(gè)魚(yú)缸，按實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)分別編號(hào)。每天以體質(zhì)量2.5%的量投喂飼料，定時(shí)、定質(zhì)、定量投喂飼料，實(shí)驗(yàn)期間水溫為 18～22 ℃，pH 7.4～7.6。實(shí)驗(yàn)期間保持微流水，各實(shí)驗(yàn)池水體每天的交換量為30%。實(shí)驗(yàn)結(jié)束禁食24 h，進(jìn)行各種指標(biāo)的測(cè)定。

1.3.2 實(shí)驗(yàn)飼料

表1 實(shí)驗(yàn)飼料的組成及營(yíng)養(yǎng)水平Table 1 Composition and nutrient levels of the experimental diets %

以魚(yú)粉、豆粕為蛋白源，以食用菜油為脂肪源，參照美國(guó)國(guó)家科學(xué)研究委員會(huì)（1994）魚(yú)類(lèi)的營(yíng)養(yǎng)需要，段彪[13]和何雷[14]等的齊口裂腹魚(yú)飼料配方設(shè)計(jì)，基礎(chǔ)飼料配方及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1，飼料原料均過(guò)40目篩，按飼料配方表制得基礎(chǔ)飼料；在基礎(chǔ)飼料中分別添加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0、0.4%、0.8%、1.6%、3.2%的OKGM，分別記為對(duì)照組、OKGM0.4、OKGM0.8、OKGM1.6、OKGM3.2組，配成氮含量和能量相等的5 種飼料，實(shí)驗(yàn)飼料充分混合后用制粒機(jī)加工成直徑1 mm的硬顆粒飼料，干燥并密封保存于4 ℃?zhèn)溆谩?/p>

1.4 方法

1.4.1 樣品采集

實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，解剖齊口裂腹魚(yú)后迅速取出肝胰臟和肌肉組織，放入液氮中，-80 ℃保存?zhèn)溆茫槐臣∪〉? 根背鰭至最后1 根背鰭之間，側(cè)線(xiàn)以上白肌，腹肌取側(cè)線(xiàn)以下腹部肌肉（每次取樣位置盡可能在相同位置），置于-20 ℃冰箱中保存。

1.4.2 魚(yú)肉基本組成的測(cè)定

魚(yú)體粗蛋白質(zhì)采用凱氏定氮法測(cè)定（GB 5009.5—2010《食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定》）；粗脂肪和肌內(nèi)脂肪（intramuscular fat，IMF）采用索氏抽提儀測(cè)定法（GB/T 14772—2008《食品中粗脂肪的測(cè)定》）；水分采用干燥法測(cè)定（GB 5009.3—2010《食品中水分的測(cè)定》）；粗灰分采用馬福爐灼燒法測(cè)定（GB 5009.4—2010《灰分的測(cè)定》）。

1.4.3 肌肉pH值[15]和失水率[16]的測(cè)定

魚(yú)宰殺后取背部肌肉5 g，冷藏于4 ℃冰箱中24 h后，剔除肌間刺剪碎，加入少量蒸餾水，用研缽碾碎勻漿，然后轉(zhuǎn)移到小燒杯內(nèi)，加入等量蒸餾水混和均勻，靜置10 min后，提取上清液，用酸度計(jì)測(cè)定pH值。重復(fù)3 次，取平均值。

取魚(yú)體背部肌肉（相同位置）5 g，稱(chēng)質(zhì)量m0，于沸騰水中煮5 min，撈出冷卻，吸去魚(yú)肉表面水分，稱(chēng)質(zhì)量為m，按照公式（1）計(jì)算失水率，重復(fù)3 次，計(jì)算平均失水率。

1.4.4 肌肉羥脯氨酸含量的測(cè) 定及膠原蛋白含量[17]計(jì)算

羥脯氨酸含量按照試劑盒說(shuō)明書(shū)測(cè)定，以鮮樣計(jì)。膠原蛋白含量按照公式（2）計(jì)算，以濕質(zhì)量計(jì)。

1.4.5 肌肉和肝胰臟PPAR-α mRNA、FABP mRNA表達(dá)水平的測(cè)定

1.4.5.1 引物設(shè)計(jì)與合成

用Primer Premier 5.0軟件根據(jù)GenBank中齊口裂腹魚(yú)β-actin基因序列（JQ013000）、PPAR-α基因序列（KF316324）、FABP基因序列（GU205786）設(shè)計(jì)特異性引物，引物序列如表2。

表2 引物序列及退火溫度Table 2 Primer sequences and corresponding annealing temperatures

1.4.5.2 總RNA提取和cDNA制備

參照TRNzol總RNA提取試劑盒說(shuō)明書(shū)方法提取RNA，用1 g/100 mL的瓊脂糖凝膠電泳鑒定提取RNA的完整性，OD260nm/OD280nm檢測(cè)樣本純度。

cDNA由反轉(zhuǎn)錄試劑盒法制備放置于-20 ℃?zhèn)溆谩?/p>

1.4.5.3 RT-PCR基因檢測(cè)

采用SYBR GreenⅠ熒光染料法，10 μL反應(yīng)體系，含5 μL SYBR?Premix Ex TaqTM（2×）、上下游引物各0.25 μL、1 μL cDNA、3.5 μL DEPC水。熒光定量PCR步驟：95 ℃ 3 min；95 ℃ 10 s，55.8 ℃（β-actin） 30 s，39 個(gè)循環(huán)；95 ℃ 10 s；擴(kuò)增完畢后，迅速降溫到65 ℃進(jìn)行溶解曲線(xiàn)分析，然后以0.5 ℃/s的速率從65 ℃遞增到95 ℃，連續(xù)測(cè)定樣品熒光強(qiáng)度以獲取溶解曲線(xiàn)。

1.4.5.4 相對(duì)表達(dá)量 的分析

以β-actin基因作為內(nèi)參基因，選擇一校準(zhǔn)樣本，比較待測(cè)樣本相對(duì)校準(zhǔn)樣本的表達(dá)差異，利用2-△△Ct法進(jìn)行相對(duì)定量分析[18]。

式中：Δ ΔCt=（Ct受檢基因-Ctβ-actin）待測(cè)樣本-（Ct受檢基因-Ctβ-actin）校準(zhǔn)樣本

結(jié)果是通過(guò)參照基因表達(dá)水平校正的待測(cè)樣本中的目標(biāo)基因相對(duì)于校準(zhǔn)樣本的相對(duì)表達(dá)量，用參照基因校準(zhǔn)目標(biāo)基因表達(dá)來(lái)彌補(bǔ)樣本組織量的差異。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

結(jié)果用x±s表示，采用SPSS 19.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析（One-Way ANOVA），Duncan’s多重比較，差異顯著水平為P＜0.05。

2 結(jié)果與分析

2.1 日糧OKGM對(duì)齊口裂腹魚(yú)品質(zhì)的影響

2.1.1 日糧OKGM對(duì)齊口裂腹魚(yú)背肌和腹肌基本成分的影響

表3 日糧OKGM對(duì)齊口裂腹魚(yú)的背肌和腹肌基本成分的影響x±s，n＝8）Table 3 Effect of dietary OKGM on basic composition of back muscle and abdominal muscle of Schizothorax prenanti Tchang x±s，n＝8) g/100 g

由表3可知，與對(duì)照組相比，日糧OKGM添加量對(duì)齊口裂腹魚(yú)背肌水分、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、粗灰分的影響均不顯著（P＞0.05），當(dāng)日糧OKGM添加量達(dá)到1.6%

及以上時(shí)，能顯著增加齊口裂腹魚(yú)腹肌中蛋白質(zhì)含量（P＜0.05），當(dāng)日糧中添加了OKGM，齊口裂腹魚(yú)腹肌粗脂肪均有所降低，但OKGM添加量為0.8%時(shí)，腹肌粗脂肪才顯著降低（P＜0.05），日糧OKGM添加量對(duì)齊口裂腹魚(yú)腹肌中水分和粗灰分影響不顯著（P＞0.05）。

2.1.2 日糧OKGM對(duì)齊口裂腹魚(yú)肌肉pH值、失水率、羥脯氨酸及膠原蛋白含量的影響

表4 日糧OKGM對(duì)齊口裂腹魚(yú)肌肉中pH值、失水率、羥脯氨酸及其膠原蛋白含量的影響（x±s，n＝8）Table 4 Effect of dietary OKGM on muscle pH, dehydration rate, hydroxyproline content and collagen content of Schizothorax prenanti Tchang (x±s，n＝8)

由表4可知，齊口裂腹魚(yú)肉冷藏24 h后，與對(duì)照組相比，日糧OKGM添加量為0.4%和1.6%能顯著降低肌肉的pH值（P＜0.05），日糧OKGM添加量對(duì)齊口裂腹魚(yú)肌肉中的失水率、羥脯氨酸含量、膠原蛋白含量的影響均無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。

2.2 日糧OKGM對(duì)齊口裂腹魚(yú)IMF的影響

由圖1可知，與對(duì)照組相比，日糧OKGM添加量為0.8%時(shí)能顯著降低齊口裂腹魚(yú)IMF含量（P＜0.05），其他組間的差異不顯著（P＞0.05）。

圖1 日糧OKGM對(duì)齊口裂腹魚(yú)IMF的影響Fig.1 Effect of dietary OKGM on intramuscular fat of Schizothorax prenanti Tchang

2.3 日糧OKGM對(duì)齊口裂腹魚(yú)肌肉和肝胰臟PPAR-α mRNA、FABP mRNA表達(dá)水平的影響

2.3.1 日糧OKGM對(duì)齊口裂腹魚(yú)肌肉中PPAR-α mRNA表達(dá)水平的影響

圖2 日糧OKGM對(duì)齊口裂腹魚(yú)肌肉中PPAR-α mRNA 表達(dá)水平的影響Fig.2 Effect of dietary OKGM on PPAR-α mRNA expression level in muscle of Schizothorax prenanti Tchang

由圖2可知，日糧OKGM組肌肉中PPAR-α mRNA 表達(dá)水平都高于對(duì)照組，當(dāng)OKGM添加量為1.6%時(shí)，肌肉中PPAR-α mRNA表達(dá)水平顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），其他組PPAR-α mRNA增加都不顯著（P＞0.05）。

2.3.2 日糧OKGM對(duì)齊口裂腹魚(yú)肝胰臟中PPAR-α mRNA表達(dá)水平的影響

圖3 日糧OKGM對(duì)齊口裂腹魚(yú)肝胰臟PPAR-α mRNA表達(dá)量的影響Fig.3 Effect of dietary OKGM on PPAR-α mRNA expression level in liver of Schizothorax prenanti Tchang

由圖3可知，日糧OKGM組肝胰臟中PPAR-α mRNA 表達(dá)水平都高于對(duì)照組，當(dāng)OKGM添加量為0.8%時(shí)，肝胰臟中PPAR-α mRNA 表達(dá)水平顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），其他組PPAR-α mRNA增加都不顯著（P＞0.05）。

2.3.3 日糧OKGM對(duì)齊口裂腹魚(yú)肌肉中FABP mRNA表達(dá)水平的影響

圖4 日糧OKGM對(duì)齊口裂腹魚(yú)肌肉中FABP mRNA表達(dá)水平的影響Fig.4 Effect of dietary OKGM on FABP mRNA expression level in muscle of Schizothorax prenanti Tchang

由圖4可知，與對(duì)照組相比，日糧OKGM添加量為0.8%能極顯著降低齊口裂腹魚(yú)肌肉中FABP mRNA表達(dá)水平（P＜0.01），其他組差異都不顯著（P＞0.05）。

2.3.4 日糧OKGM對(duì)齊口裂腹魚(yú)肝胰臟中FABP mRNA表達(dá)水平的影響

圖5 日糧OKGM對(duì)齊口裂腹魚(yú)肝胰臟中FABP mRNA表達(dá)水平的影響Fig.5 Effect of dietary OKGM on FABP mRNA expression level in liver of Schizothorax prenanti Tchang

由圖5可知，與對(duì)照組相比，日糧OKGM添加量對(duì)齊口裂腹魚(yú)肝胰臟中FABP mRNA表達(dá)水平影響均不顯著（P＞0.05）。

3 討 論

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，日糧OKGM添加量對(duì)齊口裂腹魚(yú)背肌和腹肌中的水分和粗灰分含量沒(méi)有影響，但能增加齊口裂腹魚(yú)腹肌中蛋白質(zhì)含量，降低腹肌粗脂肪含量，這與向梟等[19]的研究結(jié)果基本一致，對(duì)齊口裂腹魚(yú)肌肉的pH值、失水率、羥脯氨酸和膠原蛋白含量基本沒(méi)有影響，魚(yú)肌肉的pH值直接影響肌肉組織的系水力和嫩度，當(dāng)宰后肌肉pH值下降時(shí)肌肉組織的蛋白質(zhì)保持內(nèi)含水分的能力隨之降低。pH值越高，肌肉的嫩度越好，本實(shí)驗(yàn)中添加OKGM對(duì)齊口裂腹魚(yú)肌肉中的pH值并沒(méi)有造成顯著影響，因此添加OKGM不會(huì)降低其持水力，影響其品質(zhì)，綜上所述，日糧中添加適量的OKGM能一定程度改善齊口裂腹魚(yú)肌肉品質(zhì)。

本實(shí)驗(yàn)中，日糧添加OKGM能升高肌肉和肝胰臟中PPAR-α mRNA表達(dá)水平，PPAR-α可以調(diào)節(jié)若干線(xiàn)粒體脂肪酸催化酶的表達(dá)，通過(guò)誘導(dǎo)肌肉和肝臟特異性的肉毒堿棕?cái)R酸轉(zhuǎn)運(yùn)酶表達(dá)而調(diào)控脂肪酸向線(xiàn)粒體的轉(zhuǎn)運(yùn)，刺激β-氧化過(guò)程，降低脂肪酸和甘油三酯合成。

日糧OKGM添加量為0.8%能極顯著降低齊口裂腹魚(yú)肌肉中FABP mRNA表達(dá)水平，但對(duì)齊口裂腹魚(yú)肝胰臟中FABP mRNA表達(dá)水平的影響不顯著。FABP主要參與細(xì)胞內(nèi)脂肪酸的運(yùn)輸，可將脂肪酸從細(xì)胞膜上運(yùn)送到甘油三酯和磷脂合成的位點(diǎn)，調(diào)節(jié)體脂含量，尤其是調(diào)節(jié)肌間脂肪含量。FABP能夠加強(qiáng)脂肪酸的轉(zhuǎn)運(yùn)擴(kuò)散，調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)脂肪酸的濃度，優(yōu)先結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)脂肪酸，促進(jìn)甘油三酯的合成。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，當(dāng)OKGM添加量為0.8%時(shí)能夠顯著降低齊口裂腹魚(yú)肌肉中FABP mRNA表達(dá)水平，這與IMF含量變化趨勢(shì)一致，這與林亞秋等[20]的研究結(jié)果基本一致。而肌間脂肪被認(rèn)為與肉質(zhì)風(fēng)味及口感呈正相關(guān)，影響肉質(zhì)的嫩度、風(fēng)味、多汁性，特別是肉的嫩度[21]。因此，深入了解動(dòng)物體脂肪組織的發(fā)育和生長(zhǎng)機(jī)理對(duì)于控制多余脂肪沉積有積極意義。

[1] 溫安祥, 曾靜康, 何濤. 齊口裂腹魚(yú)肌肉的營(yíng)養(yǎng)成分分析[J]. 水利漁業(yè), 2003, 23(1): 13-15.

[2] 宋昭彬. 齊口裂腹魚(yú)和巖原鯉野生種群遺傳多樣性研究[D]. 成都:四川大學(xué), 2005.

[3] 若木, 王鴻泰, 殷啟云, 等. 齊口裂腹魚(yú)人工繁殖的研究[J]. 淡水漁業(yè), 2001, 31(6): 3-5.

[4] 耿毅, 汪開(kāi)毓, 昊麟, 等. 齊口裂腹魚(yú)敗血癥的病原分離與鑒定[J].水利漁業(yè), 2004, 24(4):71-73.

[5] 黃明發(fā), 張盛林. 魔芋膳食纖維保健作用研究進(jìn)展[J]. 中國(guó)食物與營(yíng)養(yǎng), 2010(5): 75-77.

[6] 趙占宇. 共軛亞油酸(CLA)對(duì)大黃魚(yú)脂肪代謝、免疫、肉品質(zhì)及PPAR基因表達(dá)的影響[D]. 杭州: 浙江大學(xué), 2008.

[7] VAMECQ J, LATRUFFE N. Medical significance of peroxisome proliferator-activated receptors[J]. The Lancet, 1999, 354: 141-148.

[8] DESVERGNE B, IJPENBERG A, DEVCHAND P R, et al. The peroxisome proliferators-activated receptors at the cross-road of diet and hormonal signalling[J]. The Journal of Steroid Bioehemistry and Moleeular Biology, 1998, 65(1/6): 65-74.

[9] PANADERO M, VIDAL H, HERRERA E, et al. Nutritionally induced changes in the peroxisome proliferator-activated receptor-alpha gene expression in liver of suckling rats are dependent on insulinaemia[J]. Archives of Biochemistry and Biophysics, 2001, 394(2): 182-188.

[10] 姜延志, 李學(xué)偉, 楊光希. 豬L-FABP 基因的克隆、表達(dá)特征及遺傳多態(tài)性研究[J]. 遺傳學(xué)報(bào), 2006, 33(7): 598-606.

[11] 蔣金津, 陳立祥, 鄒增丁. 脂肪酸結(jié)合蛋白的研究進(jìn)展[J]. 畜牧與飼料科學(xué), 2009, 30(2): 6-8.

[12] 吳波, 陳運(yùn)中, 徐凱, 等. 魔芋葡甘聚糖的氧化改性及其性質(zhì)研究[J].糧油深加工及食品, 2008(5): 15-16.

[13] 段彪, 向梟, 周興華, 等. 齊口裂腹魚(yú)飼料中適宜脂肪需要量的研究[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào), 2007, 19(3): 232-236.

[14] 何雷. 齊口裂腹魚(yú)幼魚(yú)對(duì)蛋白質(zhì)、脂肪和糖適宜需要量的研究[D].雅安: 四川農(nóng)業(yè)大學(xué), 2008.

[15] 王艷萍, 曾維斌, 廖秋萍, 等. 阿克蘇地區(qū)三種食用魚(yú)肉質(zhì)特性的比較分析[J]. 淡水漁業(yè), 2012, 42(3): 81-83.

[16] 任澤林, 李?lèi)?ài)杰. 飼料組成對(duì)中國(guó)對(duì)蝦肌肉組織中膠原蛋白、肌原纖維和失水率的影響[J]. 中國(guó)水產(chǎn)科學(xué), 1998, 5(2): 40-44.

[17] 李星星. 半咸水暫養(yǎng)羅非魚(yú)、草魚(yú)改善其肉質(zhì)的研究[D]. 上海: 上海水產(chǎn)大學(xué), 2006.

[18] PFAFFL M W. A new mathematical model for relative quantification in real-time RT-PCR[J/OL]. Nucleic Acids Research, 2001, 29(9): e45. doi: 10.1093/nar/29.9.e45.

[19] 向梟, 陳建, 周興華, 等. 黃芪多糖對(duì)齊口裂腹魚(yú)生長(zhǎng)、體組成和免疫指標(biāo)的影響[J]. 水生生物學(xué)報(bào), 2011, 35(2): 291-299.

[20] 林亞秋, 李瑞文, 鄭玉才, 等. 齊口裂腹魚(yú)和鯉魚(yú)H-FABP基因的克隆及其表達(dá)譜[J]. 中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào), 2012, 27(6): 554-560.

[21] GERBENS F, VERBURG F J, van MOERKERK H T, et al. Associations of heart and adipocyte fatty acid-binding protein gene expression with intramuscular fat content in pigs[J]. Journal of Animal Science, 2001, 79(2): 347-354.

Effect of Dietary Oxidized Konjac Glucomannan on Quality and Lipid Metabolism-Related Gene Expression of Schizothorax prenanti Tchang

ZHOU Cheng, WU Ying-long*, XIANG Shi-qiong, XIA Xiao-jie
(College of Food Science, Sichuan Agricultural University, Ya’an 625014, China)

Objective: To study the effect of dietary oxidized konjac glucomannan (OKGM) on the quality and lipid metabolismrelated gene expression of Schizothorax prenanti Tchang (SPT). Methods: The SPT with body weight of approximately 80 g were randomly divided into five groups which were fed 0 (control group), 0.4%, 0.8%, 1.6% and 3.2% (experimental groups) OKGM for 60 days, respectively. The results showed that compared with the control group, the protein content in abdominal muscle of SPT was significantly increased by adding 1.6% and 3.2% OKGM in the SPT diet (P ＜ 0.05), the fat content in abdominal muscle was significantly reduced by adding 0.8% OKGM in the diet (P ＜ 0.05); however, the amount of OKGM had no significant impact on muscle moisture or crude ash in SPT (P ＞ 0.05). In addition, no significant difference in pH, dehydration rate, hydroxyproline content or collagen content in abdominal muscle of SPT was observed in response to varying amounts of OKGM (P ＞ 0.05). Meanwhile, PPAR-α mRNA expression level in muscle of SPT was significantly increased by dietary addition of 1.6% OKGM (P ＜ 0.05), and a significant increase in this parameter was also observed for liver of SPT administered with 0.8% OKGM (P ＜ 0.05). In contrast, FABP mRNA expression level in muscle of SPT was significantly decreased by dietary addition of 0.8% OKGM (P ＜ 0.01), yet the amount of OKGM had no significant impact on the expression level of FABP mRNA in liver (P ＞ 0.05). Conclusion: The dietary addition of OKGM can improve the quality of SPT and regulate the gene expression associated with lipid metabolism.

oxidized konjac glucomannan; Schizothorax prenanti Tchang; quality; peroxisome proliferator activated receptor-α; fatty acid-binding protein

TS254.1

A

1002-6630（2014）17-0245-05

10.7506/spkx1002-6630-201417047

2013-10-25

四川農(nóng)業(yè)大學(xué)“211工程”雙支計(jì)劃項(xiàng)目（2014）

周成（1986—），男，碩士研究生，研究方向?yàn)楣δ苄允称贰-mail：806888397@qq.com

*通信作者：鄔應(yīng)龍（1963—），男，教授，博士，研究方向?yàn)楣δ苄允称?。E-mail：wuyinglong99@163.com