【摘要】 隨著科技的迅速發(fā)展,化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)已被廣泛應(yīng)用到臨床醫(yī)學(xué)和基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)的各個領(lǐng)域,是繼熒光免疫、繼酶免疫以及發(fā)射免疫等測定后的一種免疫技術(shù)。在臨床檢驗中應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù),為臨床檢驗提供診斷依據(jù),提高檢驗的準(zhǔn)確度。本文主要探討發(fā)光免疫技術(shù)的概況,并對臨床檢驗中應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)進行分析。
【關(guān)鍵詞】 臨床檢驗;應(yīng)用;化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)
doi:10.3969/j.issn.1004-7484(s).2013.11.826 文章編號:1004-7484(2013)-11-6802-02
化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)具有標(biāo)本用量較少、穩(wěn)定性較高、標(biāo)記物制備較容易、不污染環(huán)境、操作簡便以及便于實現(xiàn)自動化等優(yōu)點,主要將免疫分析與化學(xué)反光分析相結(jié)合,被廣泛應(yīng)用到臨床醫(yī)學(xué)和基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)中?;瘜W(xué)發(fā)光免疫技術(shù)是繼酶免疫、發(fā)射免疫以及熒光免疫測定之后的免疫技術(shù),在臨床檢驗中經(jīng)常需要檢測和分析表征性物質(zhì),以判斷疾病以及身體病理特征[1]。通過在臨床檢驗中應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù),快速分析各種物質(zhì),能夠提高檢測的靈敏度與準(zhǔn)確度。
1 化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)的概況
化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)主要包括化學(xué)發(fā)光分析和免疫分析系統(tǒng),用于抗原、抗體、酶、激素、維生素以及脂肪酸等檢測分析技術(shù)。化學(xué)發(fā)光分析是根據(jù)免疫反應(yīng)情況,待免疫反應(yīng)完之后加入酶或氧化劑等發(fā)光底物,發(fā)光底物經(jīng)過氧化會形成處于激發(fā)狀態(tài)的中間體,通過發(fā)射光子來釋放能量,以達到穩(wěn)定狀態(tài)。而免疫分析是在抗體或抗原之上利用標(biāo)記物進行直接的標(biāo)記,標(biāo)記物為化學(xué)物質(zhì)或酶,待抗體或抗原發(fā)生反應(yīng)后,會產(chǎn)生帶有抗體免疫的復(fù)合物。
化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)的原理是以化學(xué)發(fā)光劑對抗體或抗原進行直接標(biāo)記,待磁顆粒性、抗體或抗原發(fā)生反應(yīng)之后,在磁場的作用下,分離處于游離狀態(tài)和結(jié)合狀態(tài)的化學(xué)發(fā)光劑,將發(fā)光促進劑加入到結(jié)合狀態(tài)的部分,使其進行快速的發(fā)光反應(yīng),并以定性或定量的方式檢測處于結(jié)合狀態(tài)的發(fā)光強度?;瘜W(xué)發(fā)光免疫技術(shù)系統(tǒng)具有操作較為簡單,結(jié)果較為準(zhǔn)確可靠,且自動化程度較高以及試劑儲存的時間較長等優(yōu)點,可根據(jù)激發(fā)態(tài)分子能量的來源,將化學(xué)發(fā)光的過程分為生物發(fā)光、光照發(fā)光和化學(xué)發(fā)光。
2 化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)在臨床檢驗中應(yīng)用的類別
化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)在臨床檢驗中,主要分為酶催化化學(xué)發(fā)光的免疫分析、直接標(biāo)記發(fā)光物質(zhì)的免疫分析以及電化學(xué)發(fā)光的免疫分析。酶催化化學(xué)發(fā)光的免疫分析是通過抗體或抗原在標(biāo)本中發(fā)生反應(yīng)之時,采用發(fā)光的酶作為標(biāo)記物。直接標(biāo)記發(fā)光物質(zhì)的免疫分析是采用吖啶酯對體或抗原進行直接標(biāo)記,待抗體或抗原發(fā)生免疫反應(yīng)后會產(chǎn)生一種復(fù)合物,加入氫氧化鈉和帶有雙氧水的氧化劑后呈堿性,出現(xiàn)發(fā)光、分解等現(xiàn)象[2]。而電化學(xué)發(fā)光的免疫分析過程包括化學(xué)反光和電化學(xué),將三丙胺作為電子供體,對抗體或抗原用三聯(lián)吡啶釕進行標(biāo)記,在電場的作用下,通過電子轉(zhuǎn)移而產(chǎn)生發(fā)光反應(yīng)。
3 在臨床檢驗中應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)的分析
3.1 應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)分析傳染性疾病 乙型肝炎病毒是血清學(xué)的標(biāo)志物,是治療和評價機體免疫功能的重要指標(biāo)。診斷乙型肝炎病毒中的抗體或抗原的表面部分是否受到感染,這樣的診斷為常規(guī)酶法,但常規(guī)酶法會使低病毒含量的攜帶者出現(xiàn)漏檢的情況?;瘜W(xué)發(fā)光免疫技術(shù)和以前的常規(guī)酶法相比,具有線性范圍寬和高靈敏度等特點,在臨床檢驗中應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)對傳染性疾病進行分析,如對于已感染免疫病毒的兒童,應(yīng)對其體內(nèi)的甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒以及單純皰疹病毒以Bowser等進行測定,檢測出的靈敏度較高。
3.2 應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)分析腫瘤標(biāo)志物 腫瘤標(biāo)志物指腫瘤腫瘤在發(fā)生與增殖的過程中,通過腫瘤細(xì)胞進行合成、釋放或者是機體與腫瘤細(xì)胞發(fā)生反應(yīng),產(chǎn)生酶、激素、白質(zhì)以及癌基因產(chǎn)物等物質(zhì)?;颊叩募?xì)胞、血液以及組織中都會有腫瘤標(biāo)志物,利用化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)能夠快速的尋找到難以發(fā)現(xiàn)的腫瘤標(biāo)志物。通過對患者進行體外的輔助診斷以及術(shù)后監(jiān)測,能夠緩解患者的病痛。采用Mac等診斷和監(jiān)測食管癌患者的病情,如對血清中的癌胚抗原濃度、鱗狀細(xì)胞癌的抗原濃度等進行檢測。以Raslan和Shabin對健康孕婦德陰道液和胎膜早破中的人絨毛膜促線性激素和AFP標(biāo)志物進行比較,AFP的特異性和敏感度較高。
3.3 應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)分析心臟疾病 在臨床檢驗中,經(jīng)常以同丁酶對心臟疾病患者進行定量測定。心肌損傷的標(biāo)志物包括肌酸激酶、肌紅蛋白和肌鈣蛋白T,應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)分析心臟疾病的標(biāo)記物,能夠提高檢測的準(zhǔn)確度。通過采用Dutra等將肌鈣蛋白T(cTnT)的受體分子制成免疫傳感器,應(yīng)用于早期心肌梗死的臨床檢測,其方法較好,具有相關(guān)性,可以應(yīng)用到臨床中對標(biāo)本進行檢測。
3.4 應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)分析激素 激素是細(xì)胞和細(xì)胞間進行信息傳遞的媒介,主要指散在內(nèi)分泌細(xì)胞中或內(nèi)分泌腺所分泌出來的高效能的活性物質(zhì)。在臨床檢測中應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)分析和測定性激素、甲狀腺激素等激素,能夠為臨床診斷和治療提供比較可靠、準(zhǔn)確的實驗室數(shù)據(jù),提高檢測的靈敏度和特異性[3]。通過以Vutyavanich等對血清中的促黃體生成素、睪丸素、促卵泡生成素以及催乳素等進行檢測,以Karlsson對患者甲狀旁腺進行檢測,以Gayk和Schmidt對骨代謝標(biāo)志物中的降鈣素進行測量,并和放射免疫法相比,其精密度和準(zhǔn)確度較高。
3.5 應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)分析其他物質(zhì) 在臨床檢驗中,應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)還可以分析細(xì)菌、維生素、免疫球蛋白、細(xì)胞因子、酶以及基因等。通過Dasgupta等對血清中高辛含量進行檢測,以Quan等對食物中含有的鹽曲霉毒素B1進行檢測。
綜上所述,化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)具有不污染環(huán)境、操作簡便以及便于實現(xiàn)自動化等優(yōu)點,被廣泛應(yīng)用到臨床醫(yī)學(xué)和基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)中。在臨床檢驗中應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù),能夠為臨床檢驗提供數(shù)據(jù)依據(jù),提高檢測的精密度和準(zhǔn)確度。
參考文獻
[1] 施麗娟.發(fā)光免疫分析技術(shù)及在臨床檢驗中的應(yīng)用[J].檢驗醫(yī)學(xué)與臨床,2012,6(4):57-58.
[2] 劉愛國.學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)在臨床檢驗中的應(yīng)用分析[J].內(nèi)蒙古中醫(yī)藥,2013,7(14):89-90.
[3] 胡錦霞.學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)及其在臨床檢驗中的應(yīng)用[J].中國保健營養(yǎng),2013,5(1):61-62.