【摘要】 因各種病毒感染而引起的疾病是臨床常見病。由于病毒寄生在細(xì)胞內(nèi)，且繁殖速度極快，變異機(jī)率極高，因此，如果按照常規(guī)方法診斷，并不能滿足臨床診斷的需求。而免疫檢驗(yàn)法不但能對病毒感染做出相對準(zhǔn)確的診斷，在預(yù)防接種、發(fā)病機(jī)理、免疫性治療等方面也有重要意義。本文將主要對免疫檢驗(yàn)法應(yīng)用于病毒感染中的進(jìn)展進(jìn)行分析，以促進(jìn)病毒感染免疫檢驗(yàn)技術(shù)的發(fā)展。

【關(guān)鍵詞】 病毒感染免疫；檢驗(yàn)；進(jìn)展

doi：10.3969/j.issn.1004-7484（s）.2013.11.837 文章編號：1004-7484（2013）-11-6810-02

隨著醫(yī)療事業(yè)的發(fā)展，傳統(tǒng)的常規(guī)病毒檢驗(yàn)方法已漸漸難以滿足各種病毒感染的檢驗(yàn)需求，免疫檢驗(yàn)法應(yīng)運(yùn)而生。免疫檢驗(yàn)法是在機(jī)體感染病毒后，通過所引起的免疫應(yīng)答機(jī)理，根據(jù)免疫細(xì)胞的數(shù)量和發(fā)揮的功能來對病情進(jìn)行判斷。免疫檢驗(yàn)還能較快的檢測出待檢標(biāo)本中的病毒，并根據(jù)抗體產(chǎn)生的速度、類型和濃度對患者進(jìn)行早期的病毒感染診斷，其作用不容忽視。

1 病毒感染引起的免疫性損害及機(jī)制

病毒是一種比較微小的生物，主要依靠宿主細(xì)胞而生存，其對宿主細(xì)胞的功能有一定損害作用，因此，會(huì)對機(jī)體的免疫功能產(chǎn)生抑制作用，從而會(huì)使機(jī)體的免疫病理發(fā)生改變。免疫抑制指的是通過感染免疫細(xì)胞而使免疫分子的表達(dá)下調(diào)，從而使免疫分子在血清中的有效濃度得到一定降低，進(jìn)而使機(jī)體的免疫應(yīng)答反應(yīng)有所減緩。免疫損害指機(jī)體因病毒感染而出現(xiàn)病理性免疫應(yīng)答，從而使非免疫應(yīng)答組織或器官出現(xiàn)免疫損傷，進(jìn)而對組織或器官受損。

2 早期病毒感染的免疫檢驗(yàn)方法

2.1 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)又叫ELISA試驗(yàn)，它能將免疫反應(yīng)的特異性和催化作用相結(jié)合進(jìn)行分析，并將已知的抗體或抗原吸附在反應(yīng)平板上，再進(jìn)行酶標(biāo)抗原抗體反應(yīng)的一種試驗(yàn)?zāi)Ｊ絒1]。在病毒檢驗(yàn)方面，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)是檢驗(yàn)藍(lán)舌病、豬偽狂犬病等病癥的標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的常用方法是雙抗夾心法和間接吸附試驗(yàn)，其中，雙抗夾心法是早期病毒感染抗原抗體檢驗(yàn)中最常用的方法。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)將酶的化學(xué)反應(yīng)與抗原的抗體反應(yīng)相關(guān)特異性結(jié)合，進(jìn)而促使ELISA試驗(yàn)變成一種敏感且特異的免疫檢測方法。

2.2 免疫熒光試驗(yàn) 免疫熒光試驗(yàn)是一項(xiàng)由熒光抗原法和熒光抗體法組成的免疫標(biāo)記技術(shù)。由于熒光素能與已知抗體結(jié)合形成熒光抗體，并將反應(yīng)后的熒光抗體置于熒光顯微鏡下觀察，根據(jù)散發(fā)出的熒光，對待檢標(biāo)本中的抗原進(jìn)行鑒定和判斷[2]。還可以采用免疫熒光試驗(yàn)將熒光素與蛋白質(zhì)結(jié)合，對抗體進(jìn)行檢測和定位。免疫熒光試驗(yàn)具有特異性、高效性和靈敏性，但檢測結(jié)果不夠客觀，檢驗(yàn)流程也過于復(fù)雜。

2.3 放射免疫技術(shù) 反射免疫技術(shù)又叫RIA技術(shù)，最早源自于1960年德國科學(xué)家創(chuàng)造的放射免疫分析技術(shù)，這種技術(shù)能讓抗體與被同位素標(biāo)記和未被標(biāo)記的抗原產(chǎn)生競爭性抑制，是一項(xiàng)體外微量性分析技術(shù)。放射免疫技術(shù)具有特異性、簡便性、靈敏度高、取樣數(shù)量少等特點(diǎn)，現(xiàn)階段主要用于對乙型肝炎病毒的鑒定與判斷。但由于檢測時(shí)會(huì)產(chǎn)生放射性物質(zhì)，會(huì)對研究者身體帶來一定的影，且有可能出現(xiàn)假陽性的檢測結(jié)果，還容易受外界環(huán)境因素影響而使得檢測結(jié)果出現(xiàn)異常。

2.4 血細(xì)胞凝集試驗(yàn) 血細(xì)胞凝集試驗(yàn)主要針對在當(dāng)機(jī)體感染病毒后，會(huì)讓病毒表面的抗原與紅細(xì)胞表面的抗原受體結(jié)合，血細(xì)胞沉降率增加，形成血細(xì)胞凝集現(xiàn)象。這種試驗(yàn)方法能對病毒進(jìn)行定性定量的檢測，如果機(jī)體內(nèi)存在病毒抗體，就會(huì)抑制因病毒而引起的血細(xì)胞凝集現(xiàn)象[3]。這種試驗(yàn)方法通常用于檢測梅毒螺旋體等病毒，這種方法目前只能確診梅毒患者，對其他病毒感染尚無法確診。此外，研究人員還根據(jù)病毒凝集紅細(xì)胞的能力和對相應(yīng)抗體的抑制特性設(shè)計(jì)出了血凝抑制試驗(yàn)。

2.5 中和實(shí)驗(yàn)法 又稱標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)法，主要包括固定病毒-血清稀釋法和固定血清-稀釋病毒法兩種。這種方法主要檢測病毒的感染力，以病毒受到血清中和后的殘留感染力為依據(jù)，來對該免疫血清抑制病毒擴(kuò)散的能力進(jìn)行判斷。臨床上常用它來分析堅(jiān)定病毒的類型和病毒的抗原性等。

3 新型病毒感染免疫檢驗(yàn)方法

3.1 重組免疫試驗(yàn) 重組免疫試驗(yàn)主要對HIV抗體和HCV抗體進(jìn)行檢測。與酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)方法相比，重組免疫試驗(yàn)?zāi)軐⒏鞣N橫線式抗原結(jié)合在硝酸或纖維素膜的橫條上，并置于長條凹槽反應(yīng)盤中，加底物顯色后就能顯示血清中存在的針對性抗原。同時(shí)，這種試驗(yàn)方法也能用于口蹄疫病毒的臨床檢測[4]。

3.2 膠體金技術(shù) 以膠體金作為標(biāo)志物，應(yīng)用于抗原抗體反應(yīng)中的一種新型免疫檢驗(yàn)技術(shù)，具有特異性、簡便性、安全性等特點(diǎn)。膠體金是一種能在還原劑作用下聚集形成較小金顆粒，并能與蛋白質(zhì)結(jié)的生物藥性，它還能與其他多種生物分子結(jié)合，因此多用于免疫學(xué)、組織學(xué)、病理學(xué)等領(lǐng)域，以及對HIV的篩查和人體血清甲胎蛋白的檢驗(yàn)。

3.3 發(fā)光免疫試驗(yàn) 發(fā)光免疫試驗(yàn)是一種將化學(xué)發(fā)光物質(zhì)與機(jī)體免疫反應(yīng)相結(jié)合，并通過光反應(yīng)來表示待測物質(zhì)的免疫成分和濃度的新型檢驗(yàn)方法。這種方法可以利用放光劑作為標(biāo)記物，保證檢驗(yàn)在安全可行的環(huán)境中進(jìn)行，是一種無害無毒的安全檢測方法。同時(shí)，發(fā)光免疫試驗(yàn)?zāi)茉谳^短的時(shí)間內(nèi)完成對病毒的檢驗(yàn)，在一定程度上滿足了臨床檢測的需要，在現(xiàn)代化病毒檢測中有良好的發(fā)展前景。

4 結(jié) 語

隨著科技的發(fā)展，傳統(tǒng)的病毒感染檢驗(yàn)技術(shù)正在被眾多新型檢驗(yàn)技術(shù)取代，越來越多安全、高效、快捷的檢驗(yàn)技術(shù)被試驗(yàn)人員接受。同時(shí)，在對病毒感染進(jìn)行檢驗(yàn)的過程中，仍存在著如測量方法不當(dāng)、試驗(yàn)流程混亂、濃度超標(biāo)、標(biāo)本選取時(shí)間及方法不當(dāng)?shù)葐栴}，都不同程度地增大了病毒感染檢驗(yàn)的難度。因此，在病毒檢驗(yàn)過程中，要采用更高效、更安全、更簡便的新興檢驗(yàn)方法，以更好地促進(jìn)病毒檢驗(yàn)技術(shù)的發(fā)展，也能更好地為病毒感染檢驗(yàn)工作服務(wù)。

參考文獻(xiàn)

[1] 賈春玲，呂殿紅，等.酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)在幾種犬源人獸共患病檢測中的應(yīng)用[J].廣東畜牧獸醫(yī)科技，2012，19（6）：314-315.

[2] 董波，郭家香.芻議病毒感染免疫檢驗(yàn)的研究進(jìn)展[J].中外醫(yī)療，2012，31（27）：191-192.

[3] 彭宏君，史偉峰.漿細(xì)胞樣樹突狀細(xì)胞在抗病毒感染中作用研究進(jìn)展[J].中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志，2012，34（9）：274-275.

[4] 彭陸衡.病毒感染免疫檢驗(yàn)的研究進(jìn)展[J].中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用，2012，6（5）：121-122.